MCR-1小分子抑制剂的设计、合成及生物活性研究
发布时间:2022-12-17 10:55
近年来,由于抗生素的不合理使用,导致耐药菌在全球范围内不断蔓延,致使世界范围内每年超过700,000人死于耐药菌感染,严重威胁着人类健康。而多重耐药革兰氏阴性菌的出现更是给临床治疗带来了巨大挑战,原因是治疗多重耐药革兰氏阴性菌感染的药物非常有限。为解决这个问题,多粘菌素——这类古老抗生素又被重新应用于临床,并被视为是治疗某些多重耐药革兰氏阴性菌感染的最后一道药物防线。然而,在2015年末,我国学者首次报道了由质粒介导的黏菌素耐药基因——mcr-1(mobile colistin resistance),其不仅可以纵向传递,还能够在不同种属的细菌之间水平转移,引起国际范围内的广泛关注,这也使得多粘菌素这一最后的药物防线被打破,增大了泛耐药菌在全球范围内传播的风险。当前,非抗生素类与抗生素类药物联合应用正在成为一种非常有价值的应用疗法,既可以恢复抗生素对耐药菌的效力,又不会对细菌施加选择性压力。因此,由mcr-1基因编码的蛋白质——MCR-1蛋白,可作为药物设计的靶标,通过设计合成小分子化合物来抑制MCR-1蛋白的生物活性,从而恢复mcr-1阳性耐药菌对多粘菌素的敏感性,为临床多粘菌素耐药...
【文章页数】:159 页
【学位级别】:博士
【文章目录】:
摘要
Abstract
缩略词与中英文对照
第1章 绪论
1.1 抗生素耐药
1.1.1 抗生素耐药概述
1.1.2 细菌耐药机制
1.2 多粘菌素
1.2.1 多粘菌素概述
1.2.2 多粘菌素耐药
1.3 mcr-1的研究
1.3.1 mcr-1概述
1.3.2 MCR-1抑制剂概述
1.4 课题设计思路
第2章 MCR-1小分子抑制剂的发现
2.1 以MCR-1为靶标的活性小分子的发现
2.1.1 计算机辅助药物设计概述
2.1.2 MCR-1蛋白结构分析
2.1.3 以MCR-1蛋白为靶标的分子对接
2.1.4 候选化合物的生物活性评价
2.2 MCR-1小分子抑制剂的设计合成
2.2.1 MCR-1小分子抑制剂的设计
2.2.2 化学合成路线
2.2.3 化合物合成方法
2.3 MCR-1小分子抑制剂的生物活性评价
2.3.1 实验材料
2.3.2 实验方法
2.3.3 实验结果
2.4 str5329系列化合物的构效关系
2.5 小结
第3章 化合物对MCR-1蛋白的抑制作用
3.1 实验原理
3.2 实验材料
3.2.1 主要实验试剂
3.2.2 主要实验仪器
3.3 实验方法
3.3.1 MCR-1蛋白的表达和纯化
3.3.2 MCR-1蛋白活性的检测
3.3.3 化合物与MCR-1全长蛋白的对接分析
3.4 实验结果
3.4.1 MCR-1蛋白与底物的结合
3.4.2 化合物对MCR-1蛋白的抑制活性
3.4.3 str5329系列化合物与MCR-1蛋白相互作用分析
3.5 小结
第4章 化合物体内活性评价研究
4.1 实验材料
4.1.1 实验动物
4.1.2 主要实验试剂
4.1.3 主要实验仪器
4.2 实验方法
4.2.1 感染菌液的制备
4.2.2 小鼠急性腹膜炎模型的建立
4.2.3 小鼠生存率实验
4.2.4 小鼠肝脏带菌量测定
4.2.5 小鼠肝脏病理学检查
4.2.6 统计学分析
4.3 实验结果
4.3.1 小鼠急性腹膜炎模型的建立
4.3.2 小鼠生存率研究
4.3.3 小鼠肝脏带菌量测定
4.3.4 小鼠肝脏病理学检查
4.4 小结
第5章 FDA库中MCR-1小分子抑制剂的发现
5.1 实验材料
5.1.1 主要实验试剂
5.1.2 主要实验仪器
5.2 实验方法
5.2.1 Gold对接方法
5.2.2 生物活性评价实验方法
5.2.3 Nebivolol与MCR-1全长蛋白的对接分析
5.3 实验结果
5.3.1 以MCR-1蛋白为靶标的分子对接
5.3.2 候选化合物的活性评价
5.3.3 Nebivolol对MCR-1蛋白的抑制作用
5.3.4 Nebivolol与MCR-1蛋白相互作用分析
5.4 小结
第6章 结论
参考文献
附图
作者简介及在学期间取得的科研成果
致谢
【参考文献】:
期刊论文
[1]鲍曼不动杆菌对替加环素耐药机制研究进展[J]. 张心宇,杜雪飞,邹桂玲,姜晓峰. 检验医学. 2019(07)
[2]多黏菌素耐药MCR-1:公共卫生领域的新挑战[J]. 王秀娜,张会敏,孙坚,刘雅红,冯友军. 科学通报. 2017(10)
[3]质粒介导的黏菌素耐药基因mcr-1研究进展[J]. 易灵娴,刘艺云,吴仁杰,梁梓森,刘健华. 遗传. 2017(02)
[4]多肽类抗菌剂研究进展[J]. 李艳萍,李卓荣. 国外医药(抗生素分册). 2009(04)
硕士论文
[1]多重耐药鲍曼不动杆菌关键耐药基因的研究[D]. 王丽娟.蚌埠医学院 2013
本文编号:3719803
【文章页数】:159 页
【学位级别】:博士
【文章目录】:
摘要
Abstract
缩略词与中英文对照
第1章 绪论
1.1 抗生素耐药
1.1.1 抗生素耐药概述
1.1.2 细菌耐药机制
1.2 多粘菌素
1.2.1 多粘菌素概述
1.2.2 多粘菌素耐药
1.3 mcr-1的研究
1.3.1 mcr-1概述
1.3.2 MCR-1抑制剂概述
1.4 课题设计思路
第2章 MCR-1小分子抑制剂的发现
2.1 以MCR-1为靶标的活性小分子的发现
2.1.1 计算机辅助药物设计概述
2.1.2 MCR-1蛋白结构分析
2.1.3 以MCR-1蛋白为靶标的分子对接
2.1.4 候选化合物的生物活性评价
2.2 MCR-1小分子抑制剂的设计合成
2.2.1 MCR-1小分子抑制剂的设计
2.2.2 化学合成路线
2.2.3 化合物合成方法
2.3 MCR-1小分子抑制剂的生物活性评价
2.3.1 实验材料
2.3.2 实验方法
2.3.3 实验结果
2.4 str5329系列化合物的构效关系
2.5 小结
第3章 化合物对MCR-1蛋白的抑制作用
3.1 实验原理
3.2 实验材料
3.2.1 主要实验试剂
3.2.2 主要实验仪器
3.3 实验方法
3.3.1 MCR-1蛋白的表达和纯化
3.3.2 MCR-1蛋白活性的检测
3.3.3 化合物与MCR-1全长蛋白的对接分析
3.4 实验结果
3.4.1 MCR-1蛋白与底物的结合
3.4.2 化合物对MCR-1蛋白的抑制活性
3.4.3 str5329系列化合物与MCR-1蛋白相互作用分析
3.5 小结
第4章 化合物体内活性评价研究
4.1 实验材料
4.1.1 实验动物
4.1.2 主要实验试剂
4.1.3 主要实验仪器
4.2 实验方法
4.2.1 感染菌液的制备
4.2.2 小鼠急性腹膜炎模型的建立
4.2.3 小鼠生存率实验
4.2.4 小鼠肝脏带菌量测定
4.2.5 小鼠肝脏病理学检查
4.2.6 统计学分析
4.3 实验结果
4.3.1 小鼠急性腹膜炎模型的建立
4.3.2 小鼠生存率研究
4.3.3 小鼠肝脏带菌量测定
4.3.4 小鼠肝脏病理学检查
4.4 小结
第5章 FDA库中MCR-1小分子抑制剂的发现
5.1 实验材料
5.1.1 主要实验试剂
5.1.2 主要实验仪器
5.2 实验方法
5.2.1 Gold对接方法
5.2.2 生物活性评价实验方法
5.2.3 Nebivolol与MCR-1全长蛋白的对接分析
5.3 实验结果
5.3.1 以MCR-1蛋白为靶标的分子对接
5.3.2 候选化合物的活性评价
5.3.3 Nebivolol对MCR-1蛋白的抑制作用
5.3.4 Nebivolol与MCR-1蛋白相互作用分析
5.4 小结
第6章 结论
参考文献
附图
作者简介及在学期间取得的科研成果
致谢
【参考文献】:
期刊论文
[1]鲍曼不动杆菌对替加环素耐药机制研究进展[J]. 张心宇,杜雪飞,邹桂玲,姜晓峰. 检验医学. 2019(07)
[2]多黏菌素耐药MCR-1:公共卫生领域的新挑战[J]. 王秀娜,张会敏,孙坚,刘雅红,冯友军. 科学通报. 2017(10)
[3]质粒介导的黏菌素耐药基因mcr-1研究进展[J]. 易灵娴,刘艺云,吴仁杰,梁梓森,刘健华. 遗传. 2017(02)
[4]多肽类抗菌剂研究进展[J]. 李艳萍,李卓荣. 国外医药(抗生素分册). 2009(04)
硕士论文
[1]多重耐药鲍曼不动杆菌关键耐药基因的研究[D]. 王丽娟.蚌埠医学院 2013
本文编号:3719803
本文链接:https://www.wllwen.com/shoufeilunwen/yxlbs/3719803.html
教材专著