生防萎缩芽孢杆菌β-l,3-葡聚糖酶拮抗功能的研究

发布时间：2018-11-15 17:14

【摘要】：本论文以实验室分离得到的萎缩芽孢杆菌SF1为研究对象,为了探究其拮抗蛋白的功能,对其β-1,3-葡聚糖酶基因进行了克隆和表达。本文的主要研究内容和结果如下:1、β-1,3-葡聚糖酶基因的克隆:从萎缩芽孢杆菌SF1中克隆获得了 β-1,3-葡聚糖酶基因bgl,基因全长1086bp,G+C含量50.4%,编码358个氨基酸,理论的分子量为47 kDa。2、β-1,3-葡聚糖酶基因在大肠杆菌中的表达:将克隆得到的β-1,3-葡聚糖酶基因片段与表达载体PGEX-4T-1连接构建重组质粒pGEX-4T-1-bgl,转化宿主菌BL21(DE3),并成功获得工程菌株NDM-1。经SDS-PAGE电泳检测,融合蛋白相对分子量约为73 kDa。3、β-1,3-葡聚糖酶酶活力及抑菌效果的测定:异源表达的β-1,3-葡聚糖酶,抑菌率最高达到45%,是菌株SF1抑菌率的61.9%。
[Abstract]:In this paper, SF1 isolated from Bacillus atrophy was used as the research object. In order to study the function of its antagonistic protein, the 尾 -1C 3-glucanase gene was cloned and expressed. The main contents and results of this paper are as follows: 1. Cloning of 尾 -1m3-glucanase gene: the total length of bgl, gene of 尾 -1m3-glucanase gene was obtained from SF1 of Bacillus atrophy. Encoding 358 amino acids with a theoretical molecular weight of 47 kDa.2, Expression of 尾 -1m3-glucanase gene in Escherichia coli: recombinant plasmid pGEX-4T-1-bgl, was transformed into host strain BL21 (DE3) by ligating the cloned 尾 -1m3-glucanase gene fragment with the expression vector PGEX-4T-1. The engineering strain NDM-1. was obtained successfully. SDS-PAGE electrophoresis showed that the relative molecular weight of the fusion protein was about 73 kDa.3, 尾 -1G 3 glucanase activity and its bacteriostatic effect. It is 61.9% of the inhibition rate of SF1.
【学位授予单位】：内蒙古大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：S476

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本文编号：2333932