结核分枝杆菌TB10.4真核表达质粒的构建及免疫特性鉴定

发布时间：2017-05-29 19:09

  本文关键词：结核分枝杆菌TB10.4真核表达质粒的构建及免疫特性鉴定，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：以卡介苗(BCG)基因组、pEGFP质粒为模板,PCR扩增分别获得TB10.4基因片段、GFP-TB10.4融合基因片段,连接pVAX1真核表达载体,测序和酶切鉴定正确,分别命名为pVAX1-TB10.4和pVAX1-GFP-TB10.4;将重组质粒分别转染COS-7和HEK293T细胞,反转录PCR表明TB10.4基因成功转录,间接免疫荧光试验显示2种蛋白均能瞬时表达;再将重组质粒pVAX1-TB10.4免疫小鼠。结果表明:该质粒能够诱导低水平的抗体应答,同时诱发IFN-γ表达,并且能够加强BCG初次免疫后的免疫应答效果。该研究构建的真核表达质粒pVAX1-TB10.4能够诱导小鼠产生抗TB10.4免疫应答,为后续TB10.4蛋白生物学功能研究提供良好的生物材料。
【作者单位】： 扬州大学江苏省人兽共患病学重点实验室/江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心;
【关键词】： 结核分枝杆菌 TB. 真核表达 免疫应答
【基金】：国家重点基础研究发展计划项目(973-2012CB518805) 江苏省重点研发项目(BE2015343) 江苏省自然科学基金资助项目(BK20160466) 江苏高校“青蓝工程”和优势学科建设工程(PADP)
【分类号】：R392
【正文快照】： 结核病(TB)这种古老的慢性人兽共患病,4 000多年前就已流行全球,而且至今仍威胁着全球近1/3人口的健康[1],引起结核病的病原主要为结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis)。卡介苗(BCG)作为1920年研发的减毒活疫苗,已经在全球接种了超过40亿人次,目前仍然在全世界范围内免

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3 李s，

本文编号：405524