BDSF增强RAW264.7巨噬细胞的吞噬作用以及杀伤癌细胞的能力

发布时间：2017-04-19 17:09

  本文关键词：BDSF增强RAW264.7巨噬细胞的吞噬作用以及杀伤癌细胞的能力，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：巨噬细胞来源于生物体中的单核细胞,是一种位于组织内的白细胞,具有吞噬病原体等保护机体的作用,十二烷基癸烯酸BDSF是一种来源于细菌的小分子短链脂肪酸,可以抑制白念珠菌的生长。本课题研究BDSF在体外对小鼠RAW264.7巨噬细胞吞噬白念珠菌的作用,及对RAW264.7巨噬细胞的抗癌活性和蛋白组学的影响。通过瑞氏吉姆萨染色法检测BDSF对巨噬细胞吞噬酵母态白念珠菌的吞噬能力的变化,并利用共聚焦显微镜观察巨噬细胞形态变化及吞噬白念珠菌的过程;采用iTRAQ蛋白组学定量检定技术和ELISA试剂盒检测BDSF对巨噬细胞抗癌活性及蛋白组的变化；结果显示,BDSF可显著增强RAW264.7巨噬细胞吞噬白念珠菌的吞噬能力,100μM BDSF提升其吞噬率和吞噬指数近5倍;并且BDSF可以增强巨噬细胞杀伤癌细胞的能力,促进细胞分泌更多的TNF-α,100 μM BDSF作用下对癌细胞的杀伤活性和’TNF-α表达量可增加4倍。iTRAQ检测结果显示BDSF能够促进RAW264.7巨噬细胞的多种蛋白表达如Siae唾液酸乙酰酯酶和Mgp基质Gla蛋白。本课题中BDSF在细胞免疫学中增强作用显著,对细胞吞噬及癌症治疗等研究具有潜在的意义值得深入研究。本课题同时检测BDSF的类似物ATCs对白念珠菌的体外作用,并通过显微镜观察ATCs对白念珠菌生长的影响。BDSF类似物ATCs中的ATC-C8和ATC-C10在浓度为200μM时可有效抑制白念珠菌出芽生殖与生长,并抑制白念珠菌由酵母相向菌丝相的形态转变,同时还能促进白念珠菌的菌丝缩短。
【关键词】：巨噬细胞 BDSF 白念珠菌 吞噬率 iTRAQ ATCs 形态转变
【学位授予单位】：南京邮电大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R392
【目录】：

• 摘要4-5
• Abstract5-8
• 第一章 绪论8-15
• 1.1 巨噬细胞免疫功能研究进展8-12
• 1.1.1 巨噬细胞8-9
• 1.1.2 巨噬细胞在免疫功能中的作用9-11
• 1.1.3 巨噬细胞与癌细胞作用相关研究11-12
• 1.2 白念珠菌及相关疾病研究进展12-13
• 1.2.1 白念珠菌12-13
• 1.2.2 BDSF对白念珠菌体外作用的研究13
• 1.3 免疫系统对白念珠菌作用的研究进展13-15
• 第二章 BDSF对巨噬细胞吞噬酵母态白念珠菌能力的影响15-25
• 2.1 前言15-16
• 2.1.1 细胞15
• 2.1.2 菌种15
• 2.1.3 培养基及化学试剂15-16
• 2.2 实验方法16-18
• 2.2.1 细胞培养16-17
• 2.2.2 菌种培养17
• 2.2.3 BDSF对巨噬细胞吞噬酵母态白念珠菌能力的作用17-18
• 2.2.4 共聚焦显微镜拍摄吞噬过程18
• 2.3 实验结果与分析18-23
• 2.3.1 BDSF可显著增强巨噬细胞吞噬能力18-23
• 2.4 本章小结23-25
• 第三章 BDSF对小鼠RAW264.7巨噬细胞抗癌能力及蛋白组学影响的研究25-34
• 3.1 前言25
• 3.2 实验材料25-26
• 3.2.1 细胞25
• 3.2.2 培养基及化学试剂25-26
• 3.3 实验方法26-28
• 3.3.1 细胞培养26-27
• 3.3.2 BDSF对RAW264.7巨噬细胞抑制癌细胞能力的影响27
• 3.3.3 ELISA定量检测肿瘤坏死因子TNF-α27-28
• 3.3.4 iTRAQ蛋白组学技术检测BDSF对巨噬细胞蛋白组的影响28
• 3.4 实验结果与分析28-33
• 3.4.1 BDSF增强巨噬细胞杀伤能力28-30
• 3.4.2 BDSF促进巨噬细胞分泌肿瘤坏死因子TNF-α30-31
• 3.4.3 BDSF提高巨噬细胞内多种蛋白质的表达量31-33
• 3.5 本章小结33-34
• 第四章 BDSF类似物ATCs对白念珠菌体外作用的研究34-44
• 4.1 前言34-35
• 4.2 实验材料35
• 4.2.1 菌种35
• 4.2.2 培养基及化合物35
• 4.3 实验方法35-37
• 4.3.1 菌株培养35-36
• 4.3.2 ATCs对酵母相白念珠菌生长的影响36
• 4.3.3 ATCs对白念珠菌两相转化的影响36-37
• 4.3.4 ATCs白念珠菌菌丝生长长度的影响37
• 4.4 实验结果与分析37-43
• 4.4.1 ATCs可抑制酵母相白念珠菌出芽生殖与生长37-41
• 4.4.2 ATCs可抑制白念珠菌由酵母相转化为菌丝相41-42
• 4.4.3 ATCs可促进菌丝白念珠菌的菌丝缩短42-43
• 4.5 本章小结43-44
• 第五章 总结与展望44-46
• 5.1 总结44
• 5.2 展望44-46
• 参考文献46-50
• 附录1 攻读硕士学位期间申请的专利50-51
• 附录2 攻读硕士学位期间参加的科研项目51-52
• 致谢52

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