狂犬病病毒粒子的蛋白质组及与N和P蛋白互作宿主蛋白的鉴定
发布时间:2023-06-02 02:11
狂犬病是一种严重侵害大脑中枢神经的重要人兽共患传染病,是由狂犬病病毒所引起的,可感染所有的温血动物并引起致死性的脑脊髓炎,其病死率高达100%。据WHO报道全世界每年近6万人死于狂犬病,而这主要发生在发展中国家,其中亚洲和非洲占绝大多数。我国是狂犬病高发地区,近几年因狂犬病发病死亡的人数每年都高达数千人,且还有上升的趋势,我国狂犬病发病和死亡人数已居世界第二位,仅次于印度。因此,预防和治疗狂犬病的任务迫在眉睫且十分艰巨。狂犬病病毒是一个具有囊膜的不分节段的单股负链RNA病毒,是弹状病毒科狂犬病病毒属成员,主要编码核蛋白(N),磷蛋白(P),基质蛋白(M),糖蛋白(G)和聚合酶蛋白(L)等五个结构蛋白。病毒粒子呈子弹状,外部为脂质双层囊膜,其表面含G蛋白纤突,主要参与介导细胞膜融合、受体结合以及诱导宿主产生中和抗体,此外还与病毒毒力及致病性有关。M蛋白位于病毒囊膜内侧,可将核衣壳和囊膜连接起来,主要参与子代病毒的装配和出芽及病毒形态的形成。内部包裹由N蛋白、P蛋白、L蛋白及病毒基因组RNA组成的核衣壳,即核糖核蛋白复合物(RNP),作为狂犬病病毒转录与复制的模板。N蛋白主要与狂犬病病毒的...
【文章页数】:81 页
【学位级别】:硕士
【文章目录】:
缩略词
摘要
Abstract
前言
第一章 狂犬病病毒粒子的蛋白质组学分析
1 实验材料
1.1 细胞、病毒
1.2 主要试剂及配制
1.3 主要仪器
2 实验方法
2.1 狂犬病病毒的培养与纯化
2.2 狂犬病病毒粒子的鉴定
2.3 狂犬病病毒粒子的质谱分析
2.4 狂犬病病毒粒子上宿主蛋白的鉴定
3 实验结果
3.1 病毒粒子的纯化与鉴定
3.2 病毒粒子的质谱分析
3.3 病毒粒子上宿主蛋白的验证
4 小结与讨论
第二章 狂犬病病毒N和P蛋白互作宿主蛋白的鉴定
1 实验材料
1.1 质粒载体
1.2 菌株
1.3 细胞、病毒
1.4 主要试剂及配制
1.5 主要仪器
2 实验方法
2.1 狂犬病病毒P蛋白多克隆抗体的制备
2.2 狂犬病病毒N和P蛋白稳定细胞系的筛选
2.3 TAP法筛选与狂犬病病毒N和P互作宿主蛋白
3 实验结果
3.1 P蛋白多克隆抗体的鉴定
3.2 N和P蛋白稳定细胞系的鉴定
3.3 N和P蛋白互作宿主蛋白的鉴定
4 小结与讨论
结论
参考文献
附录
文献综述
参考文献
研究论文
个人简历
致谢
本文编号:3827464
【文章页数】:81 页
【学位级别】:硕士
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缩略词
摘要
Abstract
前言
第一章 狂犬病病毒粒子的蛋白质组学分析
1 实验材料
1.1 细胞、病毒
1.2 主要试剂及配制
1.3 主要仪器
2 实验方法
2.1 狂犬病病毒的培养与纯化
2.2 狂犬病病毒粒子的鉴定
2.3 狂犬病病毒粒子的质谱分析
2.4 狂犬病病毒粒子上宿主蛋白的鉴定
3 实验结果
3.1 病毒粒子的纯化与鉴定
3.2 病毒粒子的质谱分析
3.3 病毒粒子上宿主蛋白的验证
4 小结与讨论
第二章 狂犬病病毒N和P蛋白互作宿主蛋白的鉴定
1 实验材料
1.1 质粒载体
1.2 菌株
1.3 细胞、病毒
1.4 主要试剂及配制
1.5 主要仪器
2 实验方法
2.1 狂犬病病毒P蛋白多克隆抗体的制备
2.2 狂犬病病毒N和P蛋白稳定细胞系的筛选
2.3 TAP法筛选与狂犬病病毒N和P互作宿主蛋白
3 实验结果
3.1 P蛋白多克隆抗体的鉴定
3.2 N和P蛋白稳定细胞系的鉴定
3.3 N和P蛋白互作宿主蛋白的鉴定
4 小结与讨论
结论
参考文献
附录
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研究论文
个人简历
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本文编号:3827464
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