三七茎叶总皂苷对睡眠剥夺小鼠神经及心脏保护作用及机制研究

发布时间：2022-07-02 11:43

　　目的:睡眠剥夺与许多精神和神经退行性疾病密切相关,睡眠时间的不足以及睡眠质量的下降均会诱发多种严重的心律失常的发生。三七茎叶总皂苷（SLSP）主要来源于三七的地上茎叶部分,三七神安片临床用于用于心气血不足、心血瘀阻所致的心悸、失眠、胸痛、胸闷,具有益气安益气安神、活血止痛功效,用于心气血不足、心血瘀阻所致的心悸、失眠、胸痛、胸闷,但其对睡眠剥夺条件下的神经及心脏是否具有保护作用尚不明确。本研究以SLSP为研究对象,在睡眠剥夺小鼠、小鼠海马神经元和大鼠心肌H9C2细胞中,探讨其对睡眠剥夺小鼠海马神经元损伤和心脏损伤的保护作用及机制,以期为SLSP临床应用于因SD诱发的学习记忆下降及心脏损伤的防治提供理论基础。方法:1.SLSP改善SD小鼠空间学习记忆能力研究:采用Morris水迷宫训练小鼠学习记忆能力,并用改良多平台法对小鼠进行48小时的睡眠剥夺,通过行为学指标包括逃避潜伏期、穿越平台次数观察SLSP对睡眠剥夺小鼠学习记忆改善的作用。2.SLSP改善SD小鼠学习记忆能力作用机制研究:采用尼氏染色观察海马神经元结构、透射电镜观察海马组织中的自噬小体数量、组织免疫荧光观察自噬标记物LC3B的... 

【文章页数】：93 页

【学位级别】：博士

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摘要
Abstract
缩略词对照表
引言
第一章 三七茎叶总皂苷(SLSP)对睡眠剥夺(SD)小鼠神经保护作用及机制研究
    第一节 SLSP对 SD小鼠在体神经保护作用及机制研究
        1.材料与仪器
            1.1 实验动物
            1.2 试剂与材料
            1.3 实验仪器
        2 实验方法
            2.1 行为学实验
            2.2 Western Blot法检测小鼠海马组织中自噬相关蛋白和凋亡相关蛋白表达
            2.3 尼氏染色
            2.4 透射电镜
            2.5 免疫荧光法
            2.6 数据统计与分析
        3 实验结果
            3.1 SLSP明显改善SD小鼠学习记忆能力
            3.2 SLSP抑制SD小鼠海马神经元的形态学改变
            3.3 SLSP抑制SD小鼠海马神经元自噬
            3.4 SLSP调控SD小鼠海马凋亡和自噬蛋白的表达
        4 结果分析与讨论
    第二节 SLSP对雷帕霉素诱导HT-22 细胞过度自噬和凋亡的抑制作用机制研究
        1.材料与仪器
        2.实验方法
            2.1 CCK-8法检测细胞活力
            2.2 细胞培养、蛋白提取及Western Blot 操作
            2.3 细胞转染及加药
            2.4 细胞免疫荧光(ICC)
            2.5 吖靛橙染色
            2.6 流式细胞术
            2.7 统计方法
        3.实验结果
        4.结果分析与讨论
    第三节 三七皂苷 Fc 对雷帕霉素诱导的小鼠海马神经元 HT-22 细胞过度自噬和凋亡的抑制作用及机制研究
        1. 材料与仪器
        2. 实验方法
        3. 实验结果
        4 结果分析与讨论
第二章 SLSP对 SD小鼠心脏损伤的抑制作用及机制研究
    第一节 SLSP对 SD小鼠心脏损伤在体保护作用及机制研究
        1.材料与仪器
        2.实验方法
        3.实验结果
        4.结果分析和讨论
    第二节 SLSP对雷帕霉素诱导的大鼠心肌H9c2 细胞过度自噬和凋亡的抑制作用及机制研究
        1.材料与仪器
        2.实验方法
            2.1 细胞培养
            2.2 细胞转染及加药
            2.3 吖靛橙染色
            2.4 流式细胞法
        3.实验结果
            3.1 SLSP可抑制雷帕霉素诱导的H9c2 细胞的异常自噬和凋亡
            3.2 SLSP可调控雷帕霉素诱导的H9c2 细胞自噬和凋亡相关蛋白的表达
        4.讨论与分析
创新点
结论
致谢
References
附录一 综述 三七皂苷药理作用研究进展
    参考文献
附录二 博士期间发表的论文



本文编号：3654303