Hsa-let-7e-5p通过打靶趋化因子受体7抑制头颈鳞癌增殖、迁移和侵袭

发布时间：2022-07-20 16:45

　　目的:头颈部鳞状细胞癌（Head and Neck Squamous Cell Carcinoma,HNSCC）主要起源于上呼吸道和上消化道黏膜,主要累及口腔、咽和喉等部位,占头颈部癌症90%以上,是头颈部癌中最常见的一种严重威胁人类生命健康的恶性表皮来源性肿瘤,虽然近些年随着治疗方法的不断改善,但目前HNSCC患者5年的生存率仅仅保持在50-60%。miRNAs是一类长度约为20-24个核苷酸的内源性小分子非编码RNA,它通过与靶基因mRNA 3′UTR上的互补碱基相结合来抑制靶基因的表达,从而参与调节许多生理活动。目前,越来越多的证据表明,miRNA不仅参与动植物的生长发育,而且miRNA的异常表达与肿瘤的发生、发展以及转移有密切的关系。近期研究发现hsa-let-7e-5p在很多恶性肿瘤中异常表达,但其对头颈鳞癌发生发展的作用尚无文献报道。近些年研究发现趋化因子受体7（C-C motif chemokine receptor 7,CCR7）不仅在免疫细胞上大量表达,而且在多种肿瘤细胞上的表达也不同程度的升高,并且与人类肿瘤细胞的增殖、迁移、侵袭及不良预后等关系密切。我们课题组通过... 

【文章页数】：75 页

【学位级别】：博士

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摘要
Abstract
英文缩略语
1 前言
2 材料和方法
    2.1 主要仪器、试剂与材料
        2.1.1 主要仪器
        2.1.2 主要试剂
        2.1.3 材料
    2.2 实验方法
        2.2.1 细胞培养
        2.2.2 Hsa-let-7e-5p过表达和抑制载体的构建及过表达载体质粒的提取
        2.2.3 细胞转染
        2.2.4 总RNA提取及实时荧光定量PCR
        2.2.5 增殖实验
        2.2.6 划痕实验
        2.2.7 Transwell细胞实验
        2.2.8 生物信息学靶基因预测
        2.2.9 Western Blot实验
        2.2.10 荧光素酶实验
        2.2.11 体内实验
        2.2.12 统计分析
3 实验结果
    3.1 Hsa-let-7e-5p在头颈鳞癌细胞PCI-37B中相对低表达,在PCI-37A中相对高表达
    3.2 Hsa-let-7e-5p在头颈鳞癌患者原发肿瘤组织中低表达
    3.3 PCI-37B细胞转染hsa-let-7e-5pmimic后,hsa-let-7e-5p的表达水平显著升高
    3.4 PCI-37A细胞转染hsa-let-7e-5p inhibitor后,hsa-let-7e-5p的表达水平显著降低
    3.5 Hsa-let-7e-5p对头颈鳞癌细胞的增殖具有抑制性作用
    3.6 Hsa-let-7e-5p对头颈鳞癌细胞的迁移具有抑制性作用
        3.6.1 划痕实验结果
        3.6.2 Transwell迁移实验结果
    3.7 Hsa-let-7e-5p对头颈鳞癌细胞的侵袭具有抑制性作用
    3.8 生物信息学软件预测CCR7 可能为hsa-let-7e-5p的下游靶基因
    3.9 Hsa-let-7e-5p负向调控CCR
    3.10 Hsa-let-7e-5p直接打靶CCR
    3.11 异位过表达hsa-let-7e-5p抑制了异种移植肿瘤的生长
4 讨论
结论
本研究创新性的自我评价
参考文献
综述 关于头颈鳞癌 mi RNAs 的研究与进展
    参考文献
攻读学位期间取得的研究成果
致谢
个人简历



本文编号：3664361