LncRNA EPIC1保护成骨细胞免受地塞米松损伤

发布时间：2024-12-21 02:56

　　背景和目的:骨质疏松症是代谢性骨病变,主要特征是骨组织量减少及骨微结构退化,骨质疏松可增加骨脆性和骨折。然而,骨质疏松症的分子机制仍不明确。糖皮质激素直接作用于成骨细胞,导致成骨细胞产生量减少,并引起成骨细胞凋亡。长链非编码RNA(LncRNA)已成为控制基因表达和影响多种生物过程的重要表观遗传调节因子。越来越多的证据表明LncRNA参与骨重塑,与骨质疏松的发生、发展密切相关。人成骨细胞中,地塞米松(Dex)处理导致显著的细胞毒性。LncRNA EPIC1(Lnc-EPIC1)是与Myc直接作用的LncRNA。本论文主要检测了 Lnc-EPIC1对Dex诱导的人成骨细胞损伤的潜在影响及机制研究。研究方法和内容:在OB-6人成骨细胞株和原代人成骨细胞中,通过慢病毒包裹Lnc-EPIC1 载体(“LV-EPIC1”)过表达 Lnc-EPIC1;并通过 siRNA 手段沉默 Lnc-EPIC1的表达。上述细胞用Dex处理后,用实时定量聚合酶链反应(qPCR)检测Lnc-EPIC1的表达;通过MTT(3-(4,5-二甲基-2-噻唑基)-2,5-二苯基-2H-四唑溴化物)法、乳酸脱氢酶(LDH)法...

【文章页数】：106 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

图１．?ＯＢ－６成骨细胞中地塞米松处理增加ＬｎｃＲＮＡ?ＥＰＩＣ１的表达??用慢病毒包裹的?Ｌｎｃ－ＥＰＩＣｌ?表达载体（ｐＬｅｎｔｉ６－ｐｕｒｏ－ＧＦＰ－Ｌｎｃ－ＥＰＩＣｌ，??

ＬｎｃＲＮＡ?ＥＰＩＣ１保护成骨细胞免受地塞米松损伤?第一部分??本课题中，我们首先检测了地塞米松（Ｄｅｘ）对Ｌｎｃ－ＥＰＩＣｌ表达的潜在影响。在??ＯＢ－６［１９，２８－３０］人成骨细胞株中，Ｄｅｘ处理（ｌｆｉＭ，?２４小时）后，Ｌｎｃ－ＥＰＩＣｌ表达增??加超过一倍（图１）。....

图２．?ＬｎｃＲＮＡ?ＥＰＩＣｌ过表达显著抑制地塞米松诱导的ＯＢ－６成骨细胞死亡??用慢病毒包裹的?Ｌｎｃ－ＥＰＩＣｌ?表达载体（ｐＬｅｎｔｉ６－ｐｕｒｏ－ＧＦＰ－Ｌｎｃ－ＥＰＩＣｌ，??

第一部分?ＬｎｃＲＮＡＥＰＩＣｌ保护成骨细胞免受地塞米松损伤??胞存活率（ＭＴＴＯＤ，图２Ａ）显著下降，而细胞死亡（ＬＤＨ释放，图２Ｂ）显著增加；??而两株ＬＶ－ＥＰＩＣ１过表达的０Ｂ－６成骨细胞中（见图１），Ｄｅｘ?（ｌ｜ｉＭ，２４小时）诱导??的存活率下降（图２Ａ）和死亡（图....

图３．?ＯＢ－６成骨细胞屮，ＬｎｃＲＮＡ?ＥＰＩＣ１过及达Ｖ著抑制地寒米松诱导的??Ｃａｓｐａｓｅ－３??

ＬｎｃＲＮＡ?ＥＰＩＣ１保护成骨细胞免受地塞米松损伤?第一部分??ＬＶ－ＥＰＩＣ１对０Ｂ－６细胞Ｃａｓｐａｓｅ－３的活化无显著作用（图３Ａ和Ｂ）。因此，０Ｂ－６成??骨细胞中，ＬｎｃＲＮＡＥＰＩＣｌ过表达显著抑制Ｄｅｘ诱导的Ｃａｓｐａｓｅ－３活化。??Ａ．?Ｂ．??ＯＢ－６?ｃｅ....

图４．?ＯＢ－６成骨细胞中，ＬｎｃＲＮＡＥＰＩＣ１过表达显著抑制地塞米松诱导的细胞凋亡－１??用慢病毒包裹的Ｌｎｃ－ＥＰＩＣｌ表达载体（ｐＬｅｎｔｉ６－ｐｕｒｏ－ＧＦＰ－Ｌｎｃ－ＥＰ丨Ｃ１，??

受地塞米松损伤??Ａ．?ＯＢ－６?ｃｅｌｌｓ?Ｂ．?ＯＢ－６?ｃｅｌｌｓ?＃??Ｑ?１?２］ｃｉＶｅｃｔｏｒ?—－—?°＇５］ａ?Ｖｅｃｔｏｒ?ｆ?＾??〇?Ｓ?圈?ｌｖ－ｅＰＩＣ１（Ｌ１）?１??＜?ＢＬＶ－ｈＨＩＵＴ?（Ｌ２）?＾?Ｏ?Ｑ４?ｂＬＶ－ＥＰＩＣＩ?（Ｌ２）??§....

本文编号：4018284