腺病毒对原代枯否细胞转染效率及增殖活性的影响

发布时间：2017-07-13 21:02

  本文关键词：腺病毒对原代枯否细胞转染效率及增殖活性的影响

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【摘要】：目的:研究腺病毒对原代肝枯否细胞(Kupffer cell,KC)的转染效率和增殖活性影响。方法:分离纯化大鼠肝KC,并以携带绿色荧光蛋白(green fluorescence protein,GFP)基因的腺病毒以不同的感染复数(multiplicity of infection,MOI)转染KC;24 h后,采用荧光显微镜和流式细胞术评估腺病毒的转染效率,以CCK-8比色法检测腺病毒对KC增殖活性的影响。结果 :经统计学处理,当病毒MOI值分别为0、100、300、500、700、900时,荧光显微镜以及流式细胞术测得不同组间GFP表达阳性细胞率均存在明显的差异(均P0.05)。经CCK8比色法发现,当MOI为300、500、700、900时各组间细胞增殖活性存在明显差异(均P0.05),而当MOI为0、100、300时各组间细胞增殖活性无明显差异(均P0.05)。结论 :腺病毒能够有效转染大鼠肝脏KC细胞并表达绿色荧光蛋白。且随着病毒MOI值的增加,腺病毒转染效率逐渐增加。大剂量的病毒对KC增殖活性存在不良影响。
【作者单位】： 南京医科大学附属上海松江中心医院感染科;
【关键词】： 原代枯否细胞 腺病毒 转染 绿色荧光蛋白 细胞增殖活性
【基金】：国家自然科学基金项目(编号:81070357,30660066) 上海市松江区科学技术攻关项目(编号:14SJGGYY22)
【分类号】：R373
【正文快照】： 肝原代肝枯否细胞(Kupffer cell,KC)主要分布于肝血窦内皮细胞之间,与肝脏内皮细胞一起成为抵御病原微生物从门静脉进入肝脏的第一道防线[1]。它可分泌各种细胞因子,在肝免疫炎症性损伤性疾病的发生发展中起关键性作用[2]。基因治疗是一种将外源性基因转入宿主细胞或组织中用

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本文编号：538348