去泛素化酶USP15在同源重组修复与乳腺癌化疗应答中的功能和分子机制研究
发布时间：2025-01-04 07:56
DNA损伤修复应答通路对于维持基因组的稳定性至关重要,该通路异常与细胞免疫缺陷、早衰、肿瘤发生等都有密切的关系。DNA双链断裂（DNA double strand breaks,DSBs）是细胞内多种类型的DNA损伤中最危险的一种。哺乳动物细胞主要有同源重组（Homologous recombination,HR）和非同源末端连接（non-Homologous end joining）两种主要的方式来修复DSBs。NHEJ不需要同源模板链的指导,快速而高效,但易产生错误和突变。HR则需要对DSBs末端进行剪切,并利用姐妹染色单体提供的同源模板链进行修复,修复结果错误率低。因此,HR通路对于降低基因组范围突变,抑制肿瘤发生尤为重要。BRCA1是HR修复途径的核心调控蛋白,其N末端RING结构域和C末端串联BRCT结构域是维持BRCA1功能的两个最重要结构域。在细胞内BRCA1通过其BRCT结构域,分别与ABRAXAS、BACH1、CtIP形成A、B、C复合体,在不同层次上调控细胞周期阻滞、DNA末端剪切和HR。BRCA1 N端RING结构域则与BARD1形成异二聚体,使两个蛋白更加稳定地发...
【文章页数】：117 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
缩略语表
摘要
Abstract
前言
1.1 DNA双链断裂修复通路
1.2 BRCA1-BARD1 二聚体在同源重组中的功能与调控
1.3 PARP抑制剂
1.4 泛素化修饰调控在DNA损伤修复应答中的作用
材料与方法
第一章 USP15在DNA双链断裂修复应答中的功能研究
1.1 USP15 调控同源重组修复
1.1.1 USP15 影响DNA损伤应答
1.1.2 USP15 敲除降低同源重组修复效率
1.2 USP15 调控同源重组修复因子招募至DSBs
1.3 USP15 通过靶向BARD1 参与调控同源重组修复
1.3.1 USP15与BARD1 相互作用
1.3.2 USP15-BARD1 相互作用对同源重组修复是必需的
第二章 USP15 调控同源重组修复的分子机制研究
2.1 USP15 调控同源重组修复依赖其去泛素化酶活性
2.1.1 USP15 酶活性缺失影响其对同源重组调控
2.1.2 USP15 自去泛素化并影响其与BARD1 相互作用
2.2 USP15 去泛素化BARD
2.2.1 USP15在DNA损伤后负调控BARD1 C端结构域泛素化修饰..
2.2.2 确定USP15 去除BARD1 多聚泛素链类型
2.3 USP15 介导BARD1 去泛素化并促进BARD1-HP1γ相互作用。
2.3.1 USP15在DNA损伤后促进BARD1-HP1γ相互作用
2.3.2 USP15 介导的BARD1 去泛素化影响其与HP1γ的结合
2.3.3 USP15 通过BARD1-HP1γ轴调控同源重组修复
第三章 USP15 自身响应DNA损伤信号的机制研究
3.1 USP15被ATM磷酸化
3.1.1 USP15是ATM底物
3.1.2 USP15678 位丝氨酸磷酸化对其在HR中功能是必需的
3.2 USP15 通过678 位丝氨酸磷酸化响应DNA损伤信号
3.2.1 USP15 磷酸化促进其核定位
3.2.2 USP15在DNA损伤发生后被招募至DSBs
3.2.3 USP15 招募至DSBs依赖于MDC
第四章 Usp15 基因敲除小鼠表现出基因组不稳定性
4.1 Usp15 基因敲除小鼠模型构建
4.2 Usp15 基因敲除小鼠表型分析
4.2.1 Usp15 基因敲除小鼠对电离辐射不耐受
4.2.2 Usp15 基因敲除小鼠表现出染色体异常
4.2.3 Usp15 基因敲除小鼠同源重组修复缺陷
第五章 USP15 作为潜在PARP抑制剂协同致死生物标志物的研究
5.1 USP15 肿瘤相关突变调控乳腺癌细胞对PARP抑制剂敏感性
5.1.1 TCGA数据库分析鉴定USP15 肿瘤相关突变
5.1.2 USP15 肿瘤相关突变影响其对同源重组修复调控
5.2 USP15 在胰腺癌中作为PARP抑制剂协同致死潜在靶点的研究
5.2.1 USP15 在多种胰腺癌细胞中低表达
5.2.2 USP15 调控胰腺癌细胞对PARP抑制剂敏感性
第六章 结论与展望
参考文献
作者在学期间发表文章
主要简介
致谢
本文编号：4023143
【文章页数】：117 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
缩略语表
摘要
Abstract
前言
1.1 DNA双链断裂修复通路
1.2 BRCA1-BARD1 二聚体在同源重组中的功能与调控
1.3 PARP抑制剂
1.4 泛素化修饰调控在DNA损伤修复应答中的作用
材料与方法
第一章 USP15在DNA双链断裂修复应答中的功能研究
1.1 USP15 调控同源重组修复
1.1.1 USP15 影响DNA损伤应答
1.1.2 USP15 敲除降低同源重组修复效率
1.2 USP15 调控同源重组修复因子招募至DSBs
1.3 USP15 通过靶向BARD1 参与调控同源重组修复
1.3.1 USP15与BARD1 相互作用
1.3.2 USP15-BARD1 相互作用对同源重组修复是必需的
第二章 USP15 调控同源重组修复的分子机制研究
2.1 USP15 调控同源重组修复依赖其去泛素化酶活性
2.1.1 USP15 酶活性缺失影响其对同源重组调控
2.1.2 USP15 自去泛素化并影响其与BARD1 相互作用
2.2 USP15 去泛素化BARD
2.2.1 USP15在DNA损伤后负调控BARD1 C端结构域泛素化修饰..
2.2.2 确定USP15 去除BARD1 多聚泛素链类型
2.3 USP15 介导BARD1 去泛素化并促进BARD1-HP1γ相互作用。
2.3.1 USP15在DNA损伤后促进BARD1-HP1γ相互作用
2.3.2 USP15 介导的BARD1 去泛素化影响其与HP1γ的结合
2.3.3 USP15 通过BARD1-HP1γ轴调控同源重组修复
第三章 USP15 自身响应DNA损伤信号的机制研究
3.1 USP15被ATM磷酸化
3.1.1 USP15是ATM底物
3.1.2 USP15678 位丝氨酸磷酸化对其在HR中功能是必需的
3.2 USP15 通过678 位丝氨酸磷酸化响应DNA损伤信号
3.2.1 USP15 磷酸化促进其核定位
3.2.2 USP15在DNA损伤发生后被招募至DSBs
3.2.3 USP15 招募至DSBs依赖于MDC
第四章 Usp15 基因敲除小鼠表现出基因组不稳定性
4.1 Usp15 基因敲除小鼠模型构建
4.2 Usp15 基因敲除小鼠表型分析
4.2.1 Usp15 基因敲除小鼠对电离辐射不耐受
4.2.2 Usp15 基因敲除小鼠表现出染色体异常
4.2.3 Usp15 基因敲除小鼠同源重组修复缺陷
第五章 USP15 作为潜在PARP抑制剂协同致死生物标志物的研究
5.1 USP15 肿瘤相关突变调控乳腺癌细胞对PARP抑制剂敏感性
5.1.1 TCGA数据库分析鉴定USP15 肿瘤相关突变
5.1.2 USP15 肿瘤相关突变影响其对同源重组修复调控
5.2 USP15 在胰腺癌中作为PARP抑制剂协同致死潜在靶点的研究
5.2.1 USP15 在多种胰腺癌细胞中低表达
5.2.2 USP15 调控胰腺癌细胞对PARP抑制剂敏感性
第六章 结论与展望
参考文献
作者在学期间发表文章
主要简介
致谢
本文编号：4023143
本文链接：https://www.wllwen.com/shoufeilunwen/yxlbs/4023143.html
