DRG中P2X 7 和P2Y 1 受体介导电针缓解IBS大鼠内脏痛敏机制研究
发布时间：2024-05-28 00:37
目的:探讨DRG中P2X7和P2Y1受体在电针足三里、三阴交缓解内脏痛敏中的作用机制。方法:TNBS灌肠诱导IBS大鼠内脏痛模型,给予足三里_((双))、三阴交穴_((双))电针刺激干预(强度1m A,频率2Hz,波宽0.1ms),15min/次,1次/日,共1周。运用病理形态学、行为学、逆行示踪、电生理学、分子生物学等方法,探讨DRG中P2X7和P2Y1受体介导电针缓解内脏痛敏的神经生物学机制。结果:电针明显抑制内脏高敏感性,可被鞘内注射氟代柠檬酸部分抑制。电针能够抑制内脏痛大鼠DRG神经元的兴奋性:降低静息膜电位、上调基强度、抑制神经元动作电位发放,鞘内注射FCA后电针的调节作用受到一定程度抑制,表明胶质细胞可能参与电针对神经元电生理学特性的调节。P2X7选择性激动剂Bz ATP增加AWR评分,拮抗剂A740003抑制AWR评分,说明P2X7在内脏痛敏中发挥促进作用。Bz ATP拮抗了电针镇痛效应,A740003能够协同电针镇痛效应。电针显著抑制P2X...
【文章页数】：157 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
缩略词一览表
中文摘要
ABSTRACT
引言
第一部分 DRG内胶质细胞介导电针缓解TNBS诱导IBS大鼠内脏痛敏效应观察
1.引言
2.材料和方法
2.1 实验动物及伦理
2.2 主要实验仪器
2.3 主要实验试剂
2.4 TNBS诱导大鼠IBS内脏痛模型
2.5 结肠组织微观病理评分标准
2.6 结直肠扩张球囊制作
2.7 内脏运动反射的行为测试
2.8 溶液配置
2.9 鞘内注射
2.10 大鼠穴位定位
2.11 动物分组与干预方法
2.12 标本采集与处理
2.13 结肠组织病理学HE染色
2.14 结肠相关DRG神经元逆行示踪
2.15 DRG神经元急性分离与培养
2.16 全细胞膜片钳记录
2.17 数据采集与分析
3.结果
3.1 TNBS诱导结肠炎症在不同时间微观病理评分
3.2 DRG内胶质细胞介导电针缓解TNBS诱导内脏痛效应
3.3 胶质细胞介导电针调节TNBS诱导内脏痛大鼠DRG中结肠相关神经元电生理学特性
4.讨论
4.1 慢性内脏痛病因病机的中医认识
4.2 慢性内脏痛发病机制研究
4.3 穴位选择依据
4.4 DRG中“神经元-胶质细胞”共同参与感觉信息整合
4.5 结肠非炎症性内脏高敏感
4.6 DRG胶质细胞参与IBS内脏高敏感性及电针对结肠相关神经元兴奋性调节
小结
第二部分 DRG胶质细胞P2X7受体介导电针缓解内脏痛敏研究
1.引言
2.材料与方法
2.1 实验动物及伦理
2.2 主要实验仪器
2.3 主要实验试剂
2.4 TNBS诱导大鼠IBS内脏痛模型
2.5 内脏运动反射的行为测试
2.6 溶液配置
2.7 动物分组与干预方法
2.8 标本采集与处理
2.9 免疫荧光双标
2.10 Real time PCR m RNA检测
2.11 Western Blot蛋白检测
2.12 数据采集与分析
3.结果
3.1 DRG中 GFAP-P2X7、P2X3-P2X7免疫荧光共定位染色
3.2 DRG胶质细胞中P2X7介导TNBS诱导IBS内脏痛外周敏化
3.3 P2X7介导电针缓解IBS大鼠内脏痛敏
4.讨论
4.1 嘌呤受体与内脏痛
4.2 针刺发挥作用的重要信使物质-ATP
4.3 P2X7在TNBS诱导的IBS内脏高敏感过程中发挥促进作用
4.4 P2X7介导电针抑制内脏痛外周敏化
小结
第三部分 DRG神经元P2Y1受体介导电针缓解内脏痛敏研究
1.引言
2.材料与方法
2.1 实验动物及伦理
2.2 主要实验仪器
2.3 主要实验试剂
2.4 TNBS诱导大鼠IBS内脏痛模型
2.5 内脏运动反射的行为测试
2.6 溶液的配置
2.7 动物分组与干预方法
2.8 标本采集与处理
2.9 免疫荧光双标
2.10 Real time PCR m RNA检测
2.11 Western Blot蛋白检测
2.12 数据采集与分析
3.结果
3.1 DRG中 GFAP-P2Y1、P2Y1-P2X3免疫荧光共定位染色
3.2 DRG神经元中P2Y1介导IBS内脏痛敏的抑制效应
3.3 P2Y1介导电针缓解IBS大鼠内脏痛敏
4.讨论
4.1 DRG神经元P2Y1介导TNBS诱导IBS内脏痛敏
4.2 P2Y1介导电针缓解IBS大鼠内脏痛敏
小结
第四部分 DRG中 P2X7→P2Y1→P2X3途径介导电针缓解内脏痛敏研究
1.引言
2.材料与方法
2.1 实验动物及伦理
2.2 主要实验仪器
2.3 主要实验试剂
2.4 TNBS诱导大鼠IBS内脏痛模型
2.5 内脏运动反射的行为测试
2.6 动物分组与干预方法
2.7 标本采集与处理
2.8 溶液的配置
2.9 Real time PCR m RNA检测
2.10 Western Blot蛋白检测
2.11 数据采集与分析
3.结果
(一)“P2X7→P2Y1"介导IBS内脏痛大鼠DRG中“神经元-胶质细胞”信息交互及电针的镇痛效应
3.1 胶质细胞P2X7受体抑制神经元P2Y1受体介导IBS内脏痛外周敏化
3.2 “P2X7→P2Y1"调节途径介导电针缓解IBS内脏痛
(二)DRG中“P2Y1→P2X3"调节途径介导IBS内脏痛及电针镇痛效应
3.3 内脏痛大鼠结肠相关DRG神经元P2Y1抑制P2X3受体表达
3.4 “P2Y1→P2X3"调节途径介导电针缓解TNBS诱导IBS内脏痛
4.讨论
4.1 背根神经节中“神经元-胶质细胞”与IBS内脏痛
4.2 “P2X7→P2Y1"介导IBS内脏痛大鼠DRG中“神经元-胶质细胞”信息交互及电针的镇痛效应
4.3 DRG中“P2Y1→P2X3"调节途径介导IBS内脏痛敏及电针镇痛效应
小结
创新点
结论
研究不足与展望
致谢
参考文献
附录一 :文献综述 P2受体介导IBS内脏痛外周敏化在中医经穴脏腑相关理论中的意义
参考文献
附录二 :在校期间发表学术论文全文及摘要
附录三 :参加学术会议情况
本文编号：3983260
【文章页数】：157 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
缩略词一览表
中文摘要
ABSTRACT
引言
第一部分 DRG内胶质细胞介导电针缓解TNBS诱导IBS大鼠内脏痛敏效应观察
1.引言
2.材料和方法
2.1 实验动物及伦理
2.2 主要实验仪器
2.3 主要实验试剂
2.4 TNBS诱导大鼠IBS内脏痛模型
2.5 结肠组织微观病理评分标准
2.6 结直肠扩张球囊制作
2.7 内脏运动反射的行为测试
2.8 溶液配置
2.9 鞘内注射
2.10 大鼠穴位定位
2.11 动物分组与干预方法
2.12 标本采集与处理
2.13 结肠组织病理学HE染色
2.14 结肠相关DRG神经元逆行示踪
2.15 DRG神经元急性分离与培养
2.16 全细胞膜片钳记录
2.17 数据采集与分析
3.结果
3.1 TNBS诱导结肠炎症在不同时间微观病理评分
3.2 DRG内胶质细胞介导电针缓解TNBS诱导内脏痛效应
3.3 胶质细胞介导电针调节TNBS诱导内脏痛大鼠DRG中结肠相关神经元电生理学特性
4.讨论
4.1 慢性内脏痛病因病机的中医认识
4.2 慢性内脏痛发病机制研究
4.3 穴位选择依据
4.4 DRG中“神经元-胶质细胞”共同参与感觉信息整合
4.5 结肠非炎症性内脏高敏感
4.6 DRG胶质细胞参与IBS内脏高敏感性及电针对结肠相关神经元兴奋性调节
小结
第二部分 DRG胶质细胞P2X7受体介导电针缓解内脏痛敏研究
1.引言
2.材料与方法
2.1 实验动物及伦理
2.2 主要实验仪器
2.3 主要实验试剂
2.4 TNBS诱导大鼠IBS内脏痛模型
2.5 内脏运动反射的行为测试
2.6 溶液配置
2.7 动物分组与干预方法
2.8 标本采集与处理
2.9 免疫荧光双标
2.10 Real time PCR m RNA检测
2.11 Western Blot蛋白检测
2.12 数据采集与分析
3.结果
3.1 DRG中 GFAP-P2X7、P2X3-P2X7免疫荧光共定位染色
3.2 DRG胶质细胞中P2X7介导TNBS诱导IBS内脏痛外周敏化
3.3 P2X7介导电针缓解IBS大鼠内脏痛敏
4.讨论
4.1 嘌呤受体与内脏痛
4.2 针刺发挥作用的重要信使物质-ATP
4.3 P2X7在TNBS诱导的IBS内脏高敏感过程中发挥促进作用
4.4 P2X7介导电针抑制内脏痛外周敏化
小结
第三部分 DRG神经元P2Y1受体介导电针缓解内脏痛敏研究
1.引言
2.材料与方法
2.1 实验动物及伦理
2.2 主要实验仪器
2.3 主要实验试剂
2.4 TNBS诱导大鼠IBS内脏痛模型
2.5 内脏运动反射的行为测试
2.6 溶液的配置
2.7 动物分组与干预方法
2.8 标本采集与处理
2.9 免疫荧光双标
2.10 Real time PCR m RNA检测
2.11 Western Blot蛋白检测
2.12 数据采集与分析
3.结果
3.1 DRG中 GFAP-P2Y1、P2Y1-P2X3免疫荧光共定位染色
3.2 DRG神经元中P2Y1介导IBS内脏痛敏的抑制效应
3.3 P2Y1介导电针缓解IBS大鼠内脏痛敏
4.讨论
4.1 DRG神经元P2Y1介导TNBS诱导IBS内脏痛敏
4.2 P2Y1介导电针缓解IBS大鼠内脏痛敏
小结
第四部分 DRG中 P2X7→P2Y1→P2X3途径介导电针缓解内脏痛敏研究
1.引言
2.材料与方法
2.1 实验动物及伦理
2.2 主要实验仪器
2.3 主要实验试剂
2.4 TNBS诱导大鼠IBS内脏痛模型
2.5 内脏运动反射的行为测试
2.6 动物分组与干预方法
2.7 标本采集与处理
2.8 溶液的配置
2.9 Real time PCR m RNA检测
2.10 Western Blot蛋白检测
2.11 数据采集与分析
3.结果
(一)“P2X7→P2Y1"介导IBS内脏痛大鼠DRG中“神经元-胶质细胞”信息交互及电针的镇痛效应
3.1 胶质细胞P2X7受体抑制神经元P2Y1受体介导IBS内脏痛外周敏化
3.2 “P2X7→P2Y1"调节途径介导电针缓解IBS内脏痛
(二)DRG中“P2Y1→P2X3"调节途径介导IBS内脏痛及电针镇痛效应
3.3 内脏痛大鼠结肠相关DRG神经元P2Y1抑制P2X3受体表达
3.4 “P2Y1→P2X3"调节途径介导电针缓解TNBS诱导IBS内脏痛
4.讨论
4.1 背根神经节中“神经元-胶质细胞”与IBS内脏痛
4.2 “P2X7→P2Y1"介导IBS内脏痛大鼠DRG中“神经元-胶质细胞”信息交互及电针的镇痛效应
4.3 DRG中“P2Y1→P2X3"调节途径介导IBS内脏痛敏及电针镇痛效应
小结
创新点
结论
研究不足与展望
致谢
参考文献
附录一 :文献综述 P2受体介导IBS内脏痛外周敏化在中医经穴脏腑相关理论中的意义
参考文献
附录二 :在校期间发表学术论文全文及摘要
附录三 :参加学术会议情况
本文编号：3983260
本文链接：https://www.wllwen.com/shoufeilunwen/yxlbs/3983260.html
教材专著
