XAB2调控有丝分裂与转录的机制研究

发布时间：2023-09-28 22:23

　　XAB2(Xeroderma pigmentosum group A-binding protein 2,着色性干皮病组A结合蛋白2)是2000年首次发现的一个高度保守的重要的多功能基因,参与了转录,转录偶联的DNA修复,pre-mRNA的剪接及同源重组修复等多个重要生命过程的调控,XAB2对小鼠的胚胎发育同样至关重要,敲除XAB2导致小鼠胚胎致死。本实验室的前期工作发现XAB2能够结合在影响天然无内含子mRNA出核的顺式作用元件上,敲低XAB2能够明显抑制mRNA的出核,表明XAB2也参与了mRNA出核调控。尽管XAB2蛋白在基因表达调控中发挥了重要的功能,但其下游靶基因以及在人类细胞中发挥的生理功能目前仍不是很清楚,有待进一步发现和研究。为此,我们首先在HeLa细胞中利用shRNA敲低XAB2,基因芯片分析显示XAB2敲低导致调控细胞周期尤其是有丝分裂期相关基因(如着丝粒蛋白CENPE)的表达发生异常,提示XAB2有可能通过调控CENPE表达影响有丝分裂。有丝分裂是细胞周期的重要组成部分,它能够保证细胞分裂过程中携带遗传信息的染色体的精确分离,从而维持了亲代与子代之间遗传的稳定性,...

【文章页数】：140 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
摘要
Abstract
第一部分 XAB2下调通过抑制CENPE表达影响有丝分裂的机制研究
    前言
    材料和方法
        1.实验材料与仪器
        2.实验方法
    结果
        1.基因芯片分析显示XAB2敲低导致调控细胞周期相关基因表达异常???
        2.XAB2敲低造成有丝分裂阻滞??
        3.XAB2敲低促进有丝分裂灾难与细胞死亡??
        4.XAB2敲低导致染色体排列与分离异常??
        5.XAB2敲低导致纺锤体极、细胞核形态及微管组装异常??
        6.XAB2敲低促进细胞DNA损伤??
        7.XAB2敲低通过下调CENPE表达影响有丝分裂??
        8.XAB2在转录水平调控CENPE的表达??
    讨论
    小结
    参考文献
第二部分 XAB2下调通过抑制POLR2A表达影响转录的机制研究
    前言
    材料和方法
        1.实验材料与仪器
        2.实验方法
    结果
        1.XAB2敲低导致POLR2A下调及新生RNA减少?
        2.XAB2敲低导致POLR2A mRNA先于蛋白下调且mRNA的 下调不依赖于转录
        3.XAB2敲低导致严重的POLR2A剪接损伤?
        4.剪接抑制剂madrasin导致POLR2A表达及转录活性下降
        5.抑制翻译或敲低Dom34 能够恢复POLR2A的表达??
        6.XAB2与剪接体组分相互作用共同维持POLR2A的表达?…
        7.XAB2通过2-4及11-12号TPR结构域与SNW1 作用维持POLR2A的表达??
    讨论
    小结
    参考文献
总结与展望
综述 转录与剪接研究进展
    参考文献
攻读学位期间发表论文情况
致谢



本文编号：3848728