E3泛素连接酶FBXW5失活Hippo通路促进胃癌细胞转移的分子机制

发布时间：2023-04-10 03:19

　　研究背景及目的:Hippo信号通路异常会导致胃癌发生和进展。Hippo信号通路的核心成分主要受泛素-蛋白酶体调控,如LATS1/2激酶结构域PPx Y序基能与WD40结构域直接结合并被泛素化、降解。F-box蛋白家族是SCF(Skp1-Cullin1-F-box protein)E3连接酶复合物中的重要一员,发挥特异性识别底物的功能,FBXW5作为F-box蛋白家族的新成员,含有重复的WD40结构片段,然而其在胃癌中的作用还不清楚。本研究旨在探讨FBXW5与Hippo信号通路的关系及其在胃癌中的临床意义。研究方法:利用生物信息学分析网站或工具分析FBXW5的表达及其预后意义、分析FBXW5与Hippo通路下游相关癌基因表达的关系;利用免疫组织化学法分析临床胃癌石蜡样本中各蛋白的表达以及分析裸鼠皮下瘤体中各蛋白的表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)分析新鲜临床标本及裸鼠瘤体中FBXW5的表达,及各样本或细胞中FBXW5蛋白与Hippo通路相关蛋白的调控关系;利用荧光定量PCR探讨FBXW5对Hippo通路相关癌基因的调控作用;免疫荧光法用于探讨YAP1的细胞内定位的改变;Tr...

【文章页数】：117 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
摘要
abstract
中英文缩略词表
前言
    胃癌治疗靶点的研究概述
    Hippo信号通路概述
    泛素化概述
第一部分 FBXW5 在胃癌中的表达以及临床意义
    1.引言
    2.材料及方法
        2.1 实验材料
        2.2 实验方法
    3.结果
        3.1 FBXW5 在人类常见恶性肿瘤中广泛表达
        3.2 FBXW5 在胃癌中的表达及其与预后的关系
    4.讨论
    5.结论
第二部分 FBXW5 促进胃癌细胞的侵袭、转移及耐药
    1.引言
    2.材料及方法
        2.1 实验材料
        2.2 实验方法
    3.实验结果
        3.1 检验FBXW5 干扰及过表达的转染效能
        3.2 FBXW5 促进胃癌细胞的侵袭、迁移及EMT
        3.3 FBXW5 促进胃癌细胞的耐药
    4.讨论
    5.结论
第三部分 FBXW5对Hippo信号通路的调控
    1.引言
    2.材料及方法
        2.1 实验材料
        2.2 实验方法
    3.实验结果
        3.1 FBXW5 调控Hippo信号通路下游靶基因的表达
        3.2 FBXW5 在胃癌细胞中调控Hippo信号通路
        3.3 FBXW5 结合LATS1 并促进其降解
        3.4 FBXW5 促进LATS1 蛋白的泛素化
        3.5 阻断LATS1-YAP1 导致FBXW5对Hippo通路的调控丧失
        3.6 裸鼠成瘤实验验证FBXW5 的功能及机制
    4.讨论
    5.结论
全文总结
致谢
参考文献
攻读学位期间的研究成果
综述
    参考文献



本文编号：3788233