CD73在胰腺癌中的表达及其调控机制研究

发布时间：2024-02-29 00:53

　　目的:最近研究表明CD73在肿瘤进展中起着关键作用,但CD73在胰腺癌中的研究尚少。此外,关于CD73所涉及的调控机制知之甚少。此研究的目的是明确CD73在胰腺癌中的表达分布及其与临床病理参数、患者预后之间的相关性,以及CD73分子对胰腺癌细胞增殖、细胞周期等的作用及机制,进一步阐明CD73促进胰腺癌进展的相关分子机制。方法:采用Western Blot和免疫组化法分别检测胰腺癌细胞和组织中CD73的表达情况;并统计与临床病理资料和生存时间相关性;通过转染CD73-siRNA对CD73表达水平进行敲减,观察细胞的增殖,凋亡以及周期变化。通过转录组测序检测并验证CD73调控的下游信号通路变化。通过转染以及荧光素酶实验等验证miR-30a-5p和CD73之间的标靶关系,以及miR-30a-5p/CD73信号轴的变化对胰腺癌吉西他滨化疗敏感性变化的机制研究。结果:我们发现CD73表达在胰腺导管腺癌(PDAC)中表达上调,并且其高表达与预后不良相关。CD73敲除细胞系通过AKT/ERK/cyclinD信号传导途径抑制细胞生长并诱导细胞周期G1期阻滞。我们还发现肿瘤坏死因子受体(TNFR)2参与...

【文章页数】：73 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
致谢
中文摘要
英文摘要
缩略词表
主要实验设备仪器和软件
第一部分 CD73在胰腺癌中的表达情况及其功能研究
    1.1 前言
    1.2 材料与方法
        1.2.1 材料
        1.2.2 方法
    1.3 结果
        1.3.1: 生物信息学分析CD73在胰腺癌中表达水平
        1.3.2: CD73在胰腺癌细胞系中表达水平
        1.3.3: CD73在胰腺癌组织中表达水平
        1.3.4: CD73的表达水平与临床病理学特征相关性
        1.3.5: CD73的表达水平与预后相关性
        1.3.6: 胰腺癌细胞系CD73敲除效率检测
        1.3.7: CD73敲除抑制胰腺癌细胞增殖速率,延迟倍增时间
        1.3.8: CD73敲除促进胰腺癌细胞凋亡水平
        1.3.9: CD73敲除导致胰腺癌细胞周期产生G1期阻滞
        1.3.10: 细胞周期双阻断实验
        1.3.11: 周期相关蛋白检测
        1.3.12: CD73敲除抑制AKT/ERK信号通路
    1.4 讨论
    1.5 结论
第二部分 CD73调控TNFR2介导的AKT/ERK信号通路激活
    2.1 前言
    2.2 材料与方法
        2.2.1 材料
        2.2.2 方法
    2.3 结果
        2.3.1: CD73敲除细胞系转录组测序
        2.3.2: CD73敲除细胞系TNFR2表达水平下降
        2.3.3: 胰腺癌组织中CD73和TNFR2表达水平相关性
        2.3.4: TNF-A通过TNFR2受体激活AKT/ERK信号通路
        2.3.5: CD73调控TNFR2介导的AKT/ERK信号通路
        2.3.6: TNF-A在CD73敲除细胞内和上清中表达水平
    2.4 讨论
    2.5 结论
第三部分 MIR-30A-5P通过靶向作用于CD73抑制胰腺癌吉西他滨化疗敏感性研究
    3.1 前言
    3.2 材料与方法
        3.2.1 材料
        3.2.2 方法
    3.3 结果
        3.3.1: 生物信息学预测标靶关系
        3.3.2: MIR-30A-5P靶向作用于CD73并调控其表达
        3.3.3: MIR-30A-5P靶向作用于CD73的3'非翻译区
        3.3.4: MIR-30A-5A在胰腺癌中表达水平
        3.3.5: MIR-30A-5A通过靶向CD73抑制胰腺癌增殖
        3.3.6: 胰腺癌吉西他滨耐药细胞系表达谱分析
        3.3.7: 吉西他滨刺激对MIR-30A-5P和CD73表达水平的影响
        3.3.8: MIR-30A-5P通过靶向CD73促进吉西他滨化疗敏感性
    3.4 讨论
    3.5 结论
参考文献
综述
    参考文献
作者简介



本文编号：3914236