温度对红螯光壳螯虾生长及免疫影响的初步研究

发布时间：2019-04-15 12:18

【摘要】：本文以红螯光壳螯虾(Cherax quadricarinatus)为研究对象,运用生物化学、免疫毒理学以及分子生物学等相关学科的研究方法及生物技术,通过控制外部的环境温度条件,初步探讨了温度变化尤其是低温对红螯光壳螯虾生长及免疫的影响,具体研究结果如下:1.不同温度对红螯光壳螯虾生长性能及抗氧化指标的影响为探究温度对红螯光壳螯虾生长性能、抗氧化指标、免疫力及抗病力的影响,进行了 8周的养殖试验,试验设置了四个温度组,分别为10℃、16℃、22℃、28℃,每组3个重复。结果表明,不同温度的红螯光壳螯虾存活率和增长率存在显著差异,低温条件(10℃)下会显著抑制红螯光壳螯虾的摄食、生长和存活,而适宜的温度,则对红螯光壳螯虾的存活和生长有显著促进作用。研究温度对红螯光壳螯虾肝胰腺、胃、鳃三种组织消化酶和抗氧化酶活性的影响时,发现28℃组红螯光壳螯虾的淀粉酶和胰蛋白酶活性最高,显著高于其余组,而10℃组的淀粉酶和胰蛋白酶活性最低,显著低于其余组。三种组织SOD酶活性在28℃时达到峰值,10℃时SOD酶活性最低。结果表明,低温能够显著抑制红螯光壳螯虾消化酶和抗氧化酶的活性,从而影响其生长和存活。2.不同温度对红螯光壳螯虾免疫指标的影响研究温度对红螯光壳螯虾肝胰腺、鳃、肌肉三种组织ACP、AKP、LSZ活性影响时,发现22℃组的ACP和AKP活性最高,10℃组ACP和AKP活性最低且显著低于其它组(P0.05)。溶菌酶活性在10℃组最低,22℃组的溶菌酶活性和28℃没有显著差异。实验结果表明,低温会显著抑制红螯光壳螯虾的免疫酶活性,从而对其免疫系统造成损害,而适宜的温度,则能增强红螯光壳螯虾的免疫力。3.不同温度对红螯光壳螯虾抗病力的影响试验虾红螯光壳螯虾经注射0.1m1,1.0× 108cfu/ml浓度的嗜水气单胞杆菌,不同温度组SOD酶活力有显著差异。结果表明,低温条件(10℃)时,嗜水气单胞杆菌感染能力很弱,SOD酶活力较强,但随着感染时间的延长,也会降低SOD酶活力,表明感染程度与温度和时间都有关,虽然低温条件下,嗜水气单胞杆菌的感染能力比较弱,但若长时间处于低温条件中,也会显著影响免疫酶的活性。而随着感染时间的延长,22℃组和28℃组SOD活力却逐渐增强恢复到原水平,表明适宜的温度能显著增强红螯光壳螯虾的抗病力。4.红螯光壳螯虾α-淀粉酶基因的克隆和表达分析运用分子生物学技术,克隆了红螯光壳螯虾α-淀粉酶基因的片段,该片段长970bp,开放阅读框长528bp,编码175个氨基酸残基,对α-淀粉酶做基因同源性比对,结果表明,序列与克氏原螯虾和凡纳滨对虾的同源性最高,分别为89%和85%,对其生物起源进行分析发现与克氏原螯虾亲缘关系最近。荧光定量PCR结果显示,不同温度组的红螯光壳螯虾α-淀粉酶基因表达量存在显著差异,28℃组表达量最高,10℃组最低,显著低于其余组,表明α-淀粉酶基因参与了红螯光壳螯虾生长过程,对红螯光壳螯虾的生长有显著的促进作用。5.红螯光壳螯虾HSP70和Mn-SOD基因的表达分析运用实时荧光定量PCR技术,RT-PCR结果显示,不同温度对两条基因的表达都有显著的影响。HSP70基因在10℃和28℃时都有高表达,Mn-SOD基因在10℃组时表达量最低。表明,高温和低温环境都会提高HSP70基因的表达,从而诱导合成HSP70蛋白,而Mn-SOD基因在适宜温度时才会诱导其表达。
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【学位授予单位】：华东师范大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：S917.4

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