玉米孤雌生殖单倍体胚遗传转化体系建立的初步研究

发布时间：2024-10-03 00:51

　　本研究将玉米孤雌生殖单倍体胚作为外植体,在二倍体胚的遗传再生与转化条件的基础上对部分条件进行优化,成功摸索出单倍体幼胚培养中的倍性鉴定方法,成功获得了单倍体再生植株和转基因阳性植株,初步建立了孤雌生殖单倍体幼胚遗传再生体系和转化体系;与此同时,利用单倍体成熟胚作为受体进行遗传转化,不经成熟胚较为困难的脱分化过程而直接再生为单倍体植株。本研究探索了一套新的转基因方法,为单倍体育种的应用提供了一个新的可能和方向。同时,本研究还对转基因过程中单倍体、二倍体与杂合体之间的亚细胞结构差异进行了比较分析,为单倍体遗传转化体系的建立提供了一定的理论支持。具体地,本研究得到如下结果：(1)本实验以玉米孤雌生殖诱导系EDI为父本,18-599R为母本杂交诱导单倍体,利用诱导系标记基因的特性对幼胚诱导后的愈伤组织进行光照条件的筛选,发现杂合个体的愈伤组织呈现出紫色,而单倍体个体的愈伤组织仍为黄色,且光照方式对筛选单倍体个体的效果不显著,而光照时间间的差异达到了极显著水平,其中20 h、40 h下可成功分离筛选出单倍体愈伤组织。但由于40 h水平下,愈伤组织出现了变绿,由朝分化方向发展的趋势,不利于后期实验的...

【文章页数】：64 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
一、研究背景
    1 玉米单倍体育种的研究进展
        1.1 孤雌生殖单倍体产生的遗传和生物学机制
        1.2 植物单倍体加倍机制
        1.3 玉米单倍体应用前景展望
    2 玉米单倍体转基因育种研究前景
        2.1 单倍体转基因受体的选择
        2.2 单倍体转基因受体系统建立的影响因素
        2.3 玉米单倍体转基因育种前景展望
    3 研究的目的意义
二、材料与方法
    1 实验材料
        1.1 供试玉米材料
        1.2 培养基及重要试剂配方
        1.3 分子实验材料与试剂
        1.4 主要仪器与设备
    2 实验方法
        2.1 技术路线
        2.2 实验方法
三、结果与分析
    1 18-599R×EDI单倍体幼胚遗传再生体系的建立
        1.1 幼胚诱导愈伤组织情况
        1.2 愈伤组织倍性的鉴定
        1.3 分化条件优化结果
        1.4 单倍体植株的统计、双单倍体材料的获得与杂合体种子的加代
        1.5 单倍体幼胚遗传再生过程中的异常现象
    2 18-599R×EDI单倍体幼胚遗传转化体系的建立
    3 Hi Ⅱ×EDI单倍体成熟胚遗传转化体系的建立
    4 不同倍性玉米愈伤组织亚细胞结构差异分析
四、讨论与结论
    1 讨论
        1.1 单倍体诱导亲本材料的选择
        1.2 单倍体转基因受体材料的选择
        1.3 单倍体材料鉴定方法的选择
        1.4 影响单倍体遗传转化效率的重要阶段
        1.5 自然加倍对单倍体遗传转化的影响
        1.6 单倍体自身细胞结构的差异对遗传转化影响
        1.7 单倍体幼胚遗传转化体系的改进
    2 结论
    3 小结
参考文献
致谢
附录



本文编号：4006561