前列腺癌细胞系PC-3来源的外泌体对破骨细胞分化的影响及其作用机制的研究

发布时间：2022-02-10 15:30

　　研究背景前列腺癌（prostate cancer,PCa）是男性最常见的恶性肿瘤之一,有90%的PCa转移都发生在骨组织中。外泌体是细胞释放的一种细胞外囊泡。外泌体携带着蛋白质、脂质和核酸等在细胞间传递信息。许多研究都指出,外泌体能促进癌细胞的侵袭和转移。在PCa骨转移里,外泌体也发挥了巨大的作用。在正常生理情况下,成骨细胞介导的骨形成和破骨细胞介导的骨吸收维持着平衡,使骨组织按人体需要有序地更新改造。但在病理情况下,这种平衡被打破,成骨细胞和破骨细胞的活性都有所改变。有研究认为破骨细胞主导的骨吸收能为PCa侵袭骨组织提供帮助。MiRNAs是大概22个核苷酸长度的非编码小RNA。最近,越来越多的研究展现了 miR-214在破骨细胞分化过程中的作用。我们猜想PC-3外泌体是通过改变破骨细胞内的miR-214水平来实现影响的。目前,有关PCa外泌体对破骨细胞影响的研究还比较少,相关的机制还不明确。研究目的探究PC-3来源的外泌体对破骨细胞分化的影响,探究miR-214在外泌体干扰破骨细胞分化过程中所发挥的作用,为临床治疗前列腺癌骨转移提供新的思路。研究方法1.PC-3外泌体的分离与鉴定培养... 

【文章来源】：南方医科大学广东省

【文章页数】：81 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

图１－１．电镜下ＰＣ－３外泌体的形态??

?第一章ＰＣ－３外泌体的分离与鉴定???１?６＂｜?．??Ｉ５?ｉ??〇?〇－１?■?１——Ｉ??０?５０?８５１００?１５０?２００?２５０??Ｄｉａｍｅｔｅｒ?（ｎｍ）??图１－２．?ＰＣ－３外泌体的粒径分析??Ｆｉｇ?１－２．?Ｐａｒｔｉｃｌｅ?ｓｉｚｅ?ａｎａｌｙｓｉｓ?ｏｆ?ＰＣ－３?ｃｅｌｌ－ｄｅｒｉｖｅｄ?ｅｘｏｓｏｍｅｓ??１．２．３流式细胞术鉴定外泌体表面标记??为了对所提取的外泌体进行鉴定，我们采用了流式细胞术来检测外泌体表??面的特异性标记。结果显示，空白对照组可见仪器背景干净，干扰少，系统误??差少。阴性对照组（ＮＣ）可见大部分外泌体（９４．６％）发出的荧光都在较低水??平，而加入了?ＣＤ６３抗体的外泌体有６９．６％为阳性，３０．４％为阴性，与ＮＣ组的??比较有显著性差异（尸＜０．０５）；加入了?ＣＤ８１的外泌体有８４．２％表现为阳性，１５．８％??为阴性，与ＮＣ组的对比有显著性差异（尸＜０．０５）（图１－３）。结果表明本次实验??使用超速离心法提取的外泌体纯度及产率均良好。??１４??

图２－１．不浓ＰＣ－３泌体培破细的


本文编号：3619086