人参皂苷Rb1抗小鼠脑及人脐静脉内皮细胞衰老的机制

发布时间：2017-03-18 15:08

  本文关键词：人参皂苷Rb1抗小鼠脑及人脐静脉内皮细胞衰老的机制，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：实验目的随着经济的发展,人们生活水平不断提高,平均寿命增加,老龄化成为世界性趋势。衰老成为许多疾病的主要危险因素,如心血管疾病、癌症、神经退行性疾病等,严重危害健康,影响生活质量,所以,研究衰老相关机制,防治衰老相关疾病对人类健康至关重要。现代医学研究发现人参对中枢神经、心血管、消化、免疫、内分泌、泌尿生殖等多系统有广泛的作用,可提高人体力、智力的活动能力,增强机体对有害刺激的非特异性抵抗力。人参皂苷是人参的主要有效成分,现已知人参皂苷单体有40余种,Rb1为其中一种。m TOR(mammalian Target of Rapamycin,m TOR)进化上十分保守,它与衰老密切相关;在自然衰老的动物模型中,m TOR通路失调,过度激活,一些抗衰老干预手段,如饮食限制可以逆转这一变化。我们课题组已经证明,人参皂苷Rb1可以减轻由过氧化氢导致的人脐静脉内皮细胞损伤,其机制包括对抗氧化应激,对抗炎症,调节Sirt1/e NOS/NO轴等。但是人参皂苷Rb1对自然衰老的小鼠脑、复制性衰老的人脐静脉内皮细胞的作用及人参皂苷Rb1与m TOR通路的关系尚不清楚。根据目前研究背景,本研究拟解决以下问题:(1)人参皂苷Rb1是否可以改善小鼠脑自然衰老及人脐静脉内皮细胞复制性衰老;(2)如果人参皂苷Rb1具有上述作用,那这一作用是否与m TOR通路有关?实验方法1.人参皂苷Rb1对自然衰老的小鼠脑的作用:检测丙二醛(MDA)含量、单胺氧化酶-B(MAO-B)活性,western blot方法检测PAI-1、p-m TOR/m TOR、p-p70S6K/p70S6K蛋白表达情况。2.建立人原代脐静脉内皮细胞(HUVEC)复制性衰老模型:通过细胞形态的变化、衰老相关染色(SA-β-gal)阳性率以及血浆纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)蛋白的表达来评估。3.人参皂苷Rb1对复制性衰老HUVECs的影响:通过细胞形态的变化、衰老相关染色(SA-β-gal)阳性率以及PAI-1蛋白及m RNA的表达来评估。4.人参皂苷Rb1对复制性衰老HUVEC中m TOR/p70S6K通路的影响:Western blot方法检测p-m TOR、m TOR、p-p70S6K、p70S6K蛋白的表达。5.人参皂苷Rb1对复制性衰老HUVEC中氧化应激的影响:TBA法检测细胞内丙二醛(MDA)水平,黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶(SOD)活性,Western blot方法检测SOD1蛋白的表达。结果1.与青年小鼠比较,老年对照组小鼠脑中的MDA含量增多,MAO-B活性增加,PAI-1蛋白表达增多,m TOR蛋白及p70S6K蛋白磷酸化水平增加。2.与老年对照组比较,注射Rb1小鼠的脑MAO-B活性,m TOR蛋白及p70S6K蛋白磷酸化水平均降低;此外,注射高剂量(20mg·kg-1·d-1)Rb1组MDA含量、PAI-1蛋白的表达减少。3.CPDL16~26时,人脐静脉内皮细胞复制性衰老模型可成功建立。4.80μmol/L Rb1可以有效的减轻人脐静脉内皮细胞复制性衰老。5.m TOR/p70S6K在复制性衰老HUVECs中表达增加,而人参皂苷Rb1可以有效抑制其增加。6.人参皂苷Rb1可以使衰老的HUVECs中SOD1活性增加,MDA产生减少。结论1.人参皂苷Rb1可以减轻小鼠脑和人脐静脉内皮细胞的衰老;2.人参皂苷Rb1抗小鼠脑和人脐静脉内皮细胞衰老的作用与m TOR/p70S6K通路有关;3.人参皂苷Rb1抗人脐静脉内皮细胞复制性衰老的作用与氧化应激有关。
【关键词】：人参皂苷Rb1 衰老 小鼠脑 人脐静脉内皮细胞 mTOR/p70S6K
【学位授予单位】：中山大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R339.38
【目录】：

• 中文摘要3-6
• Abstract6-9
• 缩略词表9-12
• 第1章 前言12-16
• 第2章 实验材料16-20
• 第3章 实验方法20-31
• 第4章 实验结果31-46
• 第1节 人参皂苷Rb1对小鼠脑自然衰老的作用31-35
• 第2节 人参皂苷Rb1对HUVECs复制性衰老的作用35-42
• 第3节 人参皂苷Rb1抗HUVECs复制性衰老的机制42-46
• 1 人参皂苷Rb1减少复制性衰老HUVECs中mTOR/p70S6K的表达42-44
• 2 人参皂苷Rb1对复制性衰老HUVECs氧化应激的影响44-45
• 3 小结45-46
• 第5章 讨论46-50
• 结论50-51
• 参考文献51-54
• 致谢54-55

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 韩冬;张铁军;唐铖;田成旺;;人参皂苷的药动学研究进展[J];中草药;2009年02期

2 余潇苓;苗青;方翠芬;;人参皂苷水溶液热稳定性研究[J];中国现代应用药学;2011年12期

3 付聪;杨艳芳;王业静;;药典法和新方法测定人参皂苷含量比较[J];亚太传统医药;2013年11期

4 杨雨;郑斯文;金银萍;姚春林;王英平;;人参皂苷的提取分离方法研究进展[J];江苏农业科学;2014年05期

5 于超,刁长发,夏文娟,周碧珍;反相高效液相色谱法测定人参及其制剂中人参皂苷Rg1含量[J];药物分析杂志;2000年04期

6 王启祥,吕修梅,张晋秀;人参皂苷含量变化研究概况[J];西北药学杂志;2002年05期

7 于荣敏,宋永波,张辉,叶文才,张荫麟,姚新生;西洋参冠瘿组织培养及其人参皂苷Re和人参皂苷Rg_1的产生[J];生物工程学报;2003年03期

8 卢新政,张晓文,黄峻,马根山,侯麦花;人参皂苷Rg_1对培养猪骨髓基质细胞增殖的影响[J];中国药理学通报;2003年03期

9 董淑华,陈波,马忠泽,侯秀云,陈英杰;人参皂苷的体内代谢反应研究[J];人参研究;2003年01期

10 朱照静,邓开英;红参中人参皂苷Rg1和人参皂苷Re的含量测定[J];中国实验方剂学杂志;2003年05期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 朱伟;易琼;王鲁;付本懂;贺常亮;吕爽;毕文岩;;人参皂苷Rh2的药理学研究进展[A];中国畜牧兽医学会2010年学术年会——第二届中国兽医临床大会论文集(下册)[C];2010年

2 王悦;白玉;刘虎威;;高效液相色谱法测定人参中人参皂苷的方法[A];全国生物医药色谱学术交流会（2010景德镇）论文集[C];2010年

3 尚文斌;杨颖;姜博仁;金华;周丽斌;刘尚全;陈名道;;人参皂苷Rb1促进3T3L1细胞的脂肪形成和抑制脂肪分解[A];2006年中华医学会糖尿病分会第十次全国糖尿病学术会议论文集[C];2006年

4 周红祖;胡胜全;余惠e

本文编号：254630