山东省部分地区肉鸡养殖场大肠杆菌的分离鉴定及耐药性分析
发布时间：2021-07-02 10:17
山东省肉鸡年出栏量达16.48亿只,鸡肉产量达232.8万吨,居全国首位,是我国的肉鸡产业大省。肉鸡养殖业大发展同时,动物疾病、畜禽废弃物污染、畜禽产品食品安全与品质等养殖业的难题也伴随产生。大肠杆菌（Escherichia coli）广泛存在于整个饲养环节,乃至于食品链中。致病性大肠杆菌引起的禽类感染,是养殖业的难题之一,耐药性的增加使该菌的防控变得更困难。不同来源的E.coli之间,甚至E.coli和其它细菌之间也存在广泛的耐药基因的转移,导致E.coli的耐药性问题,不仅造成严重的经济损失,还会引发食品安全问题和公共卫生问题,危害人类健康。在世界各国一致认为细菌耐药性的问题会深远影响世界经济的背景下,E.coli的耐药性问题成为了研究的热点。经国内外研究人员对E.coli耐药性不断监测和研究发现,E.coli的耐药性逐年趋向复杂化和严重化。但是对山东地区肉鸡源E.coli在一个养殖周期内的变化及耐药特征研究尚未有报道。本次研究在山东省的泰安（Farm 1）、临沂（Farm 2）、聊城（Farm 3）、潍坊（Farm4）、滨州（Farm 5）和菏泽（Farm 6）六个地区各选一个肉...
【文章来源】：山东农业大学山东省
【文章页数】：74 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
大肠杆菌造成的肝周炎、心包炎Fig.1PerihepatitisandpericarditiscausedbyE.coli
山东农业大学硕士专业学位论文152材料与方法2.1材料2.1.1样本采集山东省位于中国东部沿海、黄河下游，总面积15.7万平方公里，辖16个地级市。本次研究选择了泰安（Farm1），临沂（Farm2），聊城（Farm3），潍坊（Farm4），滨州（Farm5）菏泽（Farm6）六个常规肉鸡养殖场（见图2）进行E.coli流行情况调查。所有被调查的的鸡群的养殖周期约为40天。Farm1至Farm6从每个养鸡场中随机选择两个鸡舍，在养殖周期的三个时间点（雏鸡孵化后的1至2天，17至20日龄和35至40日龄）进行采样(采样点背景资料见附表1)。从2019年5月至7月，在Farm1、Farm2、Farm3、Farm4、Farm5和Farm6六个养鸡场共采集了近700多份样本。在每次采样过程中，每栋鸡舍随机选取20只鸡，用棉签采集肛门拭子样本；从4处不同的地点采集4份粪便样本（约0.5g），分别置于2ml无菌离心管中；随机选取两处投水器，用2ml无菌离心管收集2个饮用水样本；用棉签拭子采取2处墙表面样本；鸡舍内外各两处放置LB平板，敞口放置15min左右采集空气中细菌样本。所有棉签提前用液体LB浸湿灭菌，离心管灭菌。各种棉签拭子样本置于2ml离心管中存放。所有采样后的样品在到达实验室处理之前放置于4℃保温箱内。图2山东省内采样点的分布情况Fig.2distributionofsamplingpointsinShandongProvince
山东农业大学硕士专业学位论文213结果与分析3.1E.coli的初步筛选如图3所示，是某一疑似E.coli的菌落，经反复划线纯化后的结果。在麦康凯培养基上培养12h左右，呈现粉红色的，圆形隆起、光滑湿润、边缘整齐的菌落。选择单菌落挑起进行下一步的微生物质谱仪鉴定。图3E.coli在麦康凯培养基上的生长表现Fig.3GrowthcharacteristicsofE.colionMacconkeymedium3.2E.coli的鉴定采取微生物质谱仪的自动检定系统（布鲁克IVDMALDIBiotyper）对疑似菌落进行鉴定，结果是以报告表格的形式输出。得分大于2.0可以得到可靠的种属水平鉴定结果。如图4所示，是部分的鉴定结果。图中显示的5个被检样品得分均大于2.0，结果可靠。其中A2，A3，A5鉴定结果是E.coli，A1与A4是非E.coli。图4微生物质谱仪鉴定部分结果Fig.4TheidentificationresultsverifiedbyIVDMALDIBiotyper
【参考文献】：
期刊论文
[1]细菌耐药耐受性机制的最新研究进展[J]. 李昕,曾洁,王岱,薛云新,赵西林. 中国抗生素杂志. 2020(02)
[2]鸡源大肠杆菌分离鉴定及ESBLs与AmpC酶基因型检测及耐药性分析[J]. 马馨,刘一飞,王志宇,任彬琳,陈泽,杜彬,张菁. 中国畜牧兽医. 2019(09)
[3]山东地区鸡源大肠杆菌中超广谱β-内酰胺酶和磷霉素耐药基因的流行性研究[J]. 王志浩,颜硕,王昱璎,刘宝涛. 中国兽医杂志. 2019(07)
[4]北京地区健康鸭肠道大肠杆菌血清型鉴定和耐药性分析[J]. 刘砚涵,张建伟,林嘉宝,宫晓玮,夏兆飞. 中国家禽. 2019(12)
[5]唐山和秦皇岛地区肉鸡源致病性大肠杆菌耐药性与耐药基因的检测[J]. 李蕴玉,葛成,焦贺静,张香斋,贾青辉,李佩国,张建文,张召兴. 黑龙江畜牧兽医. 2019(12)
[6]重庆地区鸡源大肠杆菌、沙门氏杆菌耐药性的测定与分析[J]. 陈春林,冯刚,秦杨,付利芝. 黑龙江畜牧兽医. 2019(12)
[7]山东地区鸡源致病性大肠杆菌的相关基因检测及药敏试验[J]. 张子越,赵鲁,赵巧雅,王雷,齐霖,彭燕,商敏,许蔷,路晓,吴静. 家禽科学. 2019(06)
[8]泰安渿河中产ESBLs大肠杆菌耐药性及耐药基因的传递规律[J]. 衣首静,刘青霄,蒋智宇,孙淑红. 微生物学报. 2019(11)
[9]畜禽粪污源抗生素及耐药基因在环境中的归趋[J]. 黄荣才,高胜涛,范士杰,马露,卜登攀. 生物技术进展. 2019(02)
[10]潍坊某鸡场大肠杆菌耐药性及血清型检测[J]. 王佳,于杰,邹玲,刘文华,张灿,任慧英. 黑龙江畜牧兽医. 2018(22)
博士论文
[1]抗生素及其耐药性在畜禽粪便-土壤-蔬菜中的传播和转移[D]. 张昊.河南师范大学 2018
[2]我国肉鸡产业高致病性禽流感影响与防控的经济研究[D]. 黄泽颖.中国农业科学院 2016
[3]牦牛、牧民源大肠杆菌分离鉴定、耐药基因检测、PFGE分析及耐药性传递的研究[D]. 羊云飞.四川农业大学 2011
[4]禽致病性大肠杆菌DE205B黏附及侵袭相关因子的致病作用[D]. 王少辉.南京农业大学 2011
硕士论文
[1]家庭式养殖地区多环境介质中携带mcr-1大肠埃希菌的流行特征[D]. 姬祥.山东大学 2019
[2]鲁西南地区畜禽大肠杆菌mcr-1耐药基因携带情况调查[D]. 郑常委.山东农业大学 2019
[3]多重耐药肺炎克雷伯菌KP1276的耐药性与水平转移的机制研究[D]. 祝力骋.浙江大学 2019
[4]山东商品鸡养殖、屠宰、销售环节中细菌耐药性传播规律研究[D]. 张利锋.中国疾病预防控制中心 2016
[5]山东部分地区肉鸡大肠杆菌病耐药性检测及临床治疗研究[D]. 樊爱丽.吉林大学 2015
[6]泰安地区肉鸡大肠杆菌病病原血清型鉴定及药敏试验[D]. 赵启会.山东农业大学 2015
[7]泰安地区鸡源大肠杆菌的分离鉴定与耐药性分析[D]. 宿志民.山东农业大学 2015
本文编号：3260279
【文章来源】：山东农业大学山东省
【文章页数】：74 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
大肠杆菌造成的肝周炎、心包炎Fig.1PerihepatitisandpericarditiscausedbyE.coli
山东农业大学硕士专业学位论文152材料与方法2.1材料2.1.1样本采集山东省位于中国东部沿海、黄河下游，总面积15.7万平方公里，辖16个地级市。本次研究选择了泰安（Farm1），临沂（Farm2），聊城（Farm3），潍坊（Farm4），滨州（Farm5）菏泽（Farm6）六个常规肉鸡养殖场（见图2）进行E.coli流行情况调查。所有被调查的的鸡群的养殖周期约为40天。Farm1至Farm6从每个养鸡场中随机选择两个鸡舍，在养殖周期的三个时间点（雏鸡孵化后的1至2天，17至20日龄和35至40日龄）进行采样(采样点背景资料见附表1)。从2019年5月至7月，在Farm1、Farm2、Farm3、Farm4、Farm5和Farm6六个养鸡场共采集了近700多份样本。在每次采样过程中，每栋鸡舍随机选取20只鸡，用棉签采集肛门拭子样本；从4处不同的地点采集4份粪便样本（约0.5g），分别置于2ml无菌离心管中；随机选取两处投水器，用2ml无菌离心管收集2个饮用水样本；用棉签拭子采取2处墙表面样本；鸡舍内外各两处放置LB平板，敞口放置15min左右采集空气中细菌样本。所有棉签提前用液体LB浸湿灭菌，离心管灭菌。各种棉签拭子样本置于2ml离心管中存放。所有采样后的样品在到达实验室处理之前放置于4℃保温箱内。图2山东省内采样点的分布情况Fig.2distributionofsamplingpointsinShandongProvince
山东农业大学硕士专业学位论文213结果与分析3.1E.coli的初步筛选如图3所示，是某一疑似E.coli的菌落，经反复划线纯化后的结果。在麦康凯培养基上培养12h左右，呈现粉红色的，圆形隆起、光滑湿润、边缘整齐的菌落。选择单菌落挑起进行下一步的微生物质谱仪鉴定。图3E.coli在麦康凯培养基上的生长表现Fig.3GrowthcharacteristicsofE.colionMacconkeymedium3.2E.coli的鉴定采取微生物质谱仪的自动检定系统（布鲁克IVDMALDIBiotyper）对疑似菌落进行鉴定，结果是以报告表格的形式输出。得分大于2.0可以得到可靠的种属水平鉴定结果。如图4所示，是部分的鉴定结果。图中显示的5个被检样品得分均大于2.0，结果可靠。其中A2，A3，A5鉴定结果是E.coli，A1与A4是非E.coli。图4微生物质谱仪鉴定部分结果Fig.4TheidentificationresultsverifiedbyIVDMALDIBiotyper
【参考文献】：
期刊论文
[1]细菌耐药耐受性机制的最新研究进展[J]. 李昕,曾洁,王岱,薛云新,赵西林. 中国抗生素杂志. 2020(02)
[2]鸡源大肠杆菌分离鉴定及ESBLs与AmpC酶基因型检测及耐药性分析[J]. 马馨,刘一飞,王志宇,任彬琳,陈泽,杜彬,张菁. 中国畜牧兽医. 2019(09)
[3]山东地区鸡源大肠杆菌中超广谱β-内酰胺酶和磷霉素耐药基因的流行性研究[J]. 王志浩,颜硕,王昱璎,刘宝涛. 中国兽医杂志. 2019(07)
[4]北京地区健康鸭肠道大肠杆菌血清型鉴定和耐药性分析[J]. 刘砚涵,张建伟,林嘉宝,宫晓玮,夏兆飞. 中国家禽. 2019(12)
[5]唐山和秦皇岛地区肉鸡源致病性大肠杆菌耐药性与耐药基因的检测[J]. 李蕴玉,葛成,焦贺静,张香斋,贾青辉,李佩国,张建文,张召兴. 黑龙江畜牧兽医. 2019(12)
[6]重庆地区鸡源大肠杆菌、沙门氏杆菌耐药性的测定与分析[J]. 陈春林,冯刚,秦杨,付利芝. 黑龙江畜牧兽医. 2019(12)
[7]山东地区鸡源致病性大肠杆菌的相关基因检测及药敏试验[J]. 张子越,赵鲁,赵巧雅,王雷,齐霖,彭燕,商敏,许蔷,路晓,吴静. 家禽科学. 2019(06)
[8]泰安渿河中产ESBLs大肠杆菌耐药性及耐药基因的传递规律[J]. 衣首静,刘青霄,蒋智宇,孙淑红. 微生物学报. 2019(11)
[9]畜禽粪污源抗生素及耐药基因在环境中的归趋[J]. 黄荣才,高胜涛,范士杰,马露,卜登攀. 生物技术进展. 2019(02)
[10]潍坊某鸡场大肠杆菌耐药性及血清型检测[J]. 王佳,于杰,邹玲,刘文华,张灿,任慧英. 黑龙江畜牧兽医. 2018(22)
博士论文
[1]抗生素及其耐药性在畜禽粪便-土壤-蔬菜中的传播和转移[D]. 张昊.河南师范大学 2018
[2]我国肉鸡产业高致病性禽流感影响与防控的经济研究[D]. 黄泽颖.中国农业科学院 2016
[3]牦牛、牧民源大肠杆菌分离鉴定、耐药基因检测、PFGE分析及耐药性传递的研究[D]. 羊云飞.四川农业大学 2011
[4]禽致病性大肠杆菌DE205B黏附及侵袭相关因子的致病作用[D]. 王少辉.南京农业大学 2011
硕士论文
[1]家庭式养殖地区多环境介质中携带mcr-1大肠埃希菌的流行特征[D]. 姬祥.山东大学 2019
[2]鲁西南地区畜禽大肠杆菌mcr-1耐药基因携带情况调查[D]. 郑常委.山东农业大学 2019
[3]多重耐药肺炎克雷伯菌KP1276的耐药性与水平转移的机制研究[D]. 祝力骋.浙江大学 2019
[4]山东商品鸡养殖、屠宰、销售环节中细菌耐药性传播规律研究[D]. 张利锋.中国疾病预防控制中心 2016
[5]山东部分地区肉鸡大肠杆菌病耐药性检测及临床治疗研究[D]. 樊爱丽.吉林大学 2015
[6]泰安地区肉鸡大肠杆菌病病原血清型鉴定及药敏试验[D]. 赵启会.山东农业大学 2015
[7]泰安地区鸡源大肠杆菌的分离鉴定与耐药性分析[D]. 宿志民.山东农业大学 2015
本文编号：3260279
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