抗菌肽brevilaterin与柠檬酸联用对大肠杆菌的协同抑菌机理

发布时间：2024-02-20 04:21

　　以食源性致病菌大肠杆菌为指示菌,研究抗菌肽brevilaterin与柠檬酸的协同抑菌效应和机理,为抗菌肽和柠檬酸应用于大肠杆菌的控制提供理论依据。利用DiSC₃(5)荧光探针考察brevilaterin与柠檬酸对大肠杆菌细胞膜电势的影响,结果表明两者单独使用均能消散大肠杆菌的跨膜电势,两者联用呈现协同消散效果;通过碘化丙啶/SYTO 9探针标记结合流式细胞术考察brevilaterin与柠檬酸对细胞膜完整性的影响,结果表明brevilaterin与柠檬酸均会破坏细胞膜完整性;利用透射电子显微镜观察大肠杆菌超微结构的变化,结果发现brevilaterin和柠檬酸联用组对菌体超微结构呈现协同破坏作用,即细胞产生变形、发生质壁分离与内容物泄漏等;十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳结果显示brevilaterin、柠檬酸对大肠杆菌的蛋白质合成没有明显影响;琼脂糖凝胶电泳表明brevilaterin与柠檬酸可以降解大肠杆菌菌体DNA,两者联用呈现协同降解作用。综上,brevilaterin与柠檬酸可通过破环细胞膜的完整性与降解菌体DNA以发挥协同抑制大肠杆菌的作用。

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【部分图文】：

图1brevilaterin与柠檬酸联用对大肠杆菌的时间-杀菌曲线

通过时间-杀菌曲线研究了brevilaterin与柠檬酸联用组合的抑菌动力学，从图1可以看出，brevilaterin、柠檬酸的MIC组和联用组brevilaterin(1/4MIC）+柠檬酸（1/4MIC）在24h内均呈现抑菌效果，且联用组较brevilaterin(1/....

图2brevilaterin与柠檬酸联用对大肠杆菌细胞跨膜电势的影响

DiSC3(5)是一种膜电位敏感染料，能够在完整的极化细胞膜中累积，处于自猝灭状态；当膜电位被破坏时，染料被释放到介质中，DiSC3(5)荧光强度增加[18-19]。因此采用DiSC3(5)考察大肠杆菌细胞膜电势的变化。如图2所示，阴性对照组（Nig）、空白对照组荧光强....

图4brevilaterin与柠檬酸联用对大肠杆菌细胞膜完整性影响的荧光显微图

从图4可以观察到，未经抑菌剂处理的对照组细胞仅被SYTO9染色，发出绿色荧光，表明细胞膜完整，而经过brevilaterin(1/4MIC）组处理后，60%以上细胞发出红色荧光；经过brevilaterin(MIC）组处理后，几乎所有细胞都发出橙红色荧光。经过柠檬酸（1/4....

图5brevilaterin与柠檬酸联用对大肠杆菌超微结构影响的TEM图

通过TEM观察brevilaterin与柠檬酸对大肠杆菌菌体形态变化的影响，结果如图5所示，空白对照组菌体形态完好、内容物完整；brevilaterin(MIC）组的细胞发生形变、质壁分离、细胞内容物泄漏等变化[23]；柠檬酸（MIC）组细胞膜边缘模糊且细胞内容物泄漏，表明bre....

本文编号：3903833