转MYB家族基因水稻卷叶株系的筛选与鉴定

发布时间：2021-07-02 09:07

　　叶片是水稻进行光合作用的主要场所,水稻卷叶可以使叶片更直立从而增加群体透光率。卷叶被认为是水稻理想株型育种中重要的一环,挖掘卷叶基因并将卷叶性状引进到优良的水稻品种中可以进一步提高水稻的产量。本研究的主要内容是通过农杆菌转化法将玉米MYB家族基因导入水稻品种日本晴中,筛选稳定遗传卷叶性状的转基因水稻。通过细胞学和分子生物学技术进行鉴定并对T₁代水稻的农艺性状进行调查,最后利用定量PCR技术对卷叶相关基因进行表达量分析。具体研究结果如下:1.利用GATEWAY克隆技术构建了41个玉米MYB家族转录因子基因的过表达载体,经PCR检测和测序验证表明载体构建成功。2.利用农杆菌转化法将41个MYB家族基因转入水稻愈伤组织,通过植物组织培养技术共获得水稻652株,平均每个基因16株。3.将转基因水稻移栽至大田,经过两代筛选我们发现编号为AC270的转基因植株表现为稳定且显性遗传卷叶性状,经过序列鉴定确定其为基因MYBR96的过表达植株。4.通过石蜡切片细胞学检测发现AC270卷叶植株泡状细胞数量较野生型植株有所减少。5.对AC270卷叶植株农艺性状进行调查,结果显示:卷叶植... 

【文章来源】：河北科技大学河北省

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

MYB家族的结构与分类[59]

7第2章载体构建2.1实验材料与仪器2.1.1实验材料（1）GATEWAY目标载体见图2-1，由中国农业科学院生物技术研究所作物高光效功能基因组提供。（2）目的基因入门载体，由中国农业科学院作物高光效功能基因组提供。所有目的基因均为玉米MYB转录因子家族成员，共41个，基因详情见表2-1。（3）大肠杆菌DH5α，由北京全式金生物技术有限公司购买。图2-1GATEWAY目标载体示意图表2-1本实验目的基因家族名基因ID大田编号MYB52LOC103625936AC20MYB59LOC103629226AC21MYBR21LOC100191782AC25MYB44LOC100193529AC28

132.3结果与分析2.3.1家族进化分析为了解本实验中41个MYB家族成员之间的亲缘关系，对它们的核酸序列进行比对见图2-2，并构建了系统进化树见图2-3。由图可以看出，进化树主要将1R-MYB基因聚于一个亚类，其它MYB基因聚于另一亚类。但偶尔也有1R-MYB基因聚到其它MYB基因亚类当中，如：MYBR41和MYBR57。图2-2MYB家族成员序列比对部分结果注：标红基因为本实验最终筛选得到的卷叶基因MYBR96图2-3MYB家族基因进化树

【参考文献】：
期刊论文
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博士论文
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本文编号：3260176