miR-362在非小细胞肺癌转移中的作用及分子机制

发布时间：2023-04-19 20:19

　　系统生物学是研究生物系统中所有组成成分(基因、mRNA、蛋白质等)的构成,以及在特定条件这些组分间的相互关系的学科。本课题是研究某一基因改变后其上游、下游分子在生物系统内的改变,研究整体的变化情况。肺癌是世界范围内严重影响人们健康的恶性肿瘤之一,最新的统计结果表明,肺癌死亡率已居恶性肿瘤中首位,而肺癌的发病率和死亡率仍呈上升趋势。其中非小细胞肺癌(non-small-celllungcancer,NSCLC)约占肺癌的85%。近年来,随着包括手术切除、化疗、放疗及生物治疗等手段的综合应用,NSCLC患者的生活质量和生存期均有明显的改善,但患者的5年生存率仍然不高,其原因与NSCLC的转移密切相关,约40%的I期和60%的II期NSCLC死亡患者均具有远端转移。因此,研究NSCLC侵袭转移的分子机制,阐明其作用机理,不仅有助于深入了解NSCLC在疾病演进中的分子变化,而且还有助于提高患者的生存期。恶性肿瘤的转移是一个涉及多个水平(如基因、蛋白等)、多个分子的共同作用的结果。随着基因组测序的完成,近年来非编码基因在肿瘤发生发展中的作用受到密切的关注。MicroRNAs(miRNAs)是一类...

【文章页数】：119 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
致谢
摘要
ABSTRACT
序言
1 引言
    1.1 系统理论与系统生物学
    1.2 肺癌研究进展
    1.3 miRNA概述
    1.4 miRNA在癌症中的作用
    1.5 CRISPR/Cas9基因编辑技术
        1.5.1 CRISPR/Cas9系统简介
        1.5.2 CRISPR/Cas9系统工作原理
        1.5.3 CRISPR/Cas9系统研究历程
        1.5.4 CRISPR/Cas9技术优缺点
        1.5.5 CRISPR/Cas9系统的应用与展望
    1.6 论文研究方案
    1.7 论文创新点
2 miR-362在NSCLC组织与细胞中的表达
    2.1 实验材料和实验试剂
        2.1.1 细胞株
        2.1.2 主要试剂
    2.2 实验方法
    2.3 实验结果
        2.3.1 miR-362在NSCLC组织和细胞中上调表达
    2.4 讨论
    2.5 小结
3 miR-362在NSCLC中的功能研究
    3.1 实验材料和实验试剂
        3.1.1 细胞株
        3.1.2 主要试剂
    3.2 实验方法
    3.3 实验结果
        3.3.1 CRISPR/Cas9技术构建miR-362敲除细胞系
        3.3.2 miR-362促进NSCLC细胞转移
        3.3.3 miR-362促进NSCLC细胞的克隆形成能力
        3.3.4 miR-362对NSCLC细胞周期无影响
        3.3.5 miR-362对NSCLC细胞凋亡率的影响
        3.3.6 miR-362对NSCLC细胞抑制率的影响
        3.3.7 miR-362提高肺癌细胞系在小鼠体内的成瘤能力
    3.4 讨论
    3.5 小结
4 miR-362靶基因的鉴定
    4.1 实验材料和实验试剂
        4.1.1 细胞株
        4.1.2 细菌菌株
        4.1.3 质粒载体
        4.1.4 主要试剂
    4.2 实验方法
    4.3 实验结果
        4.3.1 miR-362靶基因的预测
        4.3.2 miR-362靶基因的鉴定
    4.4 讨论
    4.5 小结
5 SEMA3A在NSCLC中的功能及与miR-362的相关性
    5.1 实验材料和实验试剂
        5.1.1 细胞株
        5.1.2 质粒载体
        5.1.3 主要试剂
    5.2 实验方法
    5.3 实验结果
        5.3.1 SEMA3A抑制NSCLC细胞的转移
        5.3.2 SEMA3A抑制NSCLC细胞的克隆形成
        5.3.3 miR-362与靶基因SEMA3A相关性分析
    5.4 讨论
    5.5 小结
6 总结与展望
参考文献
附录A
附录B
附录C
作者简历及攻读博士学位期间取得的研究成果
学位论文数据集



本文编号：3794151