交泰丸通过肠道菌群介导的肠粘膜屏障修复缓解心理应激合并结肠炎的研究

发布时间：2023-02-08 17:50

　　大量临床和基础研究表明,心理应激会促进溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)的发展,其潜在机制与肠道菌群密切相关。交泰丸对心理疾病的治疗有着悠久的历史,然而,交泰丸对心理应激合并UC的疗效未知。首先,本研究建立慢性束缚应激诱导的心理应激模型和葡聚糖硫酸钠(dextran sulfate sodium,DSS)诱导的结肠炎模型,探讨交泰丸通过改善心理应激导致的肠道菌群改变从而缓解心理应激合并结肠炎的发展。其次,建立粪菌移植(Fecal microbiota transplantation,FMT)模型,探讨交泰丸通过肠道菌群介导的肠粘膜屏障修复从而缓解结肠炎的发展。实验一方法80只C57/6J雄性小鼠随机分成8组,即正常组,应激组,交泰丸(高)+应激组,交泰丸(低)+应激组,DSS组,应激+DSS组,交泰丸(高)+应激+DSS组,交泰丸(低)+应激+DSS组。采用连续束缚30天的方法建立慢性束缚应激模型。应激造模结束后对小鼠实施行为学检测,包括旷场实验,悬尾实验和强迫游泳实验。随后采用小鼠自由饮用7天2.5%的DSS溶液的方法建立结肠炎模型。交泰丸从慢性束缚应激造模开...

【文章页数】：76 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
摘要
Abstract
前言
第一部分 中西医对溃疡性结肠炎和心理应激的研究进展
    1. 中医对溃疡性结肠炎和心理应激的研究进展
        1.1 中医对溃疡性结肠炎的研究进展
        1.2 中医对心理应激的研究进展
        1.3 中医对于心理应激合并溃疡性结肠炎的认识
        1.4 参考文献
    2. 西医对炎性肠病和心理应激的研究进展
        2.1 背景
        2.2 流行病学研究
        2.3 病理生理
        2.4 治疗
        2.5 参考文献
    3. 总结和展望
第二部分 交泰丸通过肠道菌群介导的肠粘膜屏障修复缓解心理应激合并结肠炎的发展
    1. 材料与方法
        1.1 动物及材料
        1.2 交泰丸制备
        1.3 Akkermansia muciniphila培养及口服给药方案
        1.4 实验设计及分组
        1.5 行为学检测
        1.6 疾病活动指数(DAI)评估
        1.7 实验动物的处死及样本收集保存
        1.8 杯状细胞染色(PAS-AB染色)
        1.9 免疫组化染色检测粘蛋白MUC2表达
        1.10 苏木素-伊红(HE)染色观察结肠组织结构改变
        1.11 实时荧光定量多聚核苷酸链式反应(qPCR)检测KLF4、MUC2、IL-6、IL-1β、TNF-α的表达情况
        1.12 肠道菌群DNA提取及分析
        1.13 统计分析
    2. 实验一 交泰丸对心理应激合并结肠炎的影响
        2.1 交泰丸缓解慢性束缚应激导致的小鼠抑郁样行为
        2.2 交泰丸对慢性束缚应激状态下肠粘膜屏障功能的影响
        2.3 交泰丸对慢性束缚应激状态下肠道菌群的影响
        2.4 交泰丸缓解慢性束缚应激合并结肠炎的发展
        2.5 交泰丸改善慢性束缚应激合并结肠炎的肠粘膜屏障功能损伤并抑制促炎细胞因子的表达
        2.6 交泰丸对慢性束缚应激合并结肠炎肠道菌群的影响
    3. 实验二 粪菌移植实验
        3.1 移植交泰丸粪菌的受体小鼠抑郁样行为得到缓解
        3.2 移植交泰丸粪菌的受体小鼠肠粘膜屏障功能改善
        3.3 受体小鼠肠道菌群定植情况
        3.4 交泰丸通过调节肠道菌群缓解受体小鼠肠炎的发展
        3.5 交泰丸通过调节肠道菌群缓解受体结肠炎小鼠肠粘膜屏障损伤并抑制促炎细胞因子表达
        3.6 受体结肠炎小鼠肠道菌群定植情况
        3.7 Akkermansia muciniphila能显著缓解受体小鼠的抑郁样行为并减轻结肠炎的发展
    4. 讨论
    5. 总结
    6. 参考文献
附录
攻读博士学位期间取得的研究成果
致谢
作者简介



本文编号：3738113