GATA-4/NF-κB通路在大鼠脑出血后神经元凋亡中的作用及其机制研究

发布时间：2024-03-27 01:55

　　第一部分 大鼠脑出血后神经元中GATA结合蛋白-4(GATA-4)的表达变化目的探讨大鼠脑出血(Intracerebral hemorrhage,ICH)后神经元内GATA-4的表达变化。方法1、实验动物分组:健康成年雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠42只,随机分为Sham(假手术)组和实验组:ICH后6小时、12小时、24小时、148小时、72小时及7天组,一共7组,每组6只大鼠。2、ICH组模型建立:将大鼠麻醉成功后,抽取大鼠自体动脉血,注入右侧基底节区,模拟自发性脑出血。按照实验分组预定时间,在ICH建模后6小时、12小时、24小时、48小时、72小时及7天对大鼠实施安乐死,灌注取脑。3、体外ICH模型建立及分组:分离大鼠胚胎的大脑皮层,收集并培养神经元。将培养的神经元分为6组:control组,3小时组,6小时组,12小时组,18小时组,24小时组。在实验组加入氧合血红蛋白(OxyHb)处理建立ICH体外模型。按照实验分组预定的时间收集神经元。4、应用聚合酶链式反应技术(PCR技术)检测大鼠脑组织中GATA-4mRNA水平在ICH后不同时间点的表达趋势。应用蛋白印迹...

【文章页数】：106 页

【学位级别】：博士

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中文摘要
Abstract
前言
    参考文献
第一部分 大鼠脑出血后神经元中GATA-4蛋白的表达变化
    材料与方法
        1. 材料
        2. 实验方法
        3. 统计学分析
    结果
        1. 大鼠存活率
        2. 大体标本观察
        3、ICH后脑组织中的GATA-4 mRNA水平升高
        4. ICH后大鼠脑组织中GATA-4蛋白表达增高
        5. ICH后大鼠脑组织神经元中GATA-4蛋白表达增高
        6. 体外神经元中GATA-4蛋白表达增高
    讨论
    结论
    参考文献
第二部分 GATA-4蛋白变化对大鼠脑出血后神经元的影响
    材料与方法
        1. 设备与试剂
        2. 实验方法
    结果
        1、大鼠存活率
        2、干预后各组大鼠脑内GATA-4蛋白的表达有差异
        3、ICH后大鼠脑水肿指数比较
        4、ICH后大鼠的神经功能损害的变化
        5、ICH后大鼠脑内神经元变性情况
        6、ICH后大鼠脑组织出现神经元细胞凋亡
        7、在体内GATA-4蛋白影响ICH后caspase-3蛋白的活化
        8、在体内GATA-4蛋白影响ICH后Bax蛋白的表达
    讨论
    结论
    参考文献
第三部分 GATA-4调控神经元凋亡的机制研究
    材料与方法
        1 设备与试剂
        2. 实验方法
        3. 统计学分析
    结果
        1. GATA-4蛋白在体外诱导ICH后神经元凋亡
        2、siRNA或质粒能干预神经元中GATA-4蛋白的表达
        3、各组神经元中Caspase-3蛋白活化的情况
        4、各组神经元中Bax蛋白的表达
        5、在体外神经元中,GATA-4蛋白能干预神经元中NK-κB的磷酸化表达
        6、GATA-4质粒和GATA-4 105A质粒对GATA-4蛋白的表达及其磷酸化的影响
        7、GATA-4蛋白磷酸化对NK-κB活化的影响
        8、GATA-4蛋白磷酸化对Bax蛋白表达的影响
        9、GATA-4蛋白磷酸化对Caspase-3活化的影响
    讨论
    结论
    参考文献
综述
    参考文献
中英文缩略词表
攻读学位期间公开发表的论文
致谢



本文编号：3940015