hBMSCs在肿瘤微环境中分泌IL-6并上调IL-17水平协同促进DLBCL生长的研究

发布时间：2022-01-26 18:30

　　弥漫大B细胞淋巴瘤（DLBCL）是最常见的非霍奇金淋巴瘤亚型,是一种侵袭性淋巴瘤。虽然近年来一线的化疗方案R-CHOP（利妥昔单抗、环磷酰胺、多柔比星、长春新碱和强的松）改善了DLBCL患者的预后,但仍有相当一部分DLBCL患者因化疗耐药而出现进展或复发,这是困扰临床治疗的一大难题及挑战。目前DLBCL患者出现化疗耐药和复发的机制仍不明确,值得我们进一步研究。已有研究发现利妥昔单抗耐药与间充质干细胞有关,本研究将阐明DLBCL患者化疗耐药和复发与间充质干细胞的关系,阐明其具体的机制,为临床进一步解决DLBCL患者化疗耐药和复发提供新的靶向治疗策略。本论文用CCK-8法检测DLBCL细胞株（SU-DHL-2和SU-DHL-4细胞）的增殖,用克隆形成实验检测DLBCL细胞株克隆形成能力,用异种移植鼠来验证DLBCL的体内生长。分别使用免疫组化、qRT-PCR和ELISA法来检测白细胞介素（IL）-6和IL-17A在DLBCL细胞株共培养液中或者肿瘤组织中的表达。使用流式细胞术来分析Th17和Treg细胞的表达。使用蛋白质印迹法、基因芯片分析和生物信息分析来分析IL-6或IL-17A介导的D... 

【文章来源】：暨南大学广东省211工程院校

【文章页数】：93 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

hBMSCs在体外促进DLBCL细胞的生长，而PBMCs则增强这些作用

hBMSCs在体内通过分泌IL-6促进DLBCL的生长

暨南大学博士学位论文322.6IL-6或hBMSCs上调p-JAK2和p-STAT3激活JAK2/STAT3信号通路促进DLBCL细胞生长。为了研究hBMSCs或IL-6起作用的信号通路，我们对DLBCL细胞中的JAK2和STAT3磷酸化进行了检测。如图6A和图B所示，IL-6显著促进SU-DHL-2和SU-DHL-4细胞中JAK2和STAT3的磷酸化，而IL-6中和抗体则消除了由IL-6诱导的JAK2和STAT3的磷酸化。同样，hBMSCs上调了SU-DHL-4细胞中的p-JAK2和p-STAT3，而IL-6中和抗体则消除了这些作用（图6C）。总之，这些结果支持IL-6或hBMSCs通过JAK2/STAT3信号通路促进DLBCL细胞生长。图6JAK2和STAT3磷酸化参与IL-6或hBMSCs介导的DLBCL细胞的生长。在与IL-6(0.5ng/ml)和/或aIL-6(50μg/ml)共培养条件下，在0、15、30、60和120分钟时SU-DHL-2和SU-DHL-4细胞中磷酸化JAK2（A）和STAT3（B）的免疫印迹图像。（C）预先不用或用hBMSCs(1:1)和/或aIL-6(50μg/ml)处理30分钟后的SU-DHL-4细胞中磷酸化JAK2和STAT3的免疫印迹图像。所示数据代表三个独立实验中的一个。Figure6.JAK2andSTAT3phosphorylationwereinvolvedinIL-6-orhBMSCs-mediatedDLBCLcellgrowth.WesternblotimagesshowingJAK2(A)andSTAT3(B)phosphorylationinSU-DHL-2andSU-DHL-4cellsdetectedat0,15,30,60,and120minincultureswithIL-6(0.5ng/ml)and/oraIL-6(50μg/ml).(C)WesternblotimagesshowingJAK2andSTAT3phosphorylationinSU-DHL-4cellspretreatedwithoutorwithhBMSCs(1:1)and/oraIL-6

【参考文献】：
期刊论文
[1]2015年中国恶性肿瘤流行情况分析[J]. 郑荣寿,孙可欣,张思维,曾红梅,邹小农,陈茹,顾秀瑛,魏文强,赫捷.  中华肿瘤杂志. 2019 (01)
[2]中国城市癌症早诊早治项目进展[J]. 陈万青,李霓,石菊芳,任建松,陈宏达,李江,代敏,赫捷.  中国肿瘤. 2019(01)
[3]弥漫大B细胞淋巴瘤患者Th17细胞及相关细胞因子水平与预后的关系[J]. 钟伟杰,李庆山,许昕,邓家德,凌艳英,杜庆华,朱志刚.  广东医学. 2016(05)
[4]利妥昔单抗治疗前后弥漫大B细胞淋巴瘤患者Th17细胞及相关细胞因子的变化[J]. 钟伟杰,李庆山,陈钊,邓家德,凌艳英,杜庆华,朱志刚.  白血病.淋巴瘤. 2012 (12)



本文编号：3610969