慢性应激肝郁脾虚模型大鼠下丘脑弓状核NPY及其受体Y1变化机制研究

发布时间：2017-03-18 13:04

  本文关键词：慢性应激肝郁脾虚模型大鼠下丘脑弓状核NPY及其受体Y1变化机制研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:本研究观察了慢性应激致肝郁脾虚证候模型大鼠下丘脑弓状核(Arcuate nucleus,ARC)中神经肽Y(Neuropeptide Y,简称NPY)及其受体Y1蛋白与基因表达的变化,以此为切入点探索肝郁脾虚证候机体出现情志失和的中枢神经内分泌基础,同时以中药复方逍遥散(《太平惠民和剂局方》)作为干预用药,揭示其疏肝解郁健脾作用机理。方法:通过慢性束缚应激方法建立肝郁脾虚证候大鼠模型,SD大鼠133只,随机分为5组。正常(对照)组:不予束缚,灌服生理盐水;模型7天组:束缚7天,灌服生理盐水;模型21天组:束缚21天,灌服生理盐水;逍遥散7天组:束缚7天,灌服逍遥散混悬液(3.854g/kg/日,按成人平均体重70kg每天用药量换算);逍遥散21天组:束缚21天,同时每天灌服逍遥散混悬液(3.854g/kg/日,按成人平均体重70kg每天用药量换算)。7天组于实验第8天,正常组、21天组于实验第22天取材。观察SD大鼠外观表征,通过综合观测大鼠体重、摄食量、饮水量、行为学等变化,和逍遥散以方测证,评价肝郁脾虚证候大鼠模型的建立。运用免疫荧光染色法、RT-q PCR法,检测大鼠下丘脑ARC中NPY及其受体Y1的表达情况。结果:在模型评价成功的基础上,慢性束缚应激肝郁脾虚大鼠模型组体重、摄食量、饮水量上增加缓慢,外观表现精神萎靡,反应迟钝、皮毛枯黄晦暗、耳廓爪部色泽变淡、大便干湿不调、活动能力下降,而灌服逍遥散组三周后,有所改善(P0.05或P0.01)。用免疫荧光检测、激光共聚焦成像分析结果表明,NPY和受体Y1神经元均被标记为红色荧光,呈细小颗粒状分布广泛。镜下观察,与正常组相比较,模型组大鼠束缚7天和21天末,下丘脑ARC中NPY及其受体Y1阳性表达较正常组降低;与模型组相比较,逍遥散各组大鼠下丘脑ARC中NPY及其受体Y1阳性表达高于模型组,略低于正常组。RT-q PCR结果表明,与正常组相比较,模型组大鼠束缚7天和21天末,下丘脑ARC中NPY m RNA及其受体Y1 m RNA表达较正常组降低(P0.05或P0.01);与模型组相比较,逍遥散各组大鼠下丘脑ARC中NPY及其受体Y1蛋白表达高于模型组(P0.05或P0.01)。结论:慢性应激致肝郁脾虚证候模型大鼠下丘脑ARC中NPY与受体Y1表达均下降,总体变化趋势一致,为肝郁脾虚证候机体所表现的精神萎靡、活动能力下降等肝郁样情绪障碍表现的生物学基础提供实验依据;也可能为中药复方逍遥散疏肝解郁健脾作用的内在机理之一。
【关键词】：慢性应激 动物模型 肝郁脾虚证 下丘脑 NPY 受体Y1
【学位授予单位】：河北医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R259;R-332
【目录】：

• 中文摘要4-6
• 英文摘要6-9
• 英文缩写9-10
• 前言10
• 材料与方法10-20
• 结果20-25
• 附图25-31
• 附表31-38
• 讨论38-40
• 结论40-41
• 参考文献41-45
• 综述45-50
• 参考文献48-50
• 致谢50-51
• 个人简历51

【参考文献】

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1 黄柄山;中医证候与应激反应的关系(续一)[J];黑龙江中医药;2003年04期

2 李涛;赵阳;汪卫东;洪兰;林颖娜;王芳;闫雪;;复发性抑郁障碍发病机制及与肝郁关系探讨[J];中医药导报;2012年05期

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本文编号：254475