转录因子FOXS1在胃癌中的生物学功能与机制研究
发布时间：2025-01-05 22:00
胃癌是全球死亡率位居第三的恶性肿瘤疾病。目前,对于胃癌的发生和发展分子机制尚不明晰。转录因子FOXS1是我们基于TCGA测序数据筛选到的新的胃癌组织与正常组织之间显著差异表达的基因之一,位于chr20q11.21。TCGA胃癌数据和GEO数据库分析结果均显示FOXS1基因在胃癌中显著高表达;并且通过RT-PCR和免疫组化检测发现FOXS1在胃癌中也显著高表达,这一系列结果提示FOXS1基因可能促进胃癌的发生发展。Fox转录因子家族因含有保守的叉头框的DNA结合结构域而被命名,其成员在肿瘤发生发展中具有非常重要的作用。Fox家族已成为肿瘤研究中的热点。然而,目前FOXS1作为Fox家族最新发现的一个成员,其在胃癌中的生物学功能与分子机制研究至今未被报道,因此本论文重点研究FOXS1转录因子与胃癌临床意义的关系以及其对细胞增殖、周期、侵袭与迁移等生物学功能的影响,并阐明其发挥生物学功能的分子机制。目的:探讨转录因子FOXS1在胃癌中的表达及临床价值。体外检测FOXS1基因对胃癌细胞生长、周期和克隆形成能力的影响。体内检测FOXS1基因对胃癌细胞裸鼠成瘤能力的影响。检测FOXS1基因对胃癌细胞...
【文章页数】：114 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
英文缩略语名词对照
摘要
ABSTRACT
前言
第一部分 FOXS1基因在胃癌中的表达与临床意义分析
1 材料与方法
1.1 材料
1.2 方法
2 结果
2.1 FOXS1基因在胃癌中高表达
2.2 FOXS1基因与胃癌临床信息的关系
3 讨论
第二部分 FOXS1基因促进了胃癌细胞增殖作用
1 材料与方法
1.1 材料
1.2 方法
2 结果
2.1 FOXS1基因的敲降效率检测
2.2 FOXS1基因敲降对细胞生长的影响
2.3 FOXS1基因敲降对细胞克隆形成的影响
2.4 FOXS1基因敲降诱导G1期细胞周期停滞
2.5 FOXS1基因过表达效果的检测
2.6 FOXS1基因过表达促进细胞生长
2.7 FOXS1基因过表达促进细胞克隆形成能力
2.8 FOXS1基因过表达激活了G1/S期细胞周期检查点
2.9 FOXS1基因过表达促进了肿瘤细胞体内成瘤能力
3 讨论
第三部分 FOXS1基因促进了胃癌细胞侵袭与转移作用
1 材料与方法
1.1 材料
1.2 方法
2 结果
2.1 FOXS1基因敲降抑制了胃癌细胞的侵袭与迁移
2.2 FOXS1基因过表达促进了胃癌细胞的侵袭与迁移
2.3 FOXS1基因促进了胃癌细胞EMT的发生
3 讨论
第四部分 FOXS1基因启动子区域的鉴定与分析
1 材料与方法
1.1 材料
1.2 方法
2 结果
2.1 FOXS1基因启动子区域主要在-660+1bp之间
2.2 FOXS1基因启动子区域转录因子的预测分析与鉴定
2.3 外源性NFKB1对FOXS1基因调控作用的分析
2.4 NFKB1对FOXS1基因启动子区域调控作用的分析
2.5 NFKB1与FOXS1启动子区域的体内结合分析
3 讨论
第五部分 FOXS1基因通过Hh信号通路促进了胃癌细胞发展进程
1 材料与方法
1.1 材料
1.2 方法
2 结果
2.1 FOXS1基因参与的信号通路富集分析
2.2 FOXS1基因与GLI1基因的相关性分析
2.3 GLI1基因可以抑制FOXS1基因的表达
2.4 GLI1基因可以抑制FOXS1启动子区域的启动子活性
2.5 在体内GLI1直接结合在FOXS1启动子区域
2.6 FOXS1启动子区域GLI1结合位点的定点突变分析
3 讨论
第六部分 miR-125a-5p可结合到FOXS1基因的3'-UTR区域抑制其翻译
1 材料与方法
1.1 材料
1.2 方法
2 结果
2.1 调控FOXS1基因的miRNAs预测分析
2.2 miRNAs过表达对FOXS1基因m RNA水平没有调控作用
2.3 miR-125a-5p过表达显著抑制了FOXS1蛋白的表达
2.4 miR-125a-5p抑制对FOXS1mRNA水平的表达无影响
2.5 miR-125a-5p抑制促进了FOXS1蛋白的表达
2.6 miR-125a-5p可以结合在FOXS13'-UTR位点
3 讨论
全文总结
参考文献
综述:FOX家族转录因子研究进展
参考文献
致谢
博士期间发表的论文
本文编号：4023333
【文章页数】：114 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
英文缩略语名词对照
摘要
ABSTRACT
前言
第一部分 FOXS1基因在胃癌中的表达与临床意义分析
1 材料与方法
1.1 材料
1.2 方法
2 结果
2.1 FOXS1基因在胃癌中高表达
2.2 FOXS1基因与胃癌临床信息的关系
3 讨论
第二部分 FOXS1基因促进了胃癌细胞增殖作用
1 材料与方法
1.1 材料
1.2 方法
2 结果
2.1 FOXS1基因的敲降效率检测
2.2 FOXS1基因敲降对细胞生长的影响
2.3 FOXS1基因敲降对细胞克隆形成的影响
2.4 FOXS1基因敲降诱导G1期细胞周期停滞
2.5 FOXS1基因过表达效果的检测
2.6 FOXS1基因过表达促进细胞生长
2.7 FOXS1基因过表达促进细胞克隆形成能力
2.8 FOXS1基因过表达激活了G1/S期细胞周期检查点
2.9 FOXS1基因过表达促进了肿瘤细胞体内成瘤能力
3 讨论
第三部分 FOXS1基因促进了胃癌细胞侵袭与转移作用
1 材料与方法
1.1 材料
1.2 方法
2 结果
2.1 FOXS1基因敲降抑制了胃癌细胞的侵袭与迁移
2.2 FOXS1基因过表达促进了胃癌细胞的侵袭与迁移
2.3 FOXS1基因促进了胃癌细胞EMT的发生
3 讨论
第四部分 FOXS1基因启动子区域的鉴定与分析
1 材料与方法
1.1 材料
1.2 方法
2 结果
2.1 FOXS1基因启动子区域主要在-660+1bp之间
2.2 FOXS1基因启动子区域转录因子的预测分析与鉴定
2.3 外源性NFKB1对FOXS1基因调控作用的分析
2.4 NFKB1对FOXS1基因启动子区域调控作用的分析
2.5 NFKB1与FOXS1启动子区域的体内结合分析
3 讨论
第五部分 FOXS1基因通过Hh信号通路促进了胃癌细胞发展进程
1 材料与方法
1.1 材料
1.2 方法
2 结果
2.1 FOXS1基因参与的信号通路富集分析
2.2 FOXS1基因与GLI1基因的相关性分析
2.3 GLI1基因可以抑制FOXS1基因的表达
2.4 GLI1基因可以抑制FOXS1启动子区域的启动子活性
2.5 在体内GLI1直接结合在FOXS1启动子区域
2.6 FOXS1启动子区域GLI1结合位点的定点突变分析
3 讨论
第六部分 miR-125a-5p可结合到FOXS1基因的3'-UTR区域抑制其翻译
1 材料与方法
1.1 材料
1.2 方法
2 结果
2.1 调控FOXS1基因的miRNAs预测分析
2.2 miRNAs过表达对FOXS1基因m RNA水平没有调控作用
2.3 miR-125a-5p过表达显著抑制了FOXS1蛋白的表达
2.4 miR-125a-5p抑制对FOXS1mRNA水平的表达无影响
2.5 miR-125a-5p抑制促进了FOXS1蛋白的表达
2.6 miR-125a-5p可以结合在FOXS13'-UTR位点
3 讨论
全文总结
参考文献
综述:FOX家族转录因子研究进展
参考文献
致谢
博士期间发表的论文
本文编号：4023333
本文链接：https://www.wllwen.com/shoufeilunwen/yxlbs/4023333.html
