MicroRNA-140-5p通过THY1介导的Notch信号通路抑制胃癌进展

发布时间：2024-05-11 06:43

　　一、研究背景胃癌最目前世界上常见的消化道恶性肿瘤之一,严重威胁着人类的生命健康。在大约90%的癌症病例中,侵袭和转移是患者死亡的主要原因。胃癌的转移及复发严重危及患者的生命,与患者不良预后相关,这突显出迫切需要有效的新治疗方案。虽然最近的研究已经探索了多种新的分子靶点来诊断和治疗胃癌,但批准用于临床的针对特定靶点的抗胃癌药物依然缺乏。因此,开发针对胃癌新靶点的药物对改善患者预后有重要的临床意义。微小RNA(MicroRNA,miRNA)是一种内源性的小分子非编码RNA,通过转录调控机制来阻碍蛋白编码基因表达;然后通过与蛋白编码基因的信使RNA(mRNA)的3’非翻译区的序列(3’UTR)相结合,从而达到阻滞mRNA的翻译或者诱导其降解的作用。据统计,人类的蛋白编码基因中的受到miRNA调控后转录的占60%左右;而在诸多不同性质的肿瘤中,也存在特异性的miRNA或者miRNA家族表达和功能的异常。最近,研究者对miR-140-5p在肿瘤中的作用机制的研究越来越多。在结直肠癌、胆管癌和下咽癌等研究中发现miR-140-5p均起到肿瘤抑制因子的作用。在胃癌相关研究报道中,miR-140-5p...

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【学位级别】：博士

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摘要
abstract
第1章 绪论
    1.1 miRNAs与肿瘤的研究进展
        1.1.1 miRNA概述以及调节生命活动的机制
        1.1.2 microRNA在肿瘤发生发展的作用至关重要
        1.1.3 miR-140 可能在胃癌发生发展中起着重要作用,值得深入研究
第2章 利用GC中基因的差异分析和GC的基因检索和相互作用分析预测THY1和miR-140-5p参与GC的进展
    2.1 GC中基因的差异分析
    2.2 GC的基因检索和相互作用分析
    2.3 基于微阵列的GC基因表达谱
    2.4 本章结论
第3章 MicroRNA-140-5p通过THY1 介导的Notch信号通路的负调控抑制胃癌细胞增殖,迁移和促进细胞凋亡
    3.1 材料与方法
        3.1.1 实验仪器
        3.1.2 实验试剂与耗材
    3.2 主要试剂的配制
        3.2.1 RPMI1640 培养液的配制
        3.2.2 D-Hank's液的配制
        3.2.3 RT-PCR引物
        3.2.4 RT-PCR相关试剂的配制
        3.2.5 Western Blot试剂配制
        3.2.6 SDS-PAGE凝胶的配制
    3.3 实验结果
        3.3.1 降低GC组织中miR-140-5p的表达和THY1 的高表达
        3.3.2 miR-140-5p和 THY1 的表达与GC的进展相关
    3.4 讨论
    3.5 总结
第4章 MicroRNA-140-5p通过THY1 介导的Notch信号通路的负调控抑制胃癌细胞增殖,迁移和促进细胞凋亡的实验研究
    4.1 前言
    4.2 材料与方法
        4.2.1 实验试剂
        4.2.2 实验方法
        4.2.3 流式细胞仪分析细胞周期
        4.2.4 划痕实验检测细胞迁移能力
        4.2.5 Transwell实验检测细胞侵袭能力
        4.2.6 统计分析
    4.3 实验结果
        4.3.1 miRNA数据库的查询结果提示miR-140-5p与靶基因THY1 序列的存在互补性,THY1 可能是miR-140-5p的靶标
        4.3.2 实时定量PCR检测5 株胃癌细胞和一株非肿瘤胃上皮细胞,发现miR-140-5p在胃癌细胞株中显著低表达。THY1 在胃癌细胞株中显著高表达。选择SGC-7901和MGC-803 细胞系用于后续实验
        4.3.3 Westernblot检测5 株胃癌细胞和一株非肿瘤胃上皮细胞中THY1的蛋白水平
        4.3.4 miR-140-5p过表达抑制THY1 表达和Notch信号通路的激活
        4.3.5 miR-140-5p过表达抑制GC细胞的增殖
        4.3.6 miR-140-5p过表达抑制GC细胞的迁移和侵袭
    4.4 讨论
    4.5 结论
致谢
参考文献
攻读博士学位期间的研究成果
综述
    参考文献



本文编号：3969674