间充质干细胞的细胞外囊泡减轻小鼠缺血再灌注肾损伤的相关研究

发布时间：2022-10-08 18:36

　　背景与目的:肾缺血再灌注损伤（Renal Ischemia/Reperfusion Injury）是引起急性肾损伤（acute kidney injury,AKI）的主要原因之一。间充质干细胞（mesenchymal stem cells,MSCs）的细胞外囊泡（Extracellular Vesicles,EVs）应用于多种疾病模型的干预治疗上,其主要作用中包括减轻氧化应激和恢复线粒体功能,但其中关键有效成分尚不明确。我们尝试应用人脐带间充质干细胞的细胞外囊泡对小鼠肾缺血再灌注损伤进行治疗的验证;同时应用蛋白组学和生物信息学分析,筛选出细胞外囊泡中可能起治疗作用的关键组份,希望获得的结果为未来深入研究打下基础。方法:从人脐带分离华通胶部分原代培养间充质干细胞,培养至细胞生长80%-90%融合时更换无血清培养基,24小时后收取条件培养基利用超速离心法提取细胞外囊泡。对提取获得的细胞外囊泡进行透射电子显微镜（Transmission Electron Microscope,TEM）和纳米流式检测仪（NanoFCM）鉴定。建立左肾缺血25min,右肾切除的小鼠模型。随机分为未IR损伤组,I... 

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【学位级别】：博士

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摘要
ABSTRACT
中文部分
    绪论
    材料与方法
        1.实验试剂和仪器
        2.人脐带间充质干细胞和成纤维细胞的体外分离及培养
        3.提取及鉴定人脐带间充质干细胞的细胞外囊泡
        4.动物实验
        5.数据分析与统计学处理
    结果
        1.人脐带间充质干细胞的体外培养及细胞外囊泡的鉴定
        2.人脐带间充质干细胞的细胞外囊泡的浓度测定及粒径检测
        3.小鼠肾缺血再灌注损伤造模及干预后肾功能变化情况
        4.小鼠肾缺血再灌注损伤造模及干预后肾形态学的评估
        5.小鼠肾缺血再灌注损伤造模及干预后肾组织细胞凋亡情况检测
        6.间充质干细胞和成纤维细胞两种细胞来源的细胞外囊泡的蛋白组学分析
    讨论
    结论
英文部分
    Introduction
    Materials and Methods
        1.Experimental reagents and instruments
        2.In vitro isolation and culture of human umbilical cord mesenchymal stem cells and fibroblasts
        3.Extraction and identification of extracellular vesicles of human umbilical cord mesenchymal stem cells
        4.Animal experiment
        5.Data analysis and statistical processing
    Results
        1.Culture of human umbilical cord mesenchymal stem cells in vitro and identification of extracellular vesicles
        2.Determination of the concentration of extracellular vesicles in human umbilical cord mesenchymal stem cells and particle size detection
        3.Modeling of renal ischemia-reperfusion injury in mice and changes of renal function after intervention
        4.Modeling of renal ischemia-reperfusion injury in mice and evaluation of renal morphology after intervention
        5.Detection of renal tissue apoptosis after modeling and intervention of renal ischemia-reperfusion injury in mice
        6.Proteomic analysis of extracellular vesicles derived from mesenchymal stem cells and fibroblasts
    Discussion
    Conclusion
参考文献
致谢
八年制学位论文要求



本文编号：3688219