碘量法快速筛查多种β-内酰胺酶抑制剂

发布时间：2024-05-19 17:46

　　旨在建立一种碘量法,用于对多种β-内酰胺酶抑制剂的快速筛查。以舒巴坦为基准药物,采用全波长扫描确定最佳测定波长,棋盘滴定法及单因素实验确定最佳工作条件,绘制舒巴坦标准曲线,通过测定药物的交叉反应率,考察了该方法对4种常见β-内酰胺酶抑制剂的检测灵敏度。结果显示,最佳工作条件为测定波长585 nm、青霉素酶浓度1.0×10⁴ U/mL、青霉素G钾浓度0.2 g/L、碘液浓度0.3 g/L、淀粉浓度1%、反应pH6.0、反应温度37 ℃、孵育时间20 min、催化时间30 min;对舒巴坦的检出限(LOD,IC₁₀)为410.13 μg/kg,半抑制浓度(IC₅₀)为2522.08 μg/kg,线性范围(IC₂₀～IC₈₀)为801.79～7933.30 μg/kg;对克拉维酸、他唑巴坦、阿维巴坦的交叉反应率分别为454.17%、574.30%、2319.79%,检出限分别为224.64、67.56、42.86 μg/kg。该研究提供了碘量法检测β-内酰胺酶抑制剂体系的优化方法,可...

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【部分图文】：

图14种常用β-内酰胺酶抑制剂化学结构式

目前,我国仅出台了进出口动物源食品中克拉维酸残留的检测方法(LC-MS/MS)[6],但其他β-内酰胺酶抑制剂的标准检测方法尚未出台。目前,对于β-内酰胺酶抑制剂的检测,主要集中于临床医疗、药物筛查以及食品安全领域的检测,检测方法主要为仪器分析法,包括高效液相色谱法(HPLC)、....

图3青霉素酶及青霉素G钾浓度对反应体系的影响

表2不同青霉素酶及青霉素G钾浓度对应的吸光值和补偿率%青霉素酶浓度/(×104U/mL)青霉素G钾浓度/(g/L)0.050.10.150.20.250.3A阴性孔A阳性孔补偿率A阴性孔A阳性孔补偿率A阴性孔A阳性孔补偿率A阴性孔A阳性孔....

图6反应温度对反应体系的影响

很多研究发现,大部分β-内酰胺酶在30～40℃下,催化活性较好[9]。温度影响碘与淀粉的显色,温度过高碘与淀粉无法形成稳定性结合,显色变浅或不显色;当温度低于30℃时,体系正常显色;40～50℃时,显色变浅;超过60℃时,体系不显色[12]。随着温度的升高,青霉素G钾的自....

图7孵育时间对反应体系的影响

实验考察了孵育时间对检测灵敏度的影响,结果见图7。由图7可知,孵育10min时,数据平行性差,曲线拟合度差,相较其他3条曲线,曲线的上、下平台均较高;孵育20、30、40min时,3条曲线较为接近,拟合度好,差别不大。说明孵育时间超过20min,对检测结果贡献不大,为节约检....

本文编号：3978240