miR-5003调节ETS1-3'UTR促进SLE患者B细胞分化的机制研究

发布时间：2023-04-09 15:11

　　[目的]筛选系统性红斑狼疮(SLE)患者外周静脉血单个核细胞(PBMC)中在转录水平与正常对照具有显著差异表达的基因;验证ETS1的表达水平,并分析该基因的表达与单核苷酸多态性(SNP)的相关性,探索SNP影响ETS1表达及其在B淋巴细胞中的机制及功能效应;根据SNP的基因位置,寻找影响ETS1变化的上游机制,并检测下游ETS1对B细胞功能的影响;同时,探索SNP对SLE患者不同临床表现的影响。本研究将为临床早期诊断和疾病预后提供潜在标记物。[方法]收集3例SLE患者和3例健康对照的外周静脉血,用二代测序技术筛查PBMC中具有显著差异性表达的基因,进而通过GO、KEGG和Cytoscape分析显著差异表达基因(DEGs)的富集情况。扩大样本量后,用定量聚合酶链反应(qPCR)检测ETS1在两组样本PBMC、B和Th淋巴细胞中的相对表达水平,SNaPshot技术进行基因分型;构建rs4937333位点为野生型C或突变型T的ETS1质粒并包装慢病毒,感染SLE患者外周静脉血B淋巴细胞,用qPCR和蛋白免疫印迹法(Western Blot,WB)检测并比较ETS1的表达。进而将不同等位基因质...

【文章页数】：160 页

【学位级别】：博士

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缩略词表
中文摘要
ABSTRACT
前言
第一部分 高通量测序分析
    引言
    材料与方法
    结果
    讨论
    结论及小结
第二部分 SLE患者淋巴细胞ETS1及其SNP检测
    引言
    材料与方法
    结果
    讨论
    结论及小结
第三部分 SNP通过ETS1影响B细胞的分化
    引言
    材料与方法
    结果
    讨论
    结论及小结
第四部分 miR-5003影响ETS1突变位点的功能
    引言
    材料和方法
    结果
    讨论
    结论及小结
全文总结
局限性
展望
参考文献
附录
综述 ETS1在狼疮B细胞和Th细胞中作用机制的研究进展
    参考文献
攻读学位期间获得的学术成果
致谢



本文编号：3787240