解淀粉芽孢杆菌SDTB009的分离鉴定及其对番茄枯萎病的防治研究
发布时间：2021-08-12 06:16
我国是世界上番茄种植面积和产量最大的国家。近年来,番茄土传病害日益严重,已成为制约番茄生产的重要因素,番茄枯萎病是其中最为典型、最难防治、最为普遍的病害之一。常用的防控手段包括改良农业措施、物理方法、施用化学药剂等,防治效果皆不理想。生防芽孢杆菌因其能够产生抑制病原菌的脂肽物质,芽孢杆菌能够产生环境适应能力较强的芽孢,芽孢可以在多种较为恶劣的环境下存在并发挥作用,以及芽孢杆菌具有多种不同的作用方式,成为生物防治策略中非常重要的一部分。本试验从健康的番茄植株根际土中筛选分离得到一株对番茄枯萎病病原菌有较强生防活性的解淀粉芽孢杆菌菌株SDTB009,通过活性鉴定,各项生理生化指标鉴定,分子生物学鉴定,使用透射电子显微镜观察其微观形态,对其分类地位明确到了种属。测定得到SDTB009不同浓度的发酵液的抑菌活性,以及SDTB009发酵液的温室、田间生防效果,评价了SDTB009与化学药剂联合施用的防治效果。同时,还对SDTB009产生的脂肽物质进行了分离、纯化、鉴定,初步明确了其防治番茄枯萎病的生防机制,为生物防治、降低目标化学药剂的用量,保障番茄产业能够可持续发展,提供一定的理论依据。主要试...
【文章来源】：山东农业大学山东省
【文章页数】：58 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
SDTB009与实验室前期分离得到的多种病原菌进行对峙培养番茄青枯病烟草黑胫病黄瓜灰霉病
解淀粉芽孢杆菌SDTB009的分离鉴定及其对番茄枯萎病的防治研究22图2生防菌株SDTB009及脂肽粗提物对尖孢镰刀菌番茄专化型的平板抑制作用Figure2PlateinhibitionofbiocontrolstrainSDTB009andcrudelipopeptideonFusariumoxysporumtomatospecialization图A为使用对峙培养法测定抑制效果，图B牛津杯中为200uL脂肽物质抽提液。图A、B为尖孢镰刀菌生长7d后抑制作用。图C为空白对照。3.2SDTB009菌株的鉴定及其生理生化特性SDTB009菌落最初在LB平板上表现出光滑的表面，但几天后，菌落的表面变得干燥、起皱。菌落呈乳白色和凸起，具有规则的边缘（图3）。通过JEM1400Plus透射电子显微镜观察菌株SDTB009的形态（图4），从图4中观察可发现，菌株SDTB009呈圆柱状，具有较厚的荚膜，周生鞭毛，菌体较厚，电子束不易打透，无法形成透明清晰的内部图片。生物化学和生理学特征示于表中（表2）。解淀粉芽孢杆菌SDTB009为革兰氏阳性菌株，可以水解淀粉（图5）且不能单一利用甲醇生长。16SrDNA系统发育树显示菌株SDTB009与解淀粉芽孢杆菌（GenBank登录号MG264882）聚类到同一分支（图4）。基于gyrB基因序列分析，菌株解淀粉芽孢杆菌SDTB009显示出与解淀粉芽孢杆菌（GenBank登录号JN086142）聚类在同一分支（图5）。总之，基于上述形态学，生物化学和分子表征，菌株SDTB009被鉴定为解淀粉芽孢杆菌。图3SDTB009平板划线形态Figure3SDTB009platescribepatternABC
解淀粉芽孢杆菌SDTB009的分离鉴定及其对番茄枯萎病的防治研究22图2生防菌株SDTB009及脂肽粗提物对尖孢镰刀菌番茄专化型的平板抑制作用Figure2PlateinhibitionofbiocontrolstrainSDTB009andcrudelipopeptideonFusariumoxysporumtomatospecialization图A为使用对峙培养法测定抑制效果，图B牛津杯中为200uL脂肽物质抽提液。图A、B为尖孢镰刀菌生长7d后抑制作用。图C为空白对照。3.2SDTB009菌株的鉴定及其生理生化特性SDTB009菌落最初在LB平板上表现出光滑的表面，但几天后，菌落的表面变得干燥、起皱。菌落呈乳白色和凸起，具有规则的边缘（图3）。通过JEM1400Plus透射电子显微镜观察菌株SDTB009的形态（图4），从图4中观察可发现，菌株SDTB009呈圆柱状，具有较厚的荚膜，周生鞭毛，菌体较厚，电子束不易打透，无法形成透明清晰的内部图片。生物化学和生理学特征示于表中（表2）。解淀粉芽孢杆菌SDTB009为革兰氏阳性菌株，可以水解淀粉（图5）且不能单一利用甲醇生长。16SrDNA系统发育树显示菌株SDTB009与解淀粉芽孢杆菌（GenBank登录号MG264882）聚类到同一分支（图4）。基于gyrB基因序列分析，菌株解淀粉芽孢杆菌SDTB009显示出与解淀粉芽孢杆菌（GenBank登录号JN086142）聚类在同一分支（图5）。总之，基于上述形态学，生物化学和分子表征，菌株SDTB009被鉴定为解淀粉芽孢杆菌。图3SDTB009平板划线形态Figure3SDTB009platescribepatternABC
本文编号：3337759
【文章来源】：山东农业大学山东省
【文章页数】：58 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
SDTB009与实验室前期分离得到的多种病原菌进行对峙培养番茄青枯病烟草黑胫病黄瓜灰霉病
解淀粉芽孢杆菌SDTB009的分离鉴定及其对番茄枯萎病的防治研究22图2生防菌株SDTB009及脂肽粗提物对尖孢镰刀菌番茄专化型的平板抑制作用Figure2PlateinhibitionofbiocontrolstrainSDTB009andcrudelipopeptideonFusariumoxysporumtomatospecialization图A为使用对峙培养法测定抑制效果，图B牛津杯中为200uL脂肽物质抽提液。图A、B为尖孢镰刀菌生长7d后抑制作用。图C为空白对照。3.2SDTB009菌株的鉴定及其生理生化特性SDTB009菌落最初在LB平板上表现出光滑的表面，但几天后，菌落的表面变得干燥、起皱。菌落呈乳白色和凸起，具有规则的边缘（图3）。通过JEM1400Plus透射电子显微镜观察菌株SDTB009的形态（图4），从图4中观察可发现，菌株SDTB009呈圆柱状，具有较厚的荚膜，周生鞭毛，菌体较厚，电子束不易打透，无法形成透明清晰的内部图片。生物化学和生理学特征示于表中（表2）。解淀粉芽孢杆菌SDTB009为革兰氏阳性菌株，可以水解淀粉（图5）且不能单一利用甲醇生长。16SrDNA系统发育树显示菌株SDTB009与解淀粉芽孢杆菌（GenBank登录号MG264882）聚类到同一分支（图4）。基于gyrB基因序列分析，菌株解淀粉芽孢杆菌SDTB009显示出与解淀粉芽孢杆菌（GenBank登录号JN086142）聚类在同一分支（图5）。总之，基于上述形态学，生物化学和分子表征，菌株SDTB009被鉴定为解淀粉芽孢杆菌。图3SDTB009平板划线形态Figure3SDTB009platescribepatternABC
解淀粉芽孢杆菌SDTB009的分离鉴定及其对番茄枯萎病的防治研究22图2生防菌株SDTB009及脂肽粗提物对尖孢镰刀菌番茄专化型的平板抑制作用Figure2PlateinhibitionofbiocontrolstrainSDTB009andcrudelipopeptideonFusariumoxysporumtomatospecialization图A为使用对峙培养法测定抑制效果，图B牛津杯中为200uL脂肽物质抽提液。图A、B为尖孢镰刀菌生长7d后抑制作用。图C为空白对照。3.2SDTB009菌株的鉴定及其生理生化特性SDTB009菌落最初在LB平板上表现出光滑的表面，但几天后，菌落的表面变得干燥、起皱。菌落呈乳白色和凸起，具有规则的边缘（图3）。通过JEM1400Plus透射电子显微镜观察菌株SDTB009的形态（图4），从图4中观察可发现，菌株SDTB009呈圆柱状，具有较厚的荚膜，周生鞭毛，菌体较厚，电子束不易打透，无法形成透明清晰的内部图片。生物化学和生理学特征示于表中（表2）。解淀粉芽孢杆菌SDTB009为革兰氏阳性菌株，可以水解淀粉（图5）且不能单一利用甲醇生长。16SrDNA系统发育树显示菌株SDTB009与解淀粉芽孢杆菌（GenBank登录号MG264882）聚类到同一分支（图4）。基于gyrB基因序列分析，菌株解淀粉芽孢杆菌SDTB009显示出与解淀粉芽孢杆菌（GenBank登录号JN086142）聚类在同一分支（图5）。总之，基于上述形态学，生物化学和分子表征，菌株SDTB009被鉴定为解淀粉芽孢杆菌。图3SDTB009平板划线形态Figure3SDTB009platescribepatternABC
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