长链非编码RNA CADM1-AS1对肝细胞癌的作用及其机制研究

发布时间：2023-04-14 18:22

　　研究背景:肝细胞肝癌是目前世界上最高发最常见的癌症之一。在我国,目前肝细胞肝癌的发病率位居第二位,仅次于第一位的肺癌。目前,肝细胞肝癌的治疗手段仍以手术切除肿瘤为主,生存率在五年之内依然较低。限制肝细胞肝癌外科手术治疗疗效的关键点在于早期因无症状而导致诊断率较低和外科术后再次复发概率较高,而外科手术以外却缺少效果明确的临床辅助治疗,因此深入开展对肝癌发生、增殖、侵袭中的肿瘤分子机制研究、开发新的治疗靶点以及新型的临床诊疗肿瘤标记物将成为当今肿瘤机制研究的热点问题。长链非编码RNA(LncRNA)与编码基因相比,缺少显著的开放性阅读框架,更少的外显子,更低的表达水平的非编码RNA,且核苷酸总数大于200个。很长一段时间以来,大部分有关基因的研究都把目光集中在蛋白编码基因上,人们都遵循着DNA-mRNA-蛋白质这一中心法则,而非编码基因曾经被研究者误定义为是基因组中的“暗物质”或者“噪音”。最近几年,大量实验证明,一些基因组中的“噪音”转录而来的长链非编码RNA在转录水平、表观遗传水平、蛋白修饰过程、翻译水平中都可以发挥非常重要的调节作用。反义LncRNA,顾名思义是一类从编码基因的反义链...

【文章页数】：88 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
摘要
Abstract
英文缩略语
前言
    参考文献
第一部分 :肝癌中Lnc CADM1-AS1 异常表达及临床意义
    1 前言
    2 材料与方法
        2.1 实验材料
            2.1.1 组织标本
            2.1.2 细胞株
            2.1.3 实验试剂
            2.1.4 实验仪器和设备
        2.2 实验方法
            2.2.1 细胞系和培养
            2.2.2 组织芯片
            2.2.3 原位杂交
            2.2.4 细胞RNA的提取
            2.2.5 cDNA的合成
            2.2.6 qPCR检测IncRNA相对表达量
        2.3 统计分析
    3 结果
    4 讨论
    5 小结
    参考文献
第二部分 :CADM1-AS1对HCC增殖、迁移、侵袭、细胞周期的影响及相关机制研究
    1 前言
    2 材料与方法
        2.1 实验材料
            2.1.1 主要仪器设备
        2.2 实验方法
            2.2.1 构建稳定干扰CADM1-AS1 表达的肝癌细胞系
            2.2.2 构建稳定过表达CADM1-AS1 的肝癌细胞系
            2.2.3 细胞增殖实验CCK-8 测定
            2.2.4 EdU检测细胞增殖实验
            2.2.5 克隆形成实验
            2.2.6 伤口愈合实验
            2.2.7 Transwell小室实验
            2.2.8 细胞周期测定
            2.2.9 裸鼠皮下成瘤实验
            2.2.10 蛋白质印迹
            2.2.11 免疫组化检测肿瘤细胞周期蛋白变化;
        2.3 统计分析
    3 结果
        3.1 构建CADM1-AS1 过表达和低表达HCC细胞系
        3.2 CADM1-AS1 表达对HepG2和BEL-7402 细胞增殖的影响
        3.3 CADM1-AS1对HepG2和BEL-7402 细胞迁移和侵袭的影响
        3.4 CADM1-AS1 表达对HepG2和BEL-7402 细胞周期分布的影响
        3.5 CADM1-AS1 对裸鼠体内肿瘤作用
        3.6 CADM1-AS1 调节PTEN/AKT/GSK-3β信号通路
        3.7 CADM1-AS1 表达对HepG2和BEL-7402 细胞周期蛋白的影响
        3.8 CADM1-AS1 对裸鼠体内肿瘤PTEN/AKT/GSK-3β及细胞周期蛋白的影响
    4 讨论
        4.1 上调及下调CADM1-AS1 肝癌细胞株的构建
        4.2 LncRNA CADM1-AS1 与肿瘤增殖、迁移、侵袭以及细胞周期的关系
    5 小结
    参考文献
本研究创新性的自我评价
综述
    参考文献
攻读学位期间取得的研究成果
致谢



本文编号：3790721