OTUD4过表达对肝缺血再灌注损伤的保护作用及机制探讨
发布时间：2022-01-07 01:11
第一部分肝缺血再灌注体内外模型中OTUD4表达水平随时间变化情况目的:探索OTUD4在肝脏缺血再灌注体内外模型中表达的时间规律,同时检测NF-κB激活过程中TRAF6的K63泛素化水平。方法:1.小鼠肝缺血再灌注（Ischemia and reperfusion,IR）模型的构建。小鼠随机分为四组:假手术组（sham）、I1R3、I1R6、I1R9（“I”代表缺血时长,“R”代表再灌注时长）。2.ELISA检测不同再灌注时间小鼠血清IL-1β的表达水平。3.细胞缺氧复氧（Hypoxia reoxygenation,HR）模型的构建。随机分为六组:对照组（Control）、H9R1、H9R2、H9R3、H9R6、H9R9（“H”代表缺氧时长,“R”代表复氧时长）。4.Western-blot检测IR模型和HR模型中OTUD4及相关蛋白各时间点的表达水平。5.免疫沉淀与免疫印迹检测TRAF6泛素化。结果:1.成功建立了小鼠IR模型,缺血前肝脏呈粉红色,在无创血管夹阻断70%血供后肝脏呈灰白色。2.Western-blot结果显示:与Sham组相比,IR模型中OTUD4表达的水平下调,且随着...
【文章来源】：重庆医科大学重庆市
【文章页数】：92 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
小鼠IR模型的建立A:肝脏缺血前B：夹闭肝十二指肠韧带Figure1-1EstablishmentofHIRImodelinmice
重庆医科大学博士研究生学位论文40图1-1小鼠IR模型的建立A:肝脏缺血前B：夹闭肝十二指肠韧带Figure1-1EstablishmentofHIRImodelinmiceA:BeforehepaticischemiaB:Thehepatoduodenalligamentwasclipped2.2不同再灌注时间点小鼠血清中IL-1β表达水平小鼠随机分为四组：sham、I1R3、I1R6、I1R9。ELISA检测小鼠血清中IL-1β表达的水平。结果提示，与Sham组相比，IR模型中IL-1β表达的水平上调，且随着再灌注时间延长而逐渐增加，差异具有统计学意义（p<0.05），如图1-2所示。图1-2小鼠血清中IL-1β表达的水平(*p<0.05表示与sham组相比)Figure1-2SerumlevelofIL-1βinmice(n=6pergroup,*p<0.05versussham)
重庆医科大学博士研究生学位论文412.3不同再灌注时间点小鼠肝组织中OTUD4蛋白表达水平用western-blot检测各组小鼠肝脏组织OTUD4蛋白表达的水平。结果提示，与Sham组相比，IR模型中OTUD4表达的水平下调，且随着再灌注时间延长而逐渐降低，差异具有统计学意义（p<0.05），如图1-3所示。图1-3小鼠肝脏组织中OTUD4蛋白表达水平(*p<0.05表示与sham组相比)Figure1-3TheproteinlevelofOTUD4inlivertissueofmice(n=6pergroup,*p<0.05versussham)2.4不同复氧时间点细胞中OTUD4及NF-κB相关蛋白表达水平用western-blot检测各组细胞中OTUD4及NF-κB相关蛋白表达的水平。结果提示，与对照组相比，细胞HR模型中p-NF-κBp65蛋白表达水平上调，且随着复氧时间延长而逐渐增加；而OTUD4和IκB-α蛋白表达水平下调，且随着复氧时间延长而逐渐降低，差异具有统计学意义（p<0.05），如图1-4所示。图1-4细胞中OTUD4、p-NF-κBp65、NF-κBp65、IκB-α蛋白表达水平(*p<0.05表示与对照组比较)Figure1-4TheproteinlevelsofOTUD4、p-NF-κBp65、NF-κBp65、IκB-αincells(*p<0.05versuscontrol)
【参考文献】：
期刊论文
[1]泛素化修饰调控固有免疫信号通路的研究进展[J]. 王强,崔晔,李森林,王琛. 生命的化学. 2015(02)
[2]MiR-146a通过抑制TRAF6减轻自身免疫性心肌炎大鼠心脏炎症并改善其心功能[J]. 赵思嘉,许蔚起,刘娜,王丽君,吴岳,周娟,袁祖贻. 中国分子心脏病学杂志. 2015(01)
[3]Mechanisms of hepatic ischemia-reperfusion injury and protective effects of nitric oxide[J]. Lian-Yue Guan,Pei-Yao Fu,Pei-Dong Li,Zhuo-Nan Li,Hong-Yu Liu,Min-Gang Xin,Wei Li. World Journal of Gastrointestinal Surgery. 2014(07)
[4]类风湿关节炎患者滑膜TRAF6表达与血清骨代谢标志物的相关性[J]. 朱浪静,欧阳霞,郑东辉,马剑达,陈乐锋,韦秀宁,莫颖倩,戴冽. 中华医学杂志. 2014 (21)
[5]TRAF-mediated regulation of immune and inflammatory responses[J]. WANG YaYa1,ZHANG Peng2,LIU YingFang2 & CHENG GenHong1 1 Department of Microbiology,Immunology & Molecular Genetics,University of California Los Angeles,609 Charles E.Young Drive East,Los Angeles,California 90095,USA;2 National Laboratory of Biomacromolecules,Institute of Biophysics,Chinese Academy of Sciences,Beijing 100101,China. Science China（Life Sciences）. 2010(02)
[6]Histological and biochemical alterations in early-stage lobar ischemia-reperfusion in rat liver[J]. Hossein Ali Arab,Farhang Sasani,Mohammad Hossein Rafiee,Ahmad Fatemi,Abbas Javaheri. World Journal of Gastroenterology. 2009(16)
[7]脂多糖介导的人牙周膜成纤维细胞损伤过程中TRAF-6蛋白表达的研究[J]. 徐利东,李卫星,李霞,任娟,程珏,郝凤翔. 中国药物与临床. 2008(03)
本文编号：3573510
【文章来源】：重庆医科大学重庆市
【文章页数】：92 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
小鼠IR模型的建立A:肝脏缺血前B：夹闭肝十二指肠韧带Figure1-1EstablishmentofHIRImodelinmice
重庆医科大学博士研究生学位论文40图1-1小鼠IR模型的建立A:肝脏缺血前B：夹闭肝十二指肠韧带Figure1-1EstablishmentofHIRImodelinmiceA:BeforehepaticischemiaB:Thehepatoduodenalligamentwasclipped2.2不同再灌注时间点小鼠血清中IL-1β表达水平小鼠随机分为四组：sham、I1R3、I1R6、I1R9。ELISA检测小鼠血清中IL-1β表达的水平。结果提示，与Sham组相比，IR模型中IL-1β表达的水平上调，且随着再灌注时间延长而逐渐增加，差异具有统计学意义（p<0.05），如图1-2所示。图1-2小鼠血清中IL-1β表达的水平(*p<0.05表示与sham组相比)Figure1-2SerumlevelofIL-1βinmice(n=6pergroup,*p<0.05versussham)
重庆医科大学博士研究生学位论文412.3不同再灌注时间点小鼠肝组织中OTUD4蛋白表达水平用western-blot检测各组小鼠肝脏组织OTUD4蛋白表达的水平。结果提示，与Sham组相比，IR模型中OTUD4表达的水平下调，且随着再灌注时间延长而逐渐降低，差异具有统计学意义（p<0.05），如图1-3所示。图1-3小鼠肝脏组织中OTUD4蛋白表达水平(*p<0.05表示与sham组相比)Figure1-3TheproteinlevelofOTUD4inlivertissueofmice(n=6pergroup,*p<0.05versussham)2.4不同复氧时间点细胞中OTUD4及NF-κB相关蛋白表达水平用western-blot检测各组细胞中OTUD4及NF-κB相关蛋白表达的水平。结果提示，与对照组相比，细胞HR模型中p-NF-κBp65蛋白表达水平上调，且随着复氧时间延长而逐渐增加；而OTUD4和IκB-α蛋白表达水平下调，且随着复氧时间延长而逐渐降低，差异具有统计学意义（p<0.05），如图1-4所示。图1-4细胞中OTUD4、p-NF-κBp65、NF-κBp65、IκB-α蛋白表达水平(*p<0.05表示与对照组比较)Figure1-4TheproteinlevelsofOTUD4、p-NF-κBp65、NF-κBp65、IκB-αincells(*p<0.05versuscontrol)
【参考文献】：
期刊论文
[1]泛素化修饰调控固有免疫信号通路的研究进展[J]. 王强,崔晔,李森林,王琛. 生命的化学. 2015(02)
[2]MiR-146a通过抑制TRAF6减轻自身免疫性心肌炎大鼠心脏炎症并改善其心功能[J]. 赵思嘉,许蔚起,刘娜,王丽君,吴岳,周娟,袁祖贻. 中国分子心脏病学杂志. 2015(01)
[3]Mechanisms of hepatic ischemia-reperfusion injury and protective effects of nitric oxide[J]. Lian-Yue Guan,Pei-Yao Fu,Pei-Dong Li,Zhuo-Nan Li,Hong-Yu Liu,Min-Gang Xin,Wei Li. World Journal of Gastrointestinal Surgery. 2014(07)
[4]类风湿关节炎患者滑膜TRAF6表达与血清骨代谢标志物的相关性[J]. 朱浪静,欧阳霞,郑东辉,马剑达,陈乐锋,韦秀宁,莫颖倩,戴冽. 中华医学杂志. 2014 (21)
[5]TRAF-mediated regulation of immune and inflammatory responses[J]. WANG YaYa1,ZHANG Peng2,LIU YingFang2 & CHENG GenHong1 1 Department of Microbiology,Immunology & Molecular Genetics,University of California Los Angeles,609 Charles E.Young Drive East,Los Angeles,California 90095,USA;2 National Laboratory of Biomacromolecules,Institute of Biophysics,Chinese Academy of Sciences,Beijing 100101,China. Science China（Life Sciences）. 2010(02)
[6]Histological and biochemical alterations in early-stage lobar ischemia-reperfusion in rat liver[J]. Hossein Ali Arab,Farhang Sasani,Mohammad Hossein Rafiee,Ahmad Fatemi,Abbas Javaheri. World Journal of Gastroenterology. 2009(16)
[7]脂多糖介导的人牙周膜成纤维细胞损伤过程中TRAF-6蛋白表达的研究[J]. 徐利东,李卫星,李霞,任娟,程珏,郝凤翔. 中国药物与临床. 2008(03)
本文编号：3573510
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