益气除痰方干预肺癌EGFR-TKIs获得性耐药机制的研究
发布时间：2022-12-11 18:47
目的:在本研究中,我们将关注益气除痰方抑制EGFR-TKIs获得性耐药的作用,以及探讨其抑制获得性耐药的潜在分子机制。方法:第一部分:（1）运用XTT实验检测益气除痰方单用或者联合吉非替尼,在EGFR突变的人源非小细胞肺癌耐药细胞系H1975以及H1650上,对细胞活力以及耐药性的影响。（2）通过Ed U实验检测益气除痰方单用或者联合吉非替尼对EGFR突变的人源非小细胞肺癌耐药细胞系H1975细胞增殖的影响。（3）通过流式细胞术检测细胞周期实验,考察益气除痰方和吉非替尼对EGFR突变的人源非小细胞肺癌耐药细胞系H1975以及H1650细胞周期的影响。（4）采用流式细胞术检测蛋白实验,考察益气除痰方联合吉非替尼对EGFR突变的人源非小细胞肺癌耐药细胞系H1975以及H1650的PI3K/Akt/m TOR通路及自噬的主要蛋白PI3K、Akt、m TOR、LC3A和LC3B的影响。（5）采用m TOR抑制剂、自噬激动剂,验证益气除痰方的作用效果和作用靶点。第二部分:（1）运用转录组测序的方法检测益气除痰方对EGFR突变的人源非小细胞肺癌耐药细胞系H1975差异基因表达的影响。（2）运用基因...
【文章页数】：93 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
摘要
Abstract
引言
第一章 文献研究
1.1 肺癌流行病学研究
1.2 EGFR-TKIs的作用机理
1.3 EGFR-TKIs获得性耐药定义与机制
1.3.1 EGFR-TKIs获得性耐药的定义
1.3.2 EGFR-TKIs获得性耐药的机制
1.4 中医药在治疗EGFR-TKIs耐药中的作用
1.4.1 中药单体或单药与EGFR-TKIs获得性耐药的研究
1.4.2 中成药或中药时方与EGFR-TKIs获得性耐药的研究
1.4.3 益气除痰方与EGFR-TKIs获得性耐药的研究
第二章 细胞实验
2.1 实验材料
2.1.1 实验药品
2.1.2 细胞来源
2.1.3 实验试剂
2.1.4 实验仪器
2.1.5 溶液的配制
2.2 实验方法
2.2.1 H1975和H1650细胞的培养
2.2.2 XTT实验
2.2.3 EdU实验
2.2.4 流式细胞术检测细胞周期
2.2.5 流式细胞术测定蛋白含量
2.2.6 统计分析
2.3 实验结果
2.3.1 益气除痰方对非小细胞肺癌细胞活力和耐药性的影响
2.3.2 益气除痰方对非小细胞肺癌细胞增殖和细胞周期的影响
2.3.3 益气除痰方对非小细胞肺癌PI3K/Akt/m TOR通路及自噬的影响
2.3.4 益气除痰方作用靶点的进一步验证
2.4 小结与讨论
第二章 转录组测序
3.1 实验材料
3.1.1 实验药品
3.1.2 细胞来源
3.1.3 实验试剂
3.1.4 实验仪器
3.2 实验方法
3.2.1 H1975细胞的培养
3.2.2 RNA提取
3.2.3 RNA测序
3.2.4 数据处理和功能注释
3.2.5 统计分析
3.3 实验结果
3.3.1 益气除痰方对非小细胞肺癌差异基因表达的影响
3.3.2 益气除痰方对非小细胞肺癌影响的功能富集分析
3.3.3 益气除痰方干预非小细胞肺癌分子通路的潜在靶点
3.4 小结与讨论
第四章 动物实验
4.1 实验材料
4.1.1 实验药品
4.1.2 动物来源
4.1.3 细胞来源
4.1.4 实验试剂
4.1.5 实验仪器
4.2 实验方法
4.2.1 H1975和H1650细胞的培养
4.2.2 益气除痰方水提物的制备
4.2.3 益气除痰方动物饲料的制备
4.2.4 裸鼠非小细胞肺癌耐药移植瘤模型的建立
4.2.5 HE染色实验
4.2.6 Western blot实验
4.2.7 统计分析
4.3 实验结果
4.3.1 益气除痰方对荷瘤裸鼠体重和瘤积的影响
4.3.2 益气除痰方对荷瘤裸鼠瘤重的影响
4.3.3 益气除痰方对荷瘤裸鼠肿瘤形态学的影响
4.3.4 益气除痰方对PI3K/Akt/m TOR通路及自噬的影响
4.4 小结与讨论
结语
参考文献
附录
在校期间发表论文情况
致谢
统计学审核证明
【参考文献】：
期刊论文
[1]益气除痰方联合顺铂治疗肺癌疗效及对患者生存质量、Akt/FoxO信号通路的影响[J]. 张荣芹,魏品康. 陕西中医. 2018(12)
[2]第三代EGFR-TKIs耐药之初探[J]. 倪莲芳,聂立功. 中国肺癌杂志. 2018(02)
[3]益气除痰方防治化疗相关性疲劳的疗效观察[J]. 关洁珊,欧阳明子,肖志伟,林丽珠,曾科学. 辽宁中医杂志. 2016(06)
[4]益气除痰方通过抑制Akt信号通路诱导顺铂耐药肺癌细胞凋亡的作用及分子机制研究[J]. 张恩欣,周岱翰,侯超. 中药新药与临床药理. 2016(03)
[5]益气除痰方对弥漫大B细胞淋巴瘤增殖及AKT表达的影响[J]. 翟林柱,陈昌明,赵媛媛,林丽珠. 广州中医药大学学报. 2016(04)
[6]益气除痰方含药血清对顺铂耐药肺癌细胞增殖和细胞周期的影响[J]. 张恩欣,周岱翰,侯超. 山东医药. 2016(06)
[7]大黄素逆转非小细胞肺癌EGFR-TKI耐药的机制研究[J]. 欧阳学农,房文铮,吴淡森,林少琴,陈娟,余宗阳. 临床肿瘤学杂志. 2014(11)
[8]金复康口服液对非小细胞人肺腺癌吉非替尼获得性耐药的影响[J]. 孙玺媛,姜梅,张伟,梁隽婷,孙建立. 中药材. 2014(07)
[9]益气除痰方调控内质网应激反应抑制H1650肺癌生长的研究[J]. 孙玲玲,方若鸣,张景涛,林丽珠. 广州中医药大学学报. 2014(04)
[10]益气化痰法为主中医药治疗方案对老年非小细胞肺癌中位生存期的影响:一项多中心、前瞻性临床队列研究[J]. 周岱翰,林丽珠,田华琴,吴万垠,贾英杰,张军一,刘魁凤,邓力,胡作为,徐天舒,谢强,邓运宗,林清,谢德荣,王树堂. 世界中医药. 2014(07)
硕士论文
[1]益气除痰方维持治疗Ⅲ-Ⅳ期非小细胞肺癌的队列研究[D]. 黎智燊.广州中医药大学 2016
[2]益气除痰法联合TKI治疗晚期非小细胞肺癌EGFR突变患者的生存质量研究[D]. 林宝琪（Li Baoqi）.广州中医药大学 2015
[3]益气除痰方对中晚期肺癌机体免疫功能的影响及诱导失巢凋亡相关机制的研究[D]. 宋妮.广州中医药大学 2010
本文编号：3719305
【文章页数】：93 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
摘要
Abstract
引言
第一章 文献研究
1.1 肺癌流行病学研究
1.2 EGFR-TKIs的作用机理
1.3 EGFR-TKIs获得性耐药定义与机制
1.3.1 EGFR-TKIs获得性耐药的定义
1.3.2 EGFR-TKIs获得性耐药的机制
1.4 中医药在治疗EGFR-TKIs耐药中的作用
1.4.1 中药单体或单药与EGFR-TKIs获得性耐药的研究
1.4.2 中成药或中药时方与EGFR-TKIs获得性耐药的研究
1.4.3 益气除痰方与EGFR-TKIs获得性耐药的研究
第二章 细胞实验
2.1 实验材料
2.1.1 实验药品
2.1.2 细胞来源
2.1.3 实验试剂
2.1.4 实验仪器
2.1.5 溶液的配制
2.2 实验方法
2.2.1 H1975和H1650细胞的培养
2.2.2 XTT实验
2.2.3 EdU实验
2.2.4 流式细胞术检测细胞周期
2.2.5 流式细胞术测定蛋白含量
2.2.6 统计分析
2.3 实验结果
2.3.1 益气除痰方对非小细胞肺癌细胞活力和耐药性的影响
2.3.2 益气除痰方对非小细胞肺癌细胞增殖和细胞周期的影响
2.3.3 益气除痰方对非小细胞肺癌PI3K/Akt/m TOR通路及自噬的影响
2.3.4 益气除痰方作用靶点的进一步验证
2.4 小结与讨论
第二章 转录组测序
3.1 实验材料
3.1.1 实验药品
3.1.2 细胞来源
3.1.3 实验试剂
3.1.4 实验仪器
3.2 实验方法
3.2.1 H1975细胞的培养
3.2.2 RNA提取
3.2.3 RNA测序
3.2.4 数据处理和功能注释
3.2.5 统计分析
3.3 实验结果
3.3.1 益气除痰方对非小细胞肺癌差异基因表达的影响
3.3.2 益气除痰方对非小细胞肺癌影响的功能富集分析
3.3.3 益气除痰方干预非小细胞肺癌分子通路的潜在靶点
3.4 小结与讨论
第四章 动物实验
4.1 实验材料
4.1.1 实验药品
4.1.2 动物来源
4.1.3 细胞来源
4.1.4 实验试剂
4.1.5 实验仪器
4.2 实验方法
4.2.1 H1975和H1650细胞的培养
4.2.2 益气除痰方水提物的制备
4.2.3 益气除痰方动物饲料的制备
4.2.4 裸鼠非小细胞肺癌耐药移植瘤模型的建立
4.2.5 HE染色实验
4.2.6 Western blot实验
4.2.7 统计分析
4.3 实验结果
4.3.1 益气除痰方对荷瘤裸鼠体重和瘤积的影响
4.3.2 益气除痰方对荷瘤裸鼠瘤重的影响
4.3.3 益气除痰方对荷瘤裸鼠肿瘤形态学的影响
4.3.4 益气除痰方对PI3K/Akt/m TOR通路及自噬的影响
4.4 小结与讨论
结语
参考文献
附录
在校期间发表论文情况
致谢
统计学审核证明
【参考文献】：
期刊论文
[1]益气除痰方联合顺铂治疗肺癌疗效及对患者生存质量、Akt/FoxO信号通路的影响[J]. 张荣芹,魏品康. 陕西中医. 2018(12)
[2]第三代EGFR-TKIs耐药之初探[J]. 倪莲芳,聂立功. 中国肺癌杂志. 2018(02)
[3]益气除痰方防治化疗相关性疲劳的疗效观察[J]. 关洁珊,欧阳明子,肖志伟,林丽珠,曾科学. 辽宁中医杂志. 2016(06)
[4]益气除痰方通过抑制Akt信号通路诱导顺铂耐药肺癌细胞凋亡的作用及分子机制研究[J]. 张恩欣,周岱翰,侯超. 中药新药与临床药理. 2016(03)
[5]益气除痰方对弥漫大B细胞淋巴瘤增殖及AKT表达的影响[J]. 翟林柱,陈昌明,赵媛媛,林丽珠. 广州中医药大学学报. 2016(04)
[6]益气除痰方含药血清对顺铂耐药肺癌细胞增殖和细胞周期的影响[J]. 张恩欣,周岱翰,侯超. 山东医药. 2016(06)
[7]大黄素逆转非小细胞肺癌EGFR-TKI耐药的机制研究[J]. 欧阳学农,房文铮,吴淡森,林少琴,陈娟,余宗阳. 临床肿瘤学杂志. 2014(11)
[8]金复康口服液对非小细胞人肺腺癌吉非替尼获得性耐药的影响[J]. 孙玺媛,姜梅,张伟,梁隽婷,孙建立. 中药材. 2014(07)
[9]益气除痰方调控内质网应激反应抑制H1650肺癌生长的研究[J]. 孙玲玲,方若鸣,张景涛,林丽珠. 广州中医药大学学报. 2014(04)
[10]益气化痰法为主中医药治疗方案对老年非小细胞肺癌中位生存期的影响:一项多中心、前瞻性临床队列研究[J]. 周岱翰,林丽珠,田华琴,吴万垠,贾英杰,张军一,刘魁凤,邓力,胡作为,徐天舒,谢强,邓运宗,林清,谢德荣,王树堂. 世界中医药. 2014(07)
硕士论文
[1]益气除痰方维持治疗Ⅲ-Ⅳ期非小细胞肺癌的队列研究[D]. 黎智燊.广州中医药大学 2016
[2]益气除痰法联合TKI治疗晚期非小细胞肺癌EGFR突变患者的生存质量研究[D]. 林宝琪（Li Baoqi）.广州中医药大学 2015
[3]益气除痰方对中晚期肺癌机体免疫功能的影响及诱导失巢凋亡相关机制的研究[D]. 宋妮.广州中医药大学 2010
本文编号：3719305
本文链接：https://www.wllwen.com/shoufeilunwen/yxlbs/3719305.html
教材专著
