CYP1A酶特异性探针底物对乙酰氨基酚在双峰驼体内的药动学研究

发布时间：2018-05-04 02:06

  本文选题：双峰驼CYP1A酶 + 特异性探针底物　； 参考：《内蒙古农业大学》2017年硕士论文

【摘要】：双峰驼是生活在荒漠、半荒漠草原的特有家畜,具有很高的杂食性。喜欢采食盐碱含量高的植物,在极端恶劣的生存环境中又可采食蛋白含量极少、富含纤维素的植物。双峰驼这些独特的采食特性暗示着其物质代谢途径的特殊性和处置外源性物质能力的独特性。而后者又与双峰驼CYPs酶系息息相关,因为CYP酶系参与机体大多数内源性和外源性物质代谢。其中,CYP1A酶是CYP酶家族中的一个主要亚家族,在一些致癌物和毒性物质的体内活化与降解代谢过程中起着重要作用,并参与多种药物的代谢,其活性与药物的毒性、疗效有着密切的关系。为探明CYP1A酶的体内活性及其外源性药物代谢的影响,开展了本项研究。首先将试验双峰驼(n=12)分为底物组和酶抑制剂+底物组,每组6峰,底物组经颈部肌肉注射探针底物对乙酰氨基酚注射液(4mg/kg),酶抑制剂+底物组双峰驼按0.4mg/kg剂量肌肉注射洛美沙星注射液连续4天,于末次给药后再注射相同剂量的对乙酰氨基酚注射液(4mg/kg),并于不同时间点采集血样,分离血浆备用。其次,为研究双峰驼CYP1A酶的体内活性,使用反向高效液相色谱紫外检测法检测该酶的特异性探针底物--对乙酰氨基酚在双峰驼血浆中的动态浓度。采用内标法定量分析,内标物为间乙酰氨基酚,流动相为甲醇/水=20/80,流速为0.5 mL·min-1,紫外检测波长为248nm,柱温为30℃,进样量为8uL。采用甲醇直接沉淀蛋白后用氮气吹干方法处理双峰驼血浆样品,进样检测各时间点血浆样品药物浓度。结果表明,底物对乙酰氨基酚和内标间乙酰氨基酚的的保留时间分别为6.Omin和8.2min,分离良好,无血浆杂峰干扰;且在0.08～10.24μg/mL浓度范围内线性关系良好(R2=0.9997,n=8);日内和日间精密度RSD均小于7.0%;绝对回收率为80.00%～93.00%;相对回收率为94.00%～103.00%。采用Phoenix WinNonLin 7.0药动学软件处理各时间点与对应的血浆药物浓度值,计算相关药动学参数。底物组药动学参数分别是:消除半衰期(T1/2)为5.59±0.17h,达峰时间(Tmax)为1.70±0.51h,达峰浓度(Cmax)为0.96±0.43μg/mL,药时曲线下面积(AUC0-t)为 5.83土0.31μg· h/mL,表观分布容积(Vd)为 4416.81±138.23mL/kg,清除率(CL)为593.04±28.41mL/(kg·h),体内平均滞留时间(MRT)为6.37±0.56h。酶抑制剂+底物组的药动学参数分别是:T1/2为6.24土0.25h,Tmax为 0.833±0.37h,Cmax为1.22±0.66μg/mL,AUC0-t为8.88±0.23μg·h/mL,Vd为3934±90.03 mL/kg,CL为 437.05± 12.63 mL(kg · h),MRT 为 6.98±0.63h。采用Graphpad Prism 5.0软件比较分析两组双峰驼药动学参数,结果可知,CYP1A酶特异性探针底物对乙酰氨基酚在双峰驼体内的吸收快,消除相对较慢;洛美沙星可明显抑制CYP1A酶活性,从而明显延长对乙酰氨基酚在双峰驼体内的T1/2、提高Cmax、增加AUC和延长MRT,缩短Tmax。因此,通过本试验成功建立了测定双峰驼CYP1A酶特异性探针底物--对乙酰氨基酚的RP—HPLC紫外检测方法,阐明了双峰驼CYP1A酶体内活性及其特异性抑制剂的影响,研究结果为全面揭示双峰驼CYP酶系的体内外活性研究奠定了基础,提供了科学依据。
[Abstract]:In order to study the activity of CYP1A enzyme and its influence on the metabolism of exogenous substances , it was found that CYP1A enzyme is one of the main subfamily of CYP enzyme family , and its activity is closely related to the metabolism of exogenous substances . The results show that the retention time of the substrate acetaminophen and the internal standard is 6.Omin and 8.2 min , and the linear relationship is good ( R2 = 0.9997 , n = 8 ) . The pharmacokinetic parameters of CYP1A enzyme - specific probe substrate - acetaminophen in Bactrian camel were determined by using Graphpad Prism 5.0 software .

【学位授予单位】：内蒙古农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：S824

【参考文献】

相关期刊论文 前10条

1 王艳;高飞;哈斯苏荣;;应用特异性探针药物分析双峰驼CYP2D6酶体外活性[J];畜牧兽医学报;2016年12期

2 萨仁图娅;斯仁达来;付龙霞;刘强德;吉日木图;;中国双峰驼种质资源保护调查研究[J];中国草食动物科学;2015年06期

3 何兴瀚;张文彬;哈斯苏荣;;采用特异性探针药物法对双峰驼CYP1A酶体外活性的测定[J];中国兽医科学;2015年11期

4 托合塔森·皮达巴依;阿尼帕·库尔班;;新疆塔里木双峰驼简要介绍[J];中国畜禽种业;2015年11期

5 哈斯苏荣;李擎;玉斯日古楞;吉日木图;;双峰驼CYP基因家族的比较研究[J];畜牧兽医学报;2015年07期

6 柏丽;冯登侦;;中国双峰驼血液生理生化特性研究[J];畜牧与兽医;2015年01期

7 郭文场;张嘉保;陈树宁;;中国双峰驼的品种、繁殖、饲养管理和利用(2)[J];特种经济动植物;2014年07期

8 关皎;王丹;郝乘仪;朱鹤云;张秀荣;;对乙酰氨基酚家兔体内药动学研究[J];吉林医药学院学报;2011年05期

9 陈氏红;严明;王柳萍;蒙光义;杨斌;;RP-HPLC法测定大鼠体内对乙酰氨基酚的血药浓度[J];西北药学杂志;2010年02期

10 蒙光义;王柳萍;严明;许盈;杨斌;;对乙酰氨基酚在大鼠体内药动学研究[J];广西医学;2010年02期

相关博士学位论文 前1条

1 吉日木图;双峰家驼与野驼分子进化及驼乳理化特性研究[D];内蒙古农业大学;2006年

相关硕士学位论文 前3条

1 何兴瀚;双峰驼CYP1A酶体外活性及其对探针药物代谢的影响[D];内蒙古农业大学;2015年

2 裴乐;双峰驼CYP3A酶体外活性及其对探针药物代谢的影响[D];内蒙古农业大学;2014年

3 戴静;氟喹诺酮类对猪和鸡肝微粒体CYP1A2活性影响研究[D];华中农业大学;2009年

，

本文编号：1841087