HPV16 E7通过激活CDK6介导FoxM1上调肺癌细胞ACP5表达的分子机制

发布时间：2022-01-06 21:56

　　研究目的:肺癌是目前世界范围内常见的恶性肿瘤之一,其男性和女性肺癌发病率占恶性肿瘤的14%和12%,死亡率占恶性肿瘤的比例高达27%和25%。目前探索和发现新的癌基因和抑癌基因,阐明其作用机制并开展有效的靶向治疗,成为肺癌研究的热点和难点。人乳头瘤病毒（human papilloma virus,HPV）是一种环状双链DNA病毒,其感染与人类多种疾病相关,其中高危型HPV的持续感染与宫颈癌的发生密切相关。Syrj?nen于1979年首先提出HPV感染可能在肺癌的发生过程中起着重要的作用。随着分子生物学的飞速发展,现已发现高危型HPV16在肺癌的发生中是最常见的感染类型,HPV16中的E6和E7蛋白是肺癌发生发展中的主要致癌基因。本研究通过讨论肺癌患者与良性病变患者的胸膜腔积液细胞中HPV16 E7、CDK4/6、Fox M1、P16和ACP5的表达,在肺癌细胞系中研究HPV16 E7、CDK4/6、Fox M1、P16和ACP5之间所存在的负反馈调控关系,初步阐明HPV16 E7能通过P16-p Rb通路中CDK6/Fox M1表达上调负反馈抑制P16蛋白表达。因此,发现和研究新的具有... 

【文章来源】：中国医科大学辽宁省

【文章页数】：62 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

腹水患者的ACP染色

中的表达水平和表达强度明显高于恶性积液（p< 0.01）获得 ACP 阳性信号。者的 ACP 染色。80%的反应性间皮细胞是 ACP 染色阳性：细胞性 （细胞质中没有粉红色）。ACP 染色，x400。ACP，酸性磷

图 3 A、C. 在 H460 细胞中，转染 HPV16 E7 质粒，采用 Western blot 检测 E7、P16、CDK4、CDK6、FoxM1 及 ACP5 的蛋白表达，qRT-PCR 检测 E7、P16、CDK4、CDK6、FoxM1及 ACP5 的 mRNA 表达。图 3B、D. 在 LK2 细胞系中，干扰 E7SiRNA，Western blot 检测 E7、P16、CDK4、CDK6、FoxM1 和 ACP5 的蛋白表达水平，q RT-PCR 检测 E7、P16、CDK4、CDK6、FoxM1 和 ACP5 的 m RNA 的表达情况。* p＜0.05，** p＜ 0.01。3.3 干扰 HPV16 E7 明显下调了 P16、CDK6、FoxM1 及 ACP5 的蛋白表达，同时明显下调了 CDK6、FoxM1 及 ACP5 的 mRNA 表达。为进一步验证 HPV16 E7 对 P16、CDK4、CDK6、FoxM1 及 ACP5 的调控作用，我们通过干扰技术，采用 HPV16 E7-specific siRNA 将 LK2 细胞中的 HPV16 E7 敲除，应用 HPV16 E7-nonspecific siRNA 和模拟干扰作为空白对照，结果显示抑制HPV16 E7 明显下调了 P16、CDK6、FoxM1 及 ACP5 的蛋白表达，同时 P16、CDK6、FoxM1 及 ACP5 的 mRNA 表达也呈现下降趋势，其中 CDK6、FoxM1 及 ACP5 的mRNA 表达具有统计学意义，CDK4 的蛋白和 mRNA 表达变化均不明显，结果见图

【参考文献】：
期刊论文
[1]TMPRSS4基因在非小细胞肺癌中的表达研究[J]. 李受南,吴正球,卢强昌,雷敬富,罗德丰.  临床医学研究与实践. 2017(02)
[2]DLL4和TMPRSS4在非小细胞肺癌中的表达及临床意义[J]. 王维,池菲,栾艳超,白峰,李强.  临床误诊误治. 2016(07)



本文编号：3573235