【摘要】：解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)是一种与枯草芽孢杆菌亲缘关系较近的益生菌,其环境适应力强,可分泌多种消化酶和抑制某些病原菌的繁殖,因此被广泛应用于动植物生产。本试验旨在探索解淀粉芽孢杆菌TL对生长前期肉鸡盲肠菌群的影响同其发挥促生长作用之间的关系。试验选取1日龄科宝白羽肉鸡共180只,随机分成3组,每组60只,分别为:对照组(饲喂不添加任何添加剂的基础日粮)、抗生素组(饲喂基础日粮+50 g/t的金霉素)和益生菌组(饲喂基础日粮+200 g/t的解淀粉芽胞杆菌TL微生态制剂),自由采食和饮水,饲养至21日龄。试验结果如下:体重:同对照组相比,益生菌组和抗生素组的肉鸡体重分别比对照组增加了27.06%和17.65%,差异极显著(P0.01)。结果表明:解淀粉芽孢杆菌TL具有和金霉素同样的促生长效果。盲肠菌群结构:在门水平,同对照组相比,益生菌组和抗生素组中厚壁菌门的相对丰度分别51.11%增加至89.69%和93.40%,差异极显著,和体重呈正相关(P0.01);而拟杆菌门分别由36.87%下降至3.61%和0.17%,差异极显著,和体重呈负相关(P0.01),益生菌组和抗生素组差异不显著。结果表明使用解淀粉芽孢杆菌TL和金霉素后,盲肠菌群由以厚壁菌门和拟杆菌门为主导的菌群结构转变成了几乎全部由厚壁菌门为优势菌的盲肠菌群结构。在属水平,同对照组相比,有9个菌属在益生菌组和抗生素组均显著增加,包括Lachnoclostridium和Ruminiclostridium等(P0.05);4个菌属在两组中均显著减少,包括拟杆菌属和Parabacteroides等(P0.05)。但Blautia,Pseudoflavonifractor等8种菌属只在益生菌组增加(P0.05);梭菌属和Flavonifractor等8种菌属只在抗生素组增加(P0.05)。在种水平,同对照组相比,益生菌组和抗生素组均各自有32种细菌显著增加,其中柔嫩梭菌和甲基戊糖梭菌等24种细菌在两组中均显著增加(P0.05),普通拟杆菌和单形拟杆菌等8种细菌在两组中均显著减少(P0.05),表现出一定的相似性;但S_variabile,P_capillosus等8种细菌只在益生菌组显著增加(P0.05);肉毒杆菌和丁酸梭菌等8种细菌只在抗生素组中显著增加(P0.05)。另外,使用解淀粉芽孢杆菌TL和金霉素后,肉鸡盲肠中潜在致病菌大肠杆菌,肠道沙门菌,志贺杆菌的相对丰度无显著变化(P0.05);但同对照组相比,金黄色葡萄球菌的相对丰度在抗生素组中显著增加(P0.05)。结果表明,使用解淀粉芽孢杆菌TL和金霉素后,肉鸡盲肠菌群结构均以由厚壁菌门和拟杆菌门共同为主导的菌群结构转变成了几乎全部由厚壁菌门为优势菌的盲肠菌群结构,并且增加的厚壁菌门的细菌多为产乙酸和丁酸的细菌;但金霉素的使用明显增加了肉鸡盲肠中有害菌肉毒梭菌和金黄色葡萄球菌的相对丰度,对肉鸡的健康造成了潜在的风险。盲肠菌群功能:通过KEGG代谢通路分析发现,同对照组相比,益生菌组和抗生素组中同营养物质代谢和有害物质降解的代谢通路如含硒化合物代谢,亚油酸代谢,甘油酯代谢,双酚降解和苯乙烯降解等的相对丰度均显著增加(P0.05);而细菌分泌系统,链霉素合成,鞭毛组装等通路的相对丰度均显著降低(P0.05)。另外,同对照组相比,益生菌组中乙苯降解,苯酸盐降解,非核糖体肽合成通路的相对丰度也显著增加(P0.05);抗生素组中丁酸甲酯代谢,氯烷烃和氯烯烃降解通路的相对丰度显著增加(P0.05)。另外,通过对乙酸,丙酸和丁酸合成通路的基因丰度比较发现,同对照组相比,益生菌组和抗生素组的盲肠菌群基因产乙酸和丁酸的能力有增加趋势,而丙酸合成的能力有减少趋势。在CAZy分析中,同对照组相比,益生菌组中同乙酰木聚糖,纤维二糖和果聚糖水解相关的碳水化合物酶家族包括CE4,GH94,GH32的相对丰度均显著增加(P0.05),而关于木糖,鼠李糖和肽聚糖等水解相关的碳水化合物酶家族如GH43,GH78和GT51的相对丰度则显著降低(P0.05)。抗生素组中同纤维素,乙酰木聚糖和淀粉水解相关的碳水化合物酶家族包括CBM13,CE4和GT5的相对丰度均显著增加(P0.05);而关于肽聚糖和木糖水解相关的碳水化合物酶家族如GH23,GH43的相对丰度则显著降低(P0.05)。通过抗性基因分析发现,对照组肉鸡盲肠菌群中的抗性基因有55种,而益生菌组为56种,新增加了耐甲氧西林的抗性基因;而在抗生素组中对59种抗生素存在耐药性。相比于前两个组,又增加了耐单菌霉素,头孢他啶和头孢菌素三代的多重耐药基因。结果表明,解淀粉芽孢杆菌TL和金霉素的使用均使盲肠菌群不同程度的提高了对某些营养物质如甘油酯,亚油酸的代谢能力,同时也提高了对有害物质如双酚,苯乙烯等的降解和对难消化植物多糖如乙酰木聚糖和纤维二糖等的利用能力,由此说明解淀粉芽孢杆菌TL和金霉素的使用均增强了盲肠菌群对饲料的利用能力,但是由于金霉素的使用使大肠杆菌新产生了一种可耐单菌霉素,头孢他啶和头孢菌素三代的多重耐药基因,不利于肉鸡健康生长。
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【学位授予单位】：华中农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：S831.5
【参考文献】
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