植酸在MPTP诱导的帕金森病小鼠模型中的抗炎机制研究

发布时间：2017-04-09 15:05

  本文关键词：植酸在MPTP诱导的帕金森病小鼠模型中的抗炎机制研究，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:研究植酸(Phytic acid,PA)对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)诱导的帕金森病小鼠模型中脑酪氨酸羟化酶(Tyrosine hydroxylase,TH)表达、离子钙接头蛋白(iba1)含量、诱导型一氧化氮合酶(i NOS)活性、核转录因子kappa B(NF-κB)以及磷酸化细胞外调节蛋白激酶(p-ERK)表达的影响。探讨植酸通过抗炎作用对MPTP诱导的帕金森小鼠模型多巴胺能神经元的保护作用机制。方法:C57BL6小鼠,随机分为Control组、MPTP损伤组和PA治疗组。旋转法检测帕金森小鼠模型的行为学变化,免疫组织化学法检测帕金森小鼠模型黑质中多巴胺能神经元损伤和小胶质细胞激活标志物iba1的表达,实时定量荧光PCR(Q-PCR)法检测i NOS活性,蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测NF-κB和p-ERK蛋白的表达。结果:与Control组相比,MPTP损伤组小鼠运动迟缓,黑质中出现大量的神经元缺失,小胶质细胞大量激活,i NOS活性增加,NF-κB和p-ERK蛋白表达增多。而与MPTP损伤组相比,PA治疗组小鼠运动机能得到改善,多巴胺能神经元数量增多,活化小胶质细胞减少,i NOS活性减弱,NF-κB和p-ERK蛋白表达减少。结论:PA能抑制帕金森模型小鼠黑质区域小胶质细胞激活,降低帕金森模型小鼠黑质区域NF-κB的核转移、ERK1/2的磷酸化以及i NOS的活性,从而抑制帕金森模型小鼠黑质区域的炎症反应,最终抑制多巴胺能神经元的损伤。
【关键词】：植酸 帕金森病 炎症 一氧化氮合酶 NF-κB ERK
【学位授予单位】：青岛大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R742.5;R-332
【目录】：

• 摘要2-3
• Abstract3-6
• 引言6-7
• 第1章 实验材料7-9
• 1.1 动物7
• 1.2 主要药品和试剂7-8
• 1.3 主要仪器设备8-9
• 第2章 实验方法9-13
• 2.1 帕金森小鼠模型制备9
• 2.2 行为学检测9
• 2.3 组织处理与灌注9
• 2.4 免疫组织化学9-10
• 2.5 RNA提取及实时荧光定量PCR（Q-PCR）10
• 2.5.1 RNA的提取10
• 2.5.2 RT-PCR10
• 2.5.3 Q-PCR10
• 2.6 诱导型一氧化氮合酶活性检测10-11
• 2.7 蛋白免疫印迹（western blot）分析11-12
• 2.7.1 蛋白样品制备11
• 2.7.2 配置SDS-PAGE凝胶11
• 2.7.3 上样及SDS-PAGE凝胶电泳11
• 2.7.4 转膜11
• 2.7.5 封闭11-12
• 2.7.6 孵育抗体12
• 2.7.7 显色12
• 2.8 统计分析12-13
• 第3章 实验结果13-17
• 3.1 植酸对帕金森小鼠模型行为学的影响13
• 3.2 植酸对黑质中多巴胺能神经元的影响13-14
• 3.3 植酸对小胶质细胞活性的影响14-15
• 3.4 植酸对一氧化氮合酶活性的影响15
• 3.5 植酸对NF-κB和p-ERK1/2 蛋白表达的影响15-17
• 第4章 讨论17-19
• 结论19-20
• 参考文献20-24
• 综述24-41
• 摘要24
• 1 帕金森疾病中存在胶质细胞激活和炎症反应24-27
• 2 神经炎症在帕金森病中的作用27-28
• 3 胶质细胞在帕金森病中的作用28-29
• 4 抑制小胶质细胞活性对多巴胺能神经元的保护作用29-30
• 5 抑制炎症是一种有前景的治疗帕金森病的方法30-31
• 6 结语31-32
• 综述的参考文献32-41
• 攻读学位期间的研究成果41-42
• 致谢42-43

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