用小鼠模型分析可溶性表达结核分枝杆菌Ag85A的免疫原性

发布时间：2017-08-30 05:13

  本文关键词：用小鼠模型分析可溶性表达结核分枝杆菌Ag85A的免疫原性

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【摘要】：【目的】可溶性表达结核分枝杆菌Ag85A蛋白,并评价其免疫原性。【方法】利用冷休克表达质粒和含有伴侣质粒的大肠杆菌对Ag85A蛋白进行可溶性原核表达,并进行纯化与鉴定,通过C57BL/6小鼠模型对Ag85A蛋白的免疫原性,包括诱导机体特异性体液免疫应答和细胞免疫应答水平进行分析。【结果】重组菌诱导后裂解上清中检测到可溶性Ag85A蛋白的表达,经过亲和层析纯化收获了纯度在90%以上的Ag85A蛋白,Western blot鉴定显示其具有较好的免疫反应性。Ag85A蛋白免疫小鼠后,血清中可以检测到高水平的Ig G抗体效价,其中Ig G2b水平要高于Ig G1。通过特异性多肽、蛋白刺激脾脏和腹股沟淋巴结细胞可分泌高水平的IFN-γ、TNF-α等Th1型细胞因子。【结论】实现了Ag85A蛋白的可溶性表达,免疫特性评价显示Ag85A蛋白可诱导机体产生强烈的特异性体液免疫应答及Th1型的细胞免疫应答,从而为其进一步免疫学功能的研究奠定了重要基础。
【作者单位】： 扬州大学江苏省人兽共患病学重点实验室/江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心;
【关键词】： 结核分枝杆菌 AgA 可溶性表达 免疫原性
【基金】：国家“973计划”(2012CB518805) 江苏省重点研发计划(BE2015343) 扬州市自然科学基金(YZ2014027) 国家自然科学基金(31201882) 江苏高校优势学科建设工程资助项目~~
【分类号】：R-332;R392
【正文快照】： Ag85复合物是结核分枝杆菌、牛分枝杆菌卡介苗主要的分泌型蛋白,在结核分枝杆菌H37Rv株中占分泌蛋白总量的30%左右,可从早期培养物中分离,是一种极不稳定的蛋白,经SDS-PAGE和等电聚焦分析可以将其分为3个组分Ag85A、Ag85B和Ag85C,大小分别为31 k Da、30k Da和31.5 k Da,结核分

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本文编号：757430