二甲双胍调控上皮间质转化及PD-L1表达逆转三阴性乳腺癌PARP抑制剂耐药的分子机制研究

发布时间：2024-02-20 13:06

　　目的:乳腺癌在全世界女性罹患癌症统计中的发病率和死亡率最高。三阴性乳腺癌(TNBC)作为其中侵袭性最强的一个亚型,由于缺乏有效治疗靶点,TNBC的治疗手段仅限于手术、化疗和放疗,容易发生早期的转移和复发,并且预后极差。对三阴性乳腺癌治疗模式的进一步探索在临床上有很大的意义。目前BRCA1/2突变已经被证实是最常见的乳腺癌的基因突变类型,TNBC中约有80%患者同时具备BRCA1/2基因突变。聚(ADP-核糖)聚合酶(PARP)抑制剂通过阻断DNA双链断裂的修复,导致BRCA1/2介导的合成致死效应,从而抑制肿瘤细胞的增殖进而杀伤肿瘤细胞。PARP抑制剂(PARPi)已成为BRCA突变肿瘤或者TNBC患者的最有前景的靶向治疗方式。然而,在临床应用中表现出了一部分患者对PARP抑制剂的耐药性,降低了临床疗效。目前PARPi的耐药机制是一个正处于积极研究的领域。研究方法:以2种已经被FDA认证的并且已经应用于临床的PARPi,奥拉帕尼(Olaparib)和鲁卡帕尼(Rucaparib)分别处理PARPi敏感和耐药的细胞株,建立三阴性乳腺癌细胞系中稳定表达的PARPi适应性耐药性克隆。首先通过...

【文章页数】：73 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
摘要
Abstract
英文缩略语
第一部分 :PARP抑制剂诱导TNBC发生EMT
    1 前言
    2 材料和方法
        2.1 主要试剂和仪器
            2.1.1 主要试剂
            2.1.2 主要仪器
        2.2 实验方法
            2.2.1 细胞培养和处理
            2.2.2 形态学分析
            2.2.3 免疫印迹
            2.2.4 定量实时聚合酶链反应
            2.2.5 微球体分析
            2.2.6 迁移试验
            2.2.7 细胞侵袭实验
    3 实验结果
        3.1 PARP诱导TNBC细胞的散射和形态变化
        3.2 PARP在 TNBC中诱导EMT标志物表达
        3.3 PARPi处理的稳定克隆表现出干细胞特征
        3.4 PARP促进细胞迁移和侵袭
    4 讨论
    5 结论
第二部分 :二甲双胍逆转PARPi诱导的EMT和PD-L1上调
    6 前言
    7 材料和方法
        7.1 主要试剂和仪器
            7.1.1 主要试剂
            7.1.2 主要仪器
        7.2 实验方法
            7.2.1 细胞培养和治疗
            7.2.2 质粒和转染
            7.2.3 流式细胞术分析
    8 实验结果
        8.1 PARPi诱导TNBC肿瘤细胞的PD-L1表达上调
        8.2 二甲双胍逆转PARPi诱导的PD-L1上调
        8.3 TOPII抑制剂和二甲双胍均可通过p-Akt调节EMT和PD-L1的表达
        8.4 PARP通过激活磷酸化Akt(p-Akt)诱导EMT并上调PD-L
    9 讨论
    10 结论
本研究创新性的自我评价
参考文献
综述 PARP抑制剂的耐药的机制与应用
    参考文献
攻读学位期间取得的研究成果
致谢
个人简历



本文编号：3904210