小檗碱及其联合吉非替尼抑制NSCLC细胞增殖和EMT相关分子机制研究
发布时间：2022-02-19 18:21
目的:本研究的主要目的是探索小檗碱对EGFR-TKI治疗NSCLC时的增敏作用以及相关分子机制,以期为小檗碱潜在的抑癌作用提供更充分的理论依据,并有望对进一步提高靶向治疗的效果,为临床EGFR-TKI的联合用药提供新的方法和实验证据。方法:体外实验第一部分:1.采用MTT法和BrdU掺入法检测不同剂量小檗碱在不同的时间对EGFR-TKI不敏感的A549细胞和对EGFR-TKI突变耐药的H1975细胞增殖的影响;同时采用流式细胞术检测不同剂量BBR处理后各细胞周期的变化,以确认小檗碱对细胞增殖的抑制作用。2.采用MTT法检测小檗碱联合吉非替尼对A549和H1975细胞增殖的影响,并使用CompuSyn软件计算两药的联合用药指数,分析联合用药的效果,确认最佳联合用药剂量。同时,采用EdU染色法检测小檗碱联合吉非替尼对两细胞增殖的影响。3.采用Western blot法检测不同剂量小檗碱以及小檗碱联合吉非替尼对A549和H1975细胞内PDPK1,Sp1,DNMT1蛋白表达的影响;同时还使用Real-time PCR检测小檗碱对细胞内DNMT1 mRNA表达的影响;使用双荧光素酶报告基因系统...
【文章来源】：广州中医药大学广东省
【文章页数】：116 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
引言
第一章 文献研究
1.1 肺癌流行病学研究概况
1.2 非小细胞肺癌与EGFR-TKI靶向治疗研究进展
1.3 小檗碱抗肿瘤作用研究进展
1.4 DNMT1与肺癌发生发展的关系
1.5 上皮间质转化EMT与肿瘤发生发展和治疗的关系研究现状
1.5.1 EMT过程与肿瘤的发生与发展的关系
1.5.2 EMT与肺癌治疗关系研究进展
1.6 非编码RNA与肺癌发生发展关系研究进展
1.6.1 LncRNA HOTAIR与肺癌的发生发展以及治疗预后的关系
1.6.2 MicroRNA与肺癌发生发展关系的研究进展
第二章 实验材料与方法
2.1 体外细胞实验
2.1.1 实验材料
2.1.2 实验方法
2.2 体内动物实验
2.2.1 实验材料
2.2.2 实验方法
2.3 统计学处理
第三章 结果
3.1 小檗碱及其联合吉非替尼抑制NSCLC细胞生长的分子机制研究
3.1.1 小檗碱在体外对A549和H1975细胞生长和增殖的影响
3.1.2 小檗碱对A549和H1975细胞周期的影响
3.1.3 小檗碱对A549和H1975细胞内Sp1和PDPK1蛋白表达的影响;以及Sp1和PDPK1蛋白之间可能存在的相互作用
3.1.4 小檗碱对A549和H1975细胞内DNMT1蛋白、mRNA表达水平以及启动子活性的影响
3.1.5 小檗碱联合吉非替尼对肺癌细胞生长以及相应基因蛋白表达的影响
3.2 小檗碱及其联合吉非替尼抑制肺癌细胞EMT过程发生的分子机制研究
3.2.1 小檗碱对A549和H1975细胞EMT过程发生的影响
3.2.2 小檗碱联合吉非替尼对A549和H1975细胞EMT过程发生的影响
3.2.3 LncRNA HOTAIR在小檗碱介导的抑制肺癌细胞内EMT发生中的作用
3.2.4 miR-34a-5p在小檗碱介导的抑制肺癌细胞内EMT发生中的作用及相关分子机制
3.2.5 外源性过表达Snail可阻断肺癌细胞内小檗碱诱导的E-cadherin蛋白表达及其启动子活性的增加
3.3 体内动物实验的研究
3.3.1 一般状态观察
3.3.2 小檗碱联合吉非替尼对裸鼠体表肿瘤生长的影响
3.3.3 小檗碱联合吉非替尼协同抑制裸鼠体内肺转移瘤的生长
3.3.4 小檗碱联合吉非替尼对裸鼠体内肿瘤生长和EMT相关基因表达的影响
讨论
结语
参考文献
附录
在校期间发表论文情况
致谢
附件
【参考文献】：
期刊论文
[1]miR-34a通过Snail诱导肺癌EMT及促进其转移的分子机制[J]. 刘行仁,白义凤,梁良,冯静,邓菲. 中国免疫学杂志. 2017(05)
[2]小檗碱及其衍生物抗肿瘤作用研究进展[J]. 方慧华,李洪娇,何小蕾,姜远英,曹永兵,许激扬. 中国药学杂志. 2017(06)
[3]小檗碱抗肿瘤作用机制研究[J]. 高世勇,吕春雨,吴爽,林文瀚,于淼,东方,曲中原,许颖,项峥,刘颖杰,辛国松,李钧,陈宁,吴健,马爱英,季宇彬. 哈尔滨商业大学学报(自然科学版). 2017(01)
[4]非小细胞肺癌EGFR-TKI耐药的分子机制及防治策略[J]. 王阿曼,宁振,刘基巍. 中华肿瘤防治杂志. 2017(01)
[5]小檗碱的临床新用途及其作用机制研究进展[J]. 陈坚,刘杰. 上海医药. 2016(03)
[6]Predictive value of K-ras and PIK3CA in non-small cell lung cancer patients treated with EGFR-TKIs: a systemic review and meta-analysis[J]. Jie-Ying Chen,Ya-Nan Cheng,Lei Han,Feng Wei,Wen-Wen Yu,Xin-Wei Zhang,Shui Cao,Jin-Pu Yu. Cancer Biology & Medicine. 2015(02)
[7]HOTAIR:an oncogenic long non-coding RNA in different cancers[J]. Mohammadreza Hajjari,Abbas Salavaty. Cancer Biology & Medicine. 2015(01)
[8]肺癌患者血清中DNA甲基化酶的表达[J]. 魏小玲,冯斐斐,何其栋,冯悦静,王威,吴拥军. 郑州大学学报(医学版). 2014(02)
[9]DNA甲基化转移酶1在非小细胞肺癌中的表达及临床意义[J]. 刘启明. 实用临床医药杂志. 2011(23)
[10]小檗碱及其衍生物的研究进展[J]. 李波,朱维良,陈凯先. 药学学报. 2008(08)
博士论文
[1]小檗碱对乳腺癌细胞的放射增敏作用及其机制研究[D]. 王静.山东大学 2013
[2]小檗碱对膀胱癌的抑制作用及其机制研究[D]. 颜克强.山东大学 2012
[3]小檗碱对前列腺癌的抑制作用及其机制研究[D]. 王玉.山东大学 2011
[4]小檗碱对人胃癌细胞作用靶基因分离和连黛片治疗术后胃癌大肠癌的初步临床观察[D]. 郭淑杰.广州中医药大学 2000
硕士论文
[1]小檗碱联合多柔比星抗肿瘤作用的机制研究[D]. 宋霞.福建中医药大学 2014
[2]小檗碱对人卵巢癌细胞的生长抑制作用及其机制研究[D]. 徐光伟.山东大学 2013
[3]小檗碱对人高转移肺癌细胞系（PG）细胞增殖和转移的影响及机制研究[D]. 蒋艳.北京中医药大学 2004
本文编号：3633390
【文章来源】：广州中医药大学广东省
【文章页数】：116 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
引言
第一章 文献研究
1.1 肺癌流行病学研究概况
1.2 非小细胞肺癌与EGFR-TKI靶向治疗研究进展
1.3 小檗碱抗肿瘤作用研究进展
1.4 DNMT1与肺癌发生发展的关系
1.5 上皮间质转化EMT与肿瘤发生发展和治疗的关系研究现状
1.5.1 EMT过程与肿瘤的发生与发展的关系
1.5.2 EMT与肺癌治疗关系研究进展
1.6 非编码RNA与肺癌发生发展关系研究进展
1.6.1 LncRNA HOTAIR与肺癌的发生发展以及治疗预后的关系
1.6.2 MicroRNA与肺癌发生发展关系的研究进展
第二章 实验材料与方法
2.1 体外细胞实验
2.1.1 实验材料
2.1.2 实验方法
2.2 体内动物实验
2.2.1 实验材料
2.2.2 实验方法
2.3 统计学处理
第三章 结果
3.1 小檗碱及其联合吉非替尼抑制NSCLC细胞生长的分子机制研究
3.1.1 小檗碱在体外对A549和H1975细胞生长和增殖的影响
3.1.2 小檗碱对A549和H1975细胞周期的影响
3.1.3 小檗碱对A549和H1975细胞内Sp1和PDPK1蛋白表达的影响;以及Sp1和PDPK1蛋白之间可能存在的相互作用
3.1.4 小檗碱对A549和H1975细胞内DNMT1蛋白、mRNA表达水平以及启动子活性的影响
3.1.5 小檗碱联合吉非替尼对肺癌细胞生长以及相应基因蛋白表达的影响
3.2 小檗碱及其联合吉非替尼抑制肺癌细胞EMT过程发生的分子机制研究
3.2.1 小檗碱对A549和H1975细胞EMT过程发生的影响
3.2.2 小檗碱联合吉非替尼对A549和H1975细胞EMT过程发生的影响
3.2.3 LncRNA HOTAIR在小檗碱介导的抑制肺癌细胞内EMT发生中的作用
3.2.4 miR-34a-5p在小檗碱介导的抑制肺癌细胞内EMT发生中的作用及相关分子机制
3.2.5 外源性过表达Snail可阻断肺癌细胞内小檗碱诱导的E-cadherin蛋白表达及其启动子活性的增加
3.3 体内动物实验的研究
3.3.1 一般状态观察
3.3.2 小檗碱联合吉非替尼对裸鼠体表肿瘤生长的影响
3.3.3 小檗碱联合吉非替尼协同抑制裸鼠体内肺转移瘤的生长
3.3.4 小檗碱联合吉非替尼对裸鼠体内肿瘤生长和EMT相关基因表达的影响
讨论
结语
参考文献
附录
在校期间发表论文情况
致谢
附件
【参考文献】：
期刊论文
[1]miR-34a通过Snail诱导肺癌EMT及促进其转移的分子机制[J]. 刘行仁,白义凤,梁良,冯静,邓菲. 中国免疫学杂志. 2017(05)
[2]小檗碱及其衍生物抗肿瘤作用研究进展[J]. 方慧华,李洪娇,何小蕾,姜远英,曹永兵,许激扬. 中国药学杂志. 2017(06)
[3]小檗碱抗肿瘤作用机制研究[J]. 高世勇,吕春雨,吴爽,林文瀚,于淼,东方,曲中原,许颖,项峥,刘颖杰,辛国松,李钧,陈宁,吴健,马爱英,季宇彬. 哈尔滨商业大学学报(自然科学版). 2017(01)
[4]非小细胞肺癌EGFR-TKI耐药的分子机制及防治策略[J]. 王阿曼,宁振,刘基巍. 中华肿瘤防治杂志. 2017(01)
[5]小檗碱的临床新用途及其作用机制研究进展[J]. 陈坚,刘杰. 上海医药. 2016(03)
[6]Predictive value of K-ras and PIK3CA in non-small cell lung cancer patients treated with EGFR-TKIs: a systemic review and meta-analysis[J]. Jie-Ying Chen,Ya-Nan Cheng,Lei Han,Feng Wei,Wen-Wen Yu,Xin-Wei Zhang,Shui Cao,Jin-Pu Yu. Cancer Biology & Medicine. 2015(02)
[7]HOTAIR:an oncogenic long non-coding RNA in different cancers[J]. Mohammadreza Hajjari,Abbas Salavaty. Cancer Biology & Medicine. 2015(01)
[8]肺癌患者血清中DNA甲基化酶的表达[J]. 魏小玲,冯斐斐,何其栋,冯悦静,王威,吴拥军. 郑州大学学报(医学版). 2014(02)
[9]DNA甲基化转移酶1在非小细胞肺癌中的表达及临床意义[J]. 刘启明. 实用临床医药杂志. 2011(23)
[10]小檗碱及其衍生物的研究进展[J]. 李波,朱维良,陈凯先. 药学学报. 2008(08)
博士论文
[1]小檗碱对乳腺癌细胞的放射增敏作用及其机制研究[D]. 王静.山东大学 2013
[2]小檗碱对膀胱癌的抑制作用及其机制研究[D]. 颜克强.山东大学 2012
[3]小檗碱对前列腺癌的抑制作用及其机制研究[D]. 王玉.山东大学 2011
[4]小檗碱对人胃癌细胞作用靶基因分离和连黛片治疗术后胃癌大肠癌的初步临床观察[D]. 郭淑杰.广州中医药大学 2000
硕士论文
[1]小檗碱联合多柔比星抗肿瘤作用的机制研究[D]. 宋霞.福建中医药大学 2014
[2]小檗碱对人卵巢癌细胞的生长抑制作用及其机制研究[D]. 徐光伟.山东大学 2013
[3]小檗碱对人高转移肺癌细胞系（PG）细胞增殖和转移的影响及机制研究[D]. 蒋艳.北京中医药大学 2004
本文编号：3633390
本文链接：https://www.wllwen.com/shoufeilunwen/yxlbs/3633390.html
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