CK2α与YBX1的相互作用及其在癌症进展中功能的研究

发布时间：2024-03-09 04:56

　　PI3K/AKT/mTOR信号通路在癌症的发生和发展中起着重要的作用。胞蛋白激酶2(Casein kinase 2,CK2)是一种高度保守的具有多种底物的胞蛋白激酶,能够参与肿瘤的生长和转移等生命过程。Y-box结合蛋白1(Y-box–binding protein-1,YBX1)在多种恶性肿瘤中高表达,且与肿瘤的过度增殖、耐药性及不良预后密切相关。已有研究表明,CK2α和YBX1均能够调控PI3K/AKT/mTOR信号通路的活性。此外,通过人体蛋白质参考数据库(Human Protein Reference Database,HPRD)预测,CK2很有可能是YBX1的上游蛋白激酶,能够磷酸化YBX1 165位的丝氨酸。因此,我们推测CK2与YBX1可能存在相互作用,共同调节PI3K/AKT/mTOR信号通路的活性。本课题拟探究CK2α和YBX1在肿瘤细胞中表达的相关性;CK2α对YBX1表达的影响;CK2α和YBX1的相互作用;联合抑制CK2α和YBX1对肿瘤细胞增殖、周期、迁移等表型以及耐药能力的影响。主要研究结果如下:(1)CK2α和YBX1在肿瘤细胞中的表达具有一定的相关性。以...

【文章页数】：114 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
中文摘要
abstract
第一章 绪论
    1.1 蛋白激酶2(CK2)的研究现状
        1.1.1 CK2 的研究概述
        1.1.2 CK2 与肿瘤的关系
    1.2 Y-box结合蛋白1(YBX1)
        1.2.1 YBX1 的研究概述
        1.2.2 YBX1 与肿瘤的关系
    1.3 PI3K/AKT/mTOR信号通路
        1.3.1 PI3K/AKT/mTOR信号通路概述
        1.3.2 PI3K/AKT/mTOR信号通路与肿瘤的关系
    1.4 本研究的目的和意义
第二章 材料与方法
    2.1 实验材料
        2.1.1 试剂
        2.1.2 引物
        2.1.3 菌株及细胞株
        2.1.4 重组质粒
        2.1.5 常规溶液的配制
    2.2 实验方法
        2.2.1 分子克隆实验
        2.2.2 蛋白纯化
        2.2.3 质粒定点突变
        2.2.4 细胞复苏、传代及冻存
        2.2.5 细胞增殖实验
        2.2.6 细胞周期检测
        2.2.7 实时荧光定量PCR
        2.2.8 蛋白质免疫印迹
        2.2.9 裸鼠皮下成瘤实验
        2.2.10 伤口愈合实验
        2.2.11 稳转细胞的构建
        2.2.12 免疫共沉淀实验
        2.2.13 泛素化检测实验
        2.2.14 Ni-NTA pull down实验
        2.2.15 双荧光素报告基因活性检测实验
        2.2.16 平板克隆实验
        2.2.17 免疫组化实验
        2.2.18 统计分析
第三章 结果与分析
    3.1 CK2α和 YBX1 在肿瘤细胞中的表达具有一定的相关性
    3.2 CK2α能够影响YBX1 的表达且依赖其激酶活性
    3.3 CK2α在转录水平调控YBX1 蛋白的表达
    3.4 联合靶向抑制CK2α和 YBX1对PI3K/AKT/mTOR信号通路活性的影响
    3.5 联合靶向抑制CK2α和 YBX1 对肿瘤细胞增殖的影响
    3.6 联合靶向抑制CK2α和 YBX1 对肿瘤细胞克隆形成能力的影响
    3.7 联合靶向抑制CK2α和 YBX1 对肿瘤细胞周期的影响
    3.8 联合靶向抑制CK2α和 YBX1 对肿瘤细胞迁移的影响
    3.9 联合抑制CK2α和 YBX1 对卵巢癌细胞在裸鼠皮下成瘤的影响
    3.10 YBX1对CK2α介导的肿瘤细胞的增殖和迁移的影响
    3.11 PI3K/AKT/mTOR通路对CK2α和 YBX1 介导的肿瘤细胞的增殖和迁移的影响
    3.12 联合靶向抑制CK2α和 YBX1 对肿瘤细胞耐药的影响
    3.13 CK2α和 YBX1 存在相互作用
第四章 讨论
第五章 结论
本研究创新性自我评价
参考文献
作者简介及在学期间所取得的科研成果
致谢



本文编号：3922931