Notch信号途径对未成熟脑惊厥持续状态后海马神经发生和癫痫形成的调控作用
发布时间：2021-12-22 07:17
第一部分未成熟脑SC后不同时期海马神经发生和Notch信号途径的动态演变特征目的:探索未成熟脑在惊厥持续状态（Status convulsion,SC）后不同时期海马区神经干细胞（Neural stem cells,NSCs）增殖、迁移、分化的动态演变过程,明确Notch信号途径在SC后不同时期的变化特点。方法:选取20日龄的健康雄性Sprague-Dawley（SD）大鼠120只,随机分为SC模型组60只和正常对照组60只。采用氯化锂-匹罗卡品腹腔注射诱导建立SC模型,进行如下实验:（1）用Ki67标记细胞增殖状态,免疫荧光染色检测SC后1d、3d、60d时海马齿状回（dentategyrus,DG）中细胞增殖情况。（2）SC模型建立后腹腔注射Brd U标记NSCs,于SC后7天免疫荧光染色检测Brd U分布情况,分析NSCs的迁移情况。（3）于SC后28天荧光染色双标Brd U和GFAP或双标Brd U和Neu N,以检测NSCs分化为星型胶质细胞和神经元的情况。（4）免疫印迹法检测SC后7d、28d、60d海马Neu N和GFAP蛋白的表达。（5）尼氏染色分析SC后28d海马神经...
【文章来源】：重庆医科大学重庆市
【文章页数】：127 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
动物分组及实验流程
重庆医科大学博士研究生学位论文46对照组，第3天增加更加明显。而在SC后60天，SC组Ki67阳性细胞的数量迅速减少，显著低于正常对照组。SC组在以上检测时间点Ki67阳性细胞数变化的差异有统计学意义。说明长时程惊厥后急性期幼年鼠海马神经发生显著增加，而慢性期神经发生减少。图1-2SC后不同时期大鼠海马DG区Ki67表达的动态变化（Ki67：绿色，DAPI：蓝色，100×，标尺100μm，n=5）Figure1-2DynamicchangesofKi67+cellnumberlocatedwithinDGregionofratsfollowingSC（Ki67:green,DAPI:blue.Scalebars:100μm.n=5foreachtimepoint）表1-1SC后不同时期大鼠海马DG区内Ki67阳性细胞数变化（x±SD，n=5）Table1-1ChangeofKi67positivecellsinhippocampusDGregionofatdifferenttimeafterSC(x±SD，n=5)SC组对照组t值P值1d3d60d18.34±3.42***31.57±8.89***△3.05±1.13*7.22±2.165.03±1.865.98±1.746.1476.5343.1580.00030.00020.0134
重庆医科大学博士研究生学位论文49图1-4SC后28天不同组大鼠海马不同分区NSCs分化为神经元（BrdU绿色；NeuN红色；DAPI蓝色；黄箭头：BrdU/NeuN双标；白箭头：BrdU单标；200×，标尺:100μm)Figure1-4DifferentiationofNSCsintoneuronsinthehippocampus28daysafterSC(BrdUgreen;Neunred;DAPIblue;Yellowarrow:BrdU/Neundoublelabel;whitearrow:BrdUsinglelabel;200×,scale:100μm)图1-5SC后28天不同组大鼠海马不同分区NSCs分化为胶质细胞（BrdU绿色；GFAP红色；DAPI蓝色；黄箭头：BrdU/GFAP双标；白箭头：BrdU单标；200×；标尺:100μm)Figure1-5NSCsdifferentiatedintoglialcellsindifferenthippocampaldivisions28daysafter
本文编号：3545988
【文章来源】：重庆医科大学重庆市
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【学位级别】：博士
【部分图文】：
动物分组及实验流程
重庆医科大学博士研究生学位论文46对照组，第3天增加更加明显。而在SC后60天，SC组Ki67阳性细胞的数量迅速减少，显著低于正常对照组。SC组在以上检测时间点Ki67阳性细胞数变化的差异有统计学意义。说明长时程惊厥后急性期幼年鼠海马神经发生显著增加，而慢性期神经发生减少。图1-2SC后不同时期大鼠海马DG区Ki67表达的动态变化（Ki67：绿色，DAPI：蓝色，100×，标尺100μm，n=5）Figure1-2DynamicchangesofKi67+cellnumberlocatedwithinDGregionofratsfollowingSC（Ki67:green,DAPI:blue.Scalebars:100μm.n=5foreachtimepoint）表1-1SC后不同时期大鼠海马DG区内Ki67阳性细胞数变化（x±SD，n=5）Table1-1ChangeofKi67positivecellsinhippocampusDGregionofatdifferenttimeafterSC(x±SD，n=5)SC组对照组t值P值1d3d60d18.34±3.42***31.57±8.89***△3.05±1.13*7.22±2.165.03±1.865.98±1.746.1476.5343.1580.00030.00020.0134
重庆医科大学博士研究生学位论文49图1-4SC后28天不同组大鼠海马不同分区NSCs分化为神经元（BrdU绿色；NeuN红色；DAPI蓝色；黄箭头：BrdU/NeuN双标；白箭头：BrdU单标；200×，标尺:100μm)Figure1-4DifferentiationofNSCsintoneuronsinthehippocampus28daysafterSC(BrdUgreen;Neunred;DAPIblue;Yellowarrow:BrdU/Neundoublelabel;whitearrow:BrdUsinglelabel;200×,scale:100μm)图1-5SC后28天不同组大鼠海马不同分区NSCs分化为胶质细胞（BrdU绿色；GFAP红色；DAPI蓝色；黄箭头：BrdU/GFAP双标；白箭头：BrdU单标；200×；标尺:100μm)Figure1-5NSCsdifferentiatedintoglialcellsindifferenthippocampaldivisions28daysafter
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