染料木素对小鼠多囊卵巢综合征的治疗作用及其机制的研究

发布时间：2022-07-29 17:00

　　多囊卵巢综合征（Polycystic Ovarian Syndrome,PCOS）为育龄女性常见的一种复杂内分泌及代谢异常所致的疾病。临床症状通常表现为不孕、不规律的月经周期、多毛和/或痤疮、卵巢多囊样改变,可伴有胰岛素抵抗等代谢异常疾病。PCOS不仅影响女性生殖功能,还与妊娠期并发症以及II型糖尿病和心血管疾病等重大疾病的风险增加相关。然而,至今PCOS的病理机制仍无统一解释,亦未有统一的治疗方案及专门批准的PCOS治疗药物。目前临床治疗以对症治疗为主,往往具有较大副作用且患者负担较重。对PCOS病理机制的研究和治疗方案的探索关系着女性的生殖健康甚至终生健康。现有研究多认为,PCOS各种临床表现及并发症或与雄激素异常（过高）和胰岛素抵抗相关,两者是PCOS的两大病理特点。近年研究显示,氧化应激水平增加与PCOS进程密切相关。我们推测,有植物雌激素作用和抗氧化作用的中药单体染料木素（Genistein,GEN）、羟基红花黄色素A（Hydroxysafflor Yellow A,HSYA）和人参皂苷Rb1（Ginsenoside Rb1）可能对PCOS有治疗潜力。因此,以小鼠为研究对象,... 

【文章页数】：94 页

【学位级别】：博士

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中文摘要
abstract
前言
第一篇 文献综述
    第1章 多囊卵巢综合征的研究进展
        1.1 多囊卵巢综合征目前的临床诊断
        1.2 多囊卵巢综合征的治疗现状
            1.2.1 调整生活方式(lifestyle modification,LSM)
            1.2.2 药物治疗
        1.3 氧化应激与多囊卵巢综合征
        1.4 Nrf2-ARE信号通路与氧化应激
        1.5 染料木素的研究进展
            1.5.1 GEN的植物雌激素作用
            1.5.2 GEN的抗氧化作用
            1.5.3 GEN的其他作用
        1.6 羟基红花黄色素A的研究进展
            1.6.1 HSYA的植物雌激素作用
            1.6.2 HSYA的抗氧化作用
            1.6.3 HSYA的其他作用
        1.7 人参皂苷Rb1 的研究进展
            1.7.1 Ginsenoside Rb1 的植物雌激素作用
            1.7.2 Ginsenoside Rb1 的抗氧化作用
            1.7.3 Ginsenoside Rb1 的其他作用
第二篇 研究内容
    第1章 染料木素对小鼠多囊卵巢综合征的治疗作用
        1.1 材料与方法
            1.1.1 实验动物
            1.1.2 实验主要试剂与仪器
            1.1.3 实验动物分组及处理
            1.1.4 发情周期监测
            1.1.5 血清激素的测定
            1.1.6 卵巢形态学观察
            1.1.7 卵巢组织总RNA的提取
            1.1.8 引物设计
            1.1.9 荧光定量PCR
            1.1.10 数据统计分析
        1.2 结果
            1.2.1 小鼠PCOS模型的鉴定
            1.2.2 GEN、HSYA和Ginsenoside Rb1对PCOS小鼠发情周期和卵巢形态的影响
            1.2.3 GEN、HSYA和 Ginsenoside Rb1对PCOS小鼠激素分泌的影响
            1.2.4 GEN对 PCOS小鼠卵巢激素分泌相关基因表达量的影响
        1.3 讨论
    第2章 染料木素对小鼠多囊卵巢综合征的调节机制
        2.1 材料与方法
            2.1.1 实验动物
            2.1.2 实验主要试剂与仪器
            2.1.3 实验动物分组及处理
            2.1.4 卵巢组织氧化应激水平的测定
            2.1.5 GCs的原代培养
            2.1.6 GCs的处理及分组
            2.1.7 GCs分泌功能的检测
            2.1.8 荧光定量PCR检测GCs类固醇分泌相关基因mRNA表达水平
            2.1.9 GCs的氧化应激水平检测
            2.1.10 数据统计分析
        2.2 结果
            2.2.1 GEN对 PCOS小鼠卵巢组织氧化应激水平的影响
            2.2.2 GEN对 DHEA处理的GCs分泌功能的影响
            2.2.3 GEN对 DHEA处理的GCs激素分泌相关基因表达量的影响
            2.2.4 GEN对 DHEA处理的GCs氧化应激水平的影响
            2.2.5 GEN对 DHEA处理的小鼠GCs抗氧化酶SOD、CAT、GSH-Px和 GR水平的影响
            2.2.6 GSH、SOD、CAT、GSH-Px和 GR在 GEN增强DHEA处理的小鼠GCs的抗氧化能力中具有关键作用
            2.2.7 GSH、SOD、CAT、GSH-Px和 GR在 GEN保护DHEA处理的小鼠GCs的分泌功能中具有关键作用
            2.2.6 GEN对 DHEA处理的GCs线粒体功能的影响
        2.3 讨论
    第3章 染料木素通过促进Nrf2 核转位与ARE序列结合转录激活Foxo1 表达发挥抗氧化作用
        3.1 材料与方法
            3.1.1 实验动物
            3.1.2 实验主要试剂与仪器
            3.1.3 实验动物分组及处理
            3.1.4 GCs的原代培养
            3.1.5 GCs的处理及分组
            3.1.6 质粒构建设计
            3.1.7 PCR产物的胶回收实验
            3.1.8 DNA片段连接
            3.1.9 重组DNA转化
            3.1.10 菌液PCR鉴定
            3.1.11 提取质粒实验
            3.1.12 细胞转染
            3.1.13 双荧光素酶活性测定
            3.1.14 Western Blot分析
        3.2 结果
            3.2.1 GEN促进Nrf2 的表达和核移位
            3.2.2 Nrf2 进一步激活Foxo1 的表达对抗氧化应激
            3.2.3 Nrf2 通过核转位与ARE序列结合转录激活Foxo1 表达
        3.3 讨论
结论
参考文献
附表
导师简介
作者简介
致谢


【参考文献】：
期刊论文
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[3]活性氧簇、氧化应激与子宫内膜异位症的关系研究进展[J]. 和儒林,刘玉环.  中华妇产科杂志. 2019 (03)
[4]重视多囊卵巢综合征患者的生活方式调整[J]. 王笑臣,杨菁.  中华妇产科杂志. 2018 (01)
[5]氧化应激与多囊卵巢综合征雄激素增多症关系的研究现状[J]. 张仁浇,刘宏伟,白怀,范平.  中华妇幼临床医学杂志(电子版). 2017(06)
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博士论文
[1]小鼠卵巢氧化应激模型建立以及卵巢保护性抗氧化剂的筛选[D]. 张家庆.南京农业大学 2013
[2]天然抗氧化剂抗氧化损伤作用及机制[D]. 杜玉.山东大学 2009

硕士论文
[1]热应激对小鼠卵巢颗粒细胞功能及相关基因表达的影响[D]. 罗曼.南京农业大学 2016
[2]金丝桃苷对Nrf2-ARE途径的影响及其对肝细胞氧化应激损伤的保护作用[D]. 张倩.西南大学 2014
[3]Nrf2/ARE信号通路在纳米二氧化钛诱导HepG2细胞氧化损伤中的作用研究[D]. 王茜.河北医科大学 2014
[4]羟基红花黄色素A的植物雌激素样作用及机制研究[D]. 陈梦.北京中医药大学 2013
[5]染料木素抗抑郁作用及其可能机制的研究[D]. 王海挺.兰州大学 2008



本文编号：3666836