小胶质细胞参与调控视网膜脱离后光感受器细胞凋亡的作用研究

发布时间：2024-05-27 19:59

　　目的:视网膜脱离(retinal detachment,RD)是威胁视力的常见眼科疾病,视功能损伤的一大原因是光感受器细胞发生凋亡。课题组前期研究发现光感受器细胞的凋亡受到很多因素调控,仍有待于进一步研究。近年来研究发现小胶质细胞在神经退行性疾病中发挥重要作用,是中枢神经系统或视网膜损伤发生时最先做出反应的细胞。RD后视网膜中存在小胶质细胞被激活,然而小胶质细胞是否对光感受器细胞的凋亡存在调控作用尚不明确。因此本课题将通过干预视网膜小胶质细胞探讨其对RD后光感受器细胞凋亡的具体作用及机制。方法:实验采用视网膜下注射透明质酸钠的方法制作大鼠RD模型,采用免疫荧光染色检测RD 6h、1d、3d、5d、7d、14d小胶质细胞激活情况,以及检测各组Müller细胞的活化情况,并且通过TUNEL染色检测RD6h、1d、3d、7d时视网膜组织中光感受器细胞凋亡情况。采用荧光定量PCR和Western Blot检测炎症因子相关基因和神经营养因子表达水平。在此基础上进行小胶质细胞干预实验,采用玻璃体腔内注射M-CSF激活小胶质细胞或口服GW2580抑制小胶质细胞的干预方法,分别将健康雄性Wistar大...

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【学位级别】：博士

【部分图文】：

图1TUNEL染色阴性及阳性对照结果

FITC标记的dUTP充分混匀，添加于阳性对照和实验组的切片组织上，而阴性对照将末端脱氧核糖核酸转移酶替换为去离子水。将各组放置在37℃条件下将湿盒避光孵育60分钟。反应完后浸入SSC中室温放置15min，终止反应。完毕后用1×PBS洗涤5min；共3次。用1:5000的DAPI....

图2大鼠眼底观察照片

上海交通大学医学院博士研究生学位论文202.3结果2.3.1实验性视网膜脱离动物模型建立成功在手术显微镜下注射1%透明质酸钠后，可观察到大鼠视网膜呈灰白色球状隆起（图2）。注射后6h、1d、3d、5d、7d、14d组都观察到仍存在视网膜脱离状态，仅5d组有1只实验眼出现玻璃体出血....

图3视网膜脱离后视网膜小胶质细胞染色结果

上海交通大学医学院博士研究生学位论文21(A)Normal组、RD6h、RD1d、RD3d、RD5d、RD7d、RD14d组具代表性的Iba1染色图片，标尺为50μm（B）对Iba1染色阳性的小胶质细胞计数，与内层视网膜面积的比值计算单位面积小胶质细胞数。Normal组小胶质细胞....

图5视网膜脱离后光感受器细胞TUNEL染色结果

上海交通大学医学院博士研究生学位论文22(A)Normal组、RD6h、RD1d、RD3d、RD5d、RD7d、RD14d组具代表性的GFAP染色图片，标尺为50μm（B）对GFAP表达水平用染色面积表示，与内层视网膜面积的比值计算面积比。Normal组、RD6h、RD1d的GF....

本文编号：3983036