玉屏风散超微粉的制备、质量标准及对猪瘟抗体水平影响研究

发布时间：2017-04-12 16:11

  本文关键词：玉屏风散超微粉的制备、质量标准及对猪瘟抗体水平影响研究，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：猪瘟是一种猪的强烈性接触性传染病,世界动物卫生组织将其列入OIE疾病名录,猪瘟对养猪行业造成了极大的冲击,被我国列为一类传染病。近年来研究表明玉屏风散,具有中药中的丙种球蛋白之称,是较强的中药免疫增强剂。中药超微粉碎技术采用现代科技将中药材或中药提取物超微粉化,能使药效提高的同时大大减少副作用,因此中药超微粉化在具有重要的意义。本研究拟将玉屏风散制备成超微粉,并对其物理性质进行研究,利用HPLC测定超微粉中升麻素苷的含量,最后研究其对猪瘟抗体水平的影响。实验选取质量较好的黄芪、白术、防风洗净、干燥,先分别制备出中药粗粉,然后取各种中药粗粉超微粉碎得各中药超微粉。取各种样品利用相关仪器进行粒度分布、比表面积、流动性和吸湿性测定。粒径及比表面积结果显示,中药粗粉粒径基本在50-100μm范围内,而中药超微粉粒径范围主要在1-10μ.m范围内,超微粉的比表面积比粗粉大数倍。流动性结果显示,超微粉的休止角与粗粉休止角比例大于1,表明超微粉流动性比粗粉小。吸湿性结果显示,在温度为25℃,相对湿度为75%的条件下,黄芪粗粉、黄芪超微粉和白术超微粉均在96h达到吸湿平衡,而白术粗粉、防风粗粉和防风超微粉均在120h才基本达到吸湿平衡。利用HPLC对所制备的超微粉中升麻素苷含量进行测定,检测波长为254nm,流动相为乙腈-水(30：70)。将浓度为100.0μg/mL,50.0μg/mL,25.0μg/mL,12.5μg/mL, 6.3μg/mL的对照品溶液分别吸取20μL注入HPLC,以峰面积为纵坐标,进样量为横坐标,绘制标准曲线。然后进行精密度、重现性和回收率实验,最后取3批样品进行含量测定。HPLC图结果显示,升麻素苷对照品保留时间9.2min左右,而样品在9.2min左右处也出现一个较好的峰形,并且基线平稳。标准曲线实验所得回归方程为Y=8879.65X-7823.36, r=0.99995(n=5),试验表明,升麻素苷对照品在6.3～100.0『g/mL范围内线性关系良好,最低检测量0.46μg/mL。精密度实验结果显示,升麻素苷对照品峰面积积分值RSD为0.92%,表明此方法精密度较好；重现性结果显示,样品的升麻素苷RSD为0.89%,表明重现性良好；回收率实验结果显示回收率达到97.52%,RSD为0.95%。含量结果显示,三批次的结果分别为0.82%、0.75%、0.79%,比相关一些玉屏风散普通颗粒中升麻素苷含量要高。实验选用65日龄三元杂交(D×L×Y)断奶仔猪50头,平均体重30公斤,同时注射猪瘟细胞苗每头2头份,随机分为5组：Ⅰ组基础日粮组加1%玉屏风散超微粉：Ⅱ组基础日粮加0.5%玉屏风散超微粉；Ⅲ组基础日粮加0.1%玉屏风散超微粉：Ⅳ组基础日粮加2%玉屏风散粉末；Ⅴ组基础日粮组。通过猪瘟免疫后7d、14d、21d、28d对抗体水平进行检测。结果显示,在免疫后7d,猪瘟抗体水平开始逐渐上升,在免疫后21d达到最高水平,然后缓慢下降。添加1%玉屏风散超微粉组、添加0.5%玉屏风散超微粉组、添加0.1%玉屏风散超微粉组以及添加2%玉屏风散粗粉组猪瘟抗体水平均显著高于对照组(P0.05)；添加1%玉屏风散超微粉组、添加0.5%玉屏风散超微粉组、添加0.1%玉屏风散超微粉组猪瘟抗体水平显著高于添加2%玉屏风散粗粉组(P0.05)；添加0.5%玉屏风散超微粉组猪瘟抗体水平显著高于添加1%玉屏风散超微粉组和添加0.1%玉屏风散超微粉组(P0.05)；添加1%玉屏风散超微粉组抗体水平高于添加0.1%玉屏风散超微粉组,但差异不显著(P0.05)。结果表明：玉屏风散超微粉对猪瘟免疫有显著增强作用,添加量0.5%为最佳。以上实验结果表明,玉屏风散各味中药经过超微粉化后粒径减小,比表面积增加,流动性减小,吸湿性变强。HPLC图、精密度和回收率实验表明通过此方法可行。升麻素苷含量结果显示,三批次的结果分别为0.82%、0.75%、0.79%,比相关一些玉屏风散普通颗粒中升麻素苷含量要高。猪瘟抗体检测结果表明玉屏风散超微粉和玉屏风散粗粉均可显著增强猪群免疫功能,提高猪群猪瘟抗体水平,但超微粉效果更佳,且以0.5%添加量最佳。
【关键词】：玉屏风散 超微粉 质量标准 猪瘟免疫 断奶仔猪
【学位授予单位】：四川农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：S853.7
【目录】：

• 摘要4-6
• ABSTRACT6-12
• 第一章 文献综述12-24
• 1 概述12
• 2 猪瘟的研究12-15
• 2.1 猪瘟的研究历史12-13
• 2.2 猪瘟免疫研究13-15
• 2.2.1 猪瘟免疫程序研究13
• 2.2.2 猪瘟新型疫苗研究进展13-14
• 2.2.3 猪瘟抗体的检测方法14
• 2.2.4 猪瘟免疫失败原因及对策14-15
• 3 中药多糖免疫剂的研究15-18
• 3.1 中药多糖免疫机制研究15-17
• 3.1.1 增加免疫器官重量15-16
• 3.1.2 促进体液免疫16
• 3.1.3 促进细胞免疫16
• 3.1.4 其它作用16-17
• 3.2 中药多糖对猪免疫作用研究17-18
• 4 玉屏风散的研究18-20
• 4.1 玉屏风散的介绍18
• 4.2 玉屏风散免疫作用机制18-20
• 4.2.1 玉屏风散对免疫器官作用18
• 4.2.2 玉屏风散对非特异性免疫的作用18-19
• 4.2.3 玉屏风散对特异性免疫的作用19
• 4.2.4 玉屏风散对红细胞免疫的影响19-20
• 4.3 玉屏风散的临床应用20
• 5 中药超微粉的研究20-23
• 5.1 中药超微粉的特点21-22
• 5.1.1 粒径小21
• 5.1.2 生物利用度高21-22
• 5.1.3 安全性高22
• 5.2 中药超微粉的临床应用22-23
• 6 研究的目的与意义23-24
• 第二章 玉屏风散超微粉的制备及物理性质24-29
• 1 材料和方法24-25
• 1.1 实验材料和仪器24
• 1.1.1 实验药材及材料24
• 1.1.2 实验仪器24
• 1.2 实验方法24-25
• 1.2.1 玉屏风散超微粉的制备24
• 1.2.2 不同粉体粒径测定24
• 1.2.3 不同粉体比表面积的测定24-25
• 1.2.4 不同粉体流动性的测定25
• 1.2.5 不同粉体吸湿性的测定25
• 2 结果和分析25-28
• 2.1 粒径和比表面积分析结果25-27
• 2.2 流动性测定结果27
• 2.3 吸湿性测定结果27-28
• 3 讨论28-29
• 第三章 HPLC测定玉屏风散超微粉升麻素苷含量29-33
• 1 材料和方法29-30
• 1.1 实验材料和仪器29
• 1.1.1 实验材料29
• 1.1.2 实验仪器29
• 1.2 实验方法29-30
• 1.2.1 色谱条件29
• 1.2.2 供试品溶液的制备29
• 1.2.3 对照品溶液的制备29
• 1.2.4 标准曲线的制备29
• 1.2.5 精密度试验29-30
• 1.2.6 重现性试验30
• 1.2.7 回收率试验30
• 1.2.8 含量测定30
• 2 结果和分析30-32
• 2.1 各种物质的HPLC图30-31
• 2.2 标准曲线结果31
• 2.3 精密度、重现性、回收率实验结果31
• 2.4 含量测定结果31-32
• 3 讨论32-33
• 第四章 玉屏风散超微粉对猪瘟抗体水平影响研究33-38
• 1 材料和方法33-35
• 1.1 实验材料和仪器33
• 1.1.1 实验材料33
• 1.1.2 实验仪器33
• 1.1.3 实验动物33
• 1.2 实验方法33-35
• 1.2.1 基础日粮33-34
• 1.2.2 分组及给药34
• 1.2.3 饲养方式34
• 1.2.4 样品的制备34
• 1.2.5 猪瘟抗体检测34-35
• 1.2.6 统计分析35
• 2 结果和分析35-36
• 3 讨论36-38
• 第五章 结论和创新38-39
• 1 总体结论38
• 2 创新点38-39
• 附：玉屏风散超微粉质量标准39-40
• 参考文献40-45
• 致谢45

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前8条

1 闫琳;梅景良;黄一帆;;加味玉屏风散对试验性免疫抑制黄鳝非特异性免疫功能的影响[J];中国农学通报;2010年08期

2 包佐义;玉屏风散也能治皮肤病[J];农家顾问;2005年09期

3 毕玉霞;周德忠;许剑琴;;“玉屏风散”对机体免疫功能的影响[J];中兽医学杂志;2006年01期

4 李立顺;时维静;乐其新;金勇;;玉屏风散镇咳、祛痰及平喘的药效学试验研究[J];中兽医医药杂志;2008年04期

5 江和基;黄志坚;谢红兵;陈强;陈勤光;;精制玉屏风散对仔猪免疫功能和生长性能的影响[J];福建农业大学学报;2006年06期

6 李根明;;玉屏风散加减治疗耕牛盗汗[J];畜牧兽医杂志;2012年05期

7 毕玉霞;刘诗柱;;玉屏风散对小白鼠免疫功能影响的实验研究[J];中兽医医药杂志;2007年01期

8 ;[J];;年期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 黄秀君;;玉屏风散预防儿童反复上呼吸道感染[A];第三届浙江省中西部科技论坛论文集（第六卷 中西医分卷）[C];2006年

2 陈馥馨;高晓山;;玉屏风散组成考查及联想[A];全国中成药学术研讨会论文汇编[C];1994年

3 陈玉其;;玉屏风散预防感冒的临床报告[A];中国中医药学会基层中医药会议专刊[C];1997年

4 黄亚菲;顾立刚;谢鸣;贾翎;赵建晴;;玉屏风散不同剂量配伍对小鼠免疫功能影响的研究[A];全国中医药科研与教学改革研讨会论文集[C];2000年

5 闫燕;李艳菊;刘爱风;祝美玲;张潇伊;黄丽波;袁学军;;口服加味玉屏风散对吸入甲醛小鼠血相指标的影响[A];全国动物生理生化第十一次学术交流会论文摘要汇编[C];2010年

6 连林辉;;加味玉屏风治疗儿童反复呼吸道感染临床观察[A];全国第六届中西医结合呼吸病学术研讨会论文汇编[C];2002年

7 张伟;张心月;邵雨萌;;玉屏风散对慢性阻塞性肺疾病大鼠气道病理改变的影响[A];中华中医药学会内科分会学术年会资料汇编[C];2007年

8 顾s

本文编号：301645