不同剂量黄芩苷对子痫前期模型大鼠肝细胞XIAP、Bcl-2和Caspase-9的表达及肝细胞凋亡率的影响

发布时间：2017-03-22 11:06

  本文关键词：不同剂量黄芩苷对子痫前期模型大鼠肝细胞XIAP、Bcl-2和Caspase-9的表达及肝细胞凋亡率的影响，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：子痫前期(pre-eclampsia,PE)是一种常见的妊娠中晚期特发性疾病,其发病机制至今不明。肝脏被认为是子痫前期除了胎盘以外最常受损的器官,主要表现为肝细胞凋亡和血管内皮细胞凋亡的增加。研究表明,子痫前期患者胎盘滋养细胞XIAP、Bcl-2的表达减少,Caspase-9的表达增多,可能与其发病机制有关,但缺乏肝细胞凋亡与其相关机制的研究。黄芩苷(Baicalin)对细菌、病毒、氧化作用、炎症反应、变态反应、肿瘤等有一定的对抗作用。目的:本次研究的目的是探讨不同剂量黄芩苷干预对子痫前期模型大鼠肝脏组织中XIAP、Bcl-2及Caspase-9表达及肝细胞凋亡率的影响。方法:将75只孕鼠随机分为2组:对照组(control group,CG组)15只、子痫前期模型(preeclampsia,PE)组60只;各组孕鼠均在妊娠第13~20天给药,CG组[生理盐水,125 mg/(kg·d)],子痫前期模型组[L-NAME,125 mg/(kg·d)];在妊娠第16天,子痫前期模型组二次随机分组,每组15只:空白对照亚组(Blank control subgroup,BC组)、低剂量黄芩苷干预亚组(Low-dose baicalin intervention subgroup,LB组)、中剂量黄芩苷干预亚组(Medium-dose baicalin intervention subgroup,MB组)和高剂量黄芩苷干预亚组(High--dose baicalin intervention subgroup,HB组)。在妊娠第16天BC组加注生理盐水[0.5ml/d,腹腔注射],LB组、MB组、HB组分别加注黄芩苷[(50,100,150)mg/(kg·d),腹腔注射]。在妊娠第10、13、16、19天检测所有大鼠尾动脉压、24h尿蛋白及观察L-NAME、黄芩苷用药情况。妊娠第21天,在麻醉、无菌条件取肝脏组织。用免疫组化(SABC)方法定位检测各组孕鼠肝脏组织中XIAP、Bcl-2和Caspase-9蛋白定位表达情况,通过SCANSCOBC医学图像分析系统对图片处理进行半定量分析。用TUNEL实验方法检测各组孕鼠肝细胞的凋亡情况。采用SPSS17.0软件对数据进行处理,两独立正态分布样本间比较采用t检验,不同时间点均数比较采用重复测量方差分析,多组间样本均数比较采用F检验和LSD-t检验,α=0.05为检验水准,P0.05为差异有统计学意义。结果:1.妊娠第10天,对照组、子痫前期模型组孕鼠各指标间比较:孕次(均为初产),尾动脉收缩[(109.20±4.51)VS(107.80±5.93)mm Hg,t=1.01,P=0.324],舒张压[(77.47±9.93)VS(78.75±6.80)mm Hg,t=0.59,P=0.557],24h尿蛋白[(6.24±0.27)VS(6.11±0.54)mg/24h,t=0.85,P=0.401],差异均无统计学意义(P0.05);2.妊娠16天(造模3天后),对照组与子痫前期模型组孕鼠各指标间比较:大鼠尾动脉收缩压[(115.20±4.90)VS(135.47±5.43)mm Hg,t=10.72,P0.001]、舒张压[(77.93±7.82)VS(89.40±4.75)mm Hg,t=4.01,P0.001];24h尿蛋白[(6.21±0.28)VS(7.52±0.58)mg/24h,t=7.79,P0.001],差异均有统计学意义(P0.05);3.妊娠第19天(不同剂量组黄芩苷干预后第4天),各组孕鼠检测指标间比较:(1)对照组、空白对照亚组、低剂量黄芩苷干预亚组、中剂量黄芩苷干预亚组、高剂量黄芩苷干预亚组:孕鼠尾动脉收缩压[(118.67±4.95)VS(144.60±5.32)VS(130.13±5.71)VS(122.60±3.91)VS(108.87±17.72)mm Hg,F=43.78,P0.001]、舒张压[(81.60±6.67)VS(90.80±6.42)VS(82.40±7.60)VS(81.33±5.50)VS(75.73±11.54)mm Hg,F=5.12,P0.001]、24h尿蛋白[(6.24±0.26)VS(11.14±0.62)VS(6.91±0.34)VS(7.07±0.28)VS(7.31±1.22)mg/24h,F=42.72,P0.001];差异均有统计学意义(P0.05);(2)(1)各组孕鼠尾动脉收缩压间的比较:与对照组相比,空白对照亚组收缩压显著升高,差异有统计学意义t=7.80,P0.001;与空白对照亚组相比,低、中、高剂量黄芩苷干预亚组收缩压间差异均有统计学意义,t值分别为4.35、6.62、10.75,P值均为0.001;低、中、高剂量黄芩苷干预亚组收缩压间差异有统计学意义:低与中剂量间t=2.27,P=0.027,中与高剂量间t=4.13,P0.001,低与高剂量间t=6.40,P0.001;对照组与中剂量黄芩苷干预亚组收缩压间差异无统计学意义t=1.18,P=0.241;(2)各组孕鼠尾动脉舒张间的比较:与对照组相比,空白对照亚组舒张压显著升高,差异有统计学意义t=3.22,P=0.002;对照组与中剂量黄芩苷干预组舒张压间差异无统计学意义t=0.09,P=0.926;与空白对照亚组相比,低、中、高剂量黄芩苷干预亚组舒张压间差异均有统计学意义,t值分别为2.94、3.31、5.27,P值分别为0.004、0.001、0.001;低、中、高剂量黄芩苷干预亚组舒张压间:低与中剂量间t=0.37,P=0.711,中与高剂量间t=1.96,P=0.054,低与高剂量间t=2.33,P=0.023;(3)各组孕鼠24h尿蛋白的比较:与对照组相比,空白对照亚组24h尿蛋白显著升高差异具有统计学意t=20.53,P0.001;空白对照亚组与低、中、高剂量黄芩苷干预亚组24h尿蛋白差异具有统计学意义,t值分别为17.69、17.05、16.04,P值均为0.001;低、中、高剂量黄芩苷干预亚组间24h尿蛋白无明显差异:低与中剂量间t=0.64,P=0.521,中与高剂量间t=1.00,P=0.321,低与高剂量间t=1.65,P=0.104。4.免疫组织化学(SABC)方法检测XIAP、Bcl-2及Caspase-9、表达的比较:(1)各组间肝细胞中XIAP表达的比较:与对照组相比,空白对照亚组灰度值明显升高,差异有统计学意义t=53.18,P0.001;与空白对照亚组相比,低、中、高剂量黄芩苷干预亚组灰度值表达明显减少,差异具有统计学意义,t值分别为23.27、33.28、43.59,P值均为0.001;低、中、高剂量黄芩苷干预组间差异均有统计学意义:低与中剂量间t=10.02,P0.001,中与高剂量组间t=10.30,P0.001,低与高剂量间t=20.32,P0.001。(2)各组间肝细胞中Bcl-2表达水平的比较:与对照组相比,空白对照亚组灰度值明显升高,差异有统计学意义t=22.31,P0.001;与空白对照亚组相比,低、中、高剂量黄芩苷干预组灰度值表达明显减少,差异具有统计学意义,t值分别为4.33、7.69、12.61,P值均为0.001;且低、中、高剂量黄芩苷干预组间差异均有统计学意义:低与中剂量间t=3.36,P=0.001,中与高剂量组间t=4.92,P0.001,低与高剂量间t=8.28,P0.001。(3)各组间肝细胞中Caspase-9表达水平的比较:与对照组相比,空白对照亚组灰度值明显减少,差异有统计学意义t=46.90,P0.001;与空白对照亚组相比,低、中、高剂量黄芩苷干预组表达差异具有统计学意义:t值分别为14.00、34.32、25.71,P值均为0.001;低、中、高剂量黄芩苷干预组间差异均有统计学意义:低与中剂量组间t=20.31,P0.001,中与高剂量组间t=8.61,P0.001,低与高剂量组间t=11.70,P0.001。5.各组肝细胞凋亡率的比较:与对照组相比,空白对照亚组肝细胞凋亡率显著升高,差异有统计学意义t=18.33,P0.001;与空白对照亚组相比,低、中、高剂量黄芩苷干预亚组明显减少,差异有统计学意义,t值分别为7.25、10.81、10.80,P值均为0.001;低与中剂量组间t=3.56,P=0.001,低与高剂量组间t=3.55,P=0.001,中与高剂量组之间差异无统计学意义P=1.000。结论:本研究结果表明,黄芩苷干预后可以使子痫前期模型大鼠肝细胞中的,XIAP、Bcl-2表达量增加,Caspase-9表达减少,同时肝细胞凋亡率下降;黄芩苷对子痫前期模型大鼠肝脏有保护作用,并呈现剂量依赖性的特点,验证了黄芩苷具有治疗子痫前期潜在的临床价值,其安全有效的治疗剂量仍需进一步研究。
【关键词】：子痫前期 黄芩苷 肝细胞 XIAP Bcl-2
【学位授予单位】：山西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R285.5;R-332
【目录】：

• 中文摘要5-9
• 英文摘要9-13
• 常用缩写词中英文对照表13-14
• 前言14-15
• 1 材料与方法15-20
• 1.1 一般资料15
• 1.2 研究方法15-19
• 1.3 诊断标准19
• 1.4 统计学处理19-20
• 2 结果20-30
• 2.1 各组孕鼠尾动脉压及 24h尿蛋白的比较20-22
• 2.2 肝脏组织镜下结构的比较（HE染色）22-23
• 2.3 XIAP在各组肝细胞中的表达23-24
• 2.4 Bcl-2 在各组肝细胞中的表达24-26
• 2.5 Caspase-9 在各组肝细胞的表达26-27
• 2.6 各组肝细胞凋亡率（TUNEL法）27-30
• 3 讨论30-35
• 4 结论35-36
• 参考文献36-40
• 综述40-52
• 参考文献47-52
• 致谢52-53
• 在学期间研究成果53-54
• 个人简历54

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 王玲;刘俊艳;牛彦平;檀国军;;缺氧缺血性脑损伤大鼠Caspase-9的表达及高压氧干预疗效[J];脑与神经疾病杂志;2007年04期

2 李天富,吕传真,罗玉敏,洪震;杏仁核内注射KA诱导的边缘叶发作大鼠海马中caspase-9的表达[J];中国临床神经科学;2004年02期

3 文亚渊,刘宝华,付涛;胃癌组织中survivin,caspase-3和caspase-9基因表达的变化[J];第三军医大学学报;2005年21期

4 裴海涛;曹东明;李红云;郭壮丽;;BMP-7对大鼠脑缺血再灌注损伤后Caspase-9表达的影响[J];中风与神经疾病杂志;2014年01期

5 王成裕,张云汉,李惠翔,高冬玲,张岚,尹玉惠;乳癌组织中Caspase-9的表达[J];郑州大学学报(医学版);2005年05期

6 孙军培;刘久华;;Apaf-1、Caspase-9及凋亡体调节的研究进展[J];中华全科医学;2013年07期

7 王举;窦忠霞;王会春;张文梁;王有德;;survivin和caspase-9在原发性肝细胞癌组织中的表达及意义[J];吉林大学学报(医学版);2009年06期

8 支庆江;高恒岭;陈鸿强;张曙光;时倡文;;Caspase-9表达对肝硬化门静脉高压中巨脾形成的作用机制探讨[J];中国现代普通外科进展;2010年02期

9 李军华;于皆平;于红刚;刘晋;罗和生;;蛋白激酶B、Caspase-9通路活化对胃癌细胞生长及化疗敏感性的影响[J];中华消化杂志;2006年01期

10 刘旺华;李花;周小青;何倩;陈淑华;贺东;于跃武;;大鼠脑缺血再灌注后Smac、XIAP和caspase-9表达及活血通络方的干预作用[J];现代生物医学进展;2009年13期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 尚东;邓秋明;;大黄素对全身炎症反应综合征中性粒细胞凋亡调控蛋白Caspase-9及Bcl-xL/Bax的影响[A];2010中国医师协会中西医结合医师大会摘要集[C];2010年

2 刘晓菲;杨清;王光伟;王玉;;Livin、Caspase-9蛋白在子宫内膜癌组织中的表达及其意义[A];中华医学会第一届全球华人妇产科学术大会暨第三次全国妇产科中青年医师学术会议论文汇编[C];2007年

3 兰蕾;常小荣;张国山;石佳;;艾烟对大鼠病理组织切片和肺HSP70及Caspase-9表达的影响[A];第三届全国中医药博士生优秀论文颁奖会议论文集[C];2012年

4 张勇;张巍;薛茜;李伟;孟艳玲;杨安钢;;Caspase-9特异性siRNA表达载体构建及基因沉寂效应研究[A];中国免疫学会第五届全国代表大会暨学术会议论文摘要[C];2006年

5 伍冬梅;才秀莲;陆祥;;染锰大鼠睾丸生精细胞凋亡与Caspase-9、Livin表达关系的研究[A];中国解剖学会2012年年会论文文摘汇编[C];2012年

6 谢海树;杨卫忠;石松生;;大鼠脑缺血预处理后Caspase-9蛋白和mRNA的表达及意义[A];2011中华医学会神经外科学学术会议论文汇编[C];2011年

7 王军;王伟;徐艳;张文辉;周长美;张绍美;;HIBD新生大鼠皮层神经元胞浆Smac/Diablo、caspase-9的表达研究及参附注射液的干预作用[A];第六届江浙沪儿科学术会议暨儿科学基础与临床研究进展学术班论文汇编[C];2009年

8 郭长存;JR Fraser Cummings;Alessandra Geremia;John Beckly Rachel Cooney;Laura Hancock;Saad Patham;Derek P Jewell;;Caspase-9和Runx3基因多态性与炎症性肠病的相关性[A];中华医学会第七次全国消化病学术会议论文汇编（下册）[C];2007年

9 段淑荣;王君;王海涛;董力芹;王德生;张黎明;;人脑缺血后内质网伴侣蛋白GRP78和Caspase-9的表达变化[A];第十一届全国神经病学学术会议论文汇编[C];2008年

10 吴军;曾昭;;瑞舒伐他汀对大鼠实验性脑出血脑组织Caspase-9和C-IAP-1的表达变化影响的研究[A];中国康复医学会脑血管病专业委员会换届暨第十五次全国脑血管病康复学术年会、湖南省康复医学会神经康复专业委员会2012学术年会论文集[C];2012年

中国博士学位论文全文数据库 前1条

1 朱炬;大鼠局灶性脑缺血再灌注后神经元损伤与caspase-9及其相关因素的表达及调节的研究[D];天津医科大学;2003年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 张丙信;Apaf-1、Caspase-9、Bax、Bcl-2和p53在基底细胞样乳腺癌中的表达及临床意义[D];承德医学院;2015年

2 高洪娟;不同剂量黄芩苷对子痫前期模型大鼠肝细胞XIAP、Bcl-2和Caspase-9的表达及肝细胞凋亡率的影响[D];山西医科大学;2016年

3 刘柳青;大鼠脑缺血再灌注后溶酶体组织蛋白酶D、Caspase-9的表达及抑胃酶肽A对其的影响[D];南华大学;2010年

4 徐义荣;扁平苔藓中caspase-9、Apaf-1的表达及其与细胞凋亡的关系[D];山西医科大学;2007年

5 张涛杰;Caspase-9在肉用绵羊主要生殖器官中的分布研究[D];甘肃农业大学;2011年

6 刘郁;丁苯酞对大鼠局灶性脑缺血再灌注后Caspase-9表达及神经元凋亡的影响[D];山西医科大学;2008年

7 田秀标;甲减大鼠肾脏UCP2基因与caspase-9蛋白表达的研究[D];河北医科大学;2009年

8 曾昭;瑞舒伐他汀对大鼠实验性脑出血脑组织Caspase-9和C-IAP-1的表达变化影响的研究[D];中南大学;2012年

9 苏波;阿托伐他汀对大鼠冠状动脉微栓塞致心肌细胞凋亡及Caspase-9活化的影响[D];广西医科大学;2010年

10 潘科;Caspase-9和Bax在胃癌中表达以及和凋亡的关系[D];大连医科大学;2007年

  本文关键词：不同剂量黄芩苷对子痫前期模型大鼠肝细胞XIAP、Bcl-2和Caspase-9的表达及肝细胞凋亡率的影响，由笔耕文化传播整理发布。

，

本文编号：261371