人乳头瘤病毒L2蛋白的病毒样颗粒疫苗研究

发布时间：2017-09-03 14:18

  本文关键词：人乳头瘤病毒L2蛋白的病毒样颗粒疫苗研究

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【摘要】：目的:构建乙肝病毒核心抗原(HBcAg)与人乳头瘤病毒(HPV)L2抗原的融合蛋白,在大肠杆菌中重组表达形成病毒样颗粒结构;通过小鼠模型检测HBc-L2融合蛋白的免疫原性,并研究免疫后获得的小鼠血清对HPV假病毒的中和效力。方法:通过DNA合成构建16型人乳头瘤病毒L2基因片段与HBcAg基因的融合基因,将其克隆至表达载体p ET9a并在大肠杆菌中进行HBc-L2融合蛋白表达;将经纯化、鉴定后的融合蛋白免疫BALB/c小鼠,用间接ELISA方法检测小鼠血清中针对L2抗原的抗体效价,并分别研究小鼠血清对16型和18型HPV假病毒的中和效力。结果:HBc-L2融合基因经大肠杆菌系统表达形成可溶性蛋白,经硫酸铵沉淀和CL-4B凝胶分离纯化后获得纯度80%的HBc-L2蛋白;分子筛高效液相色谱-多角度激光光散射(SEC-MALS)联用技术和透射电子显微镜的分析结果表明,HBc-L2融合蛋白在表达过程中自动组装形成稳定的病毒样颗粒;将纯化后的HBc-L2蛋白免疫BALB/c小鼠可获得针对L2抗原的高滴度抗体,且小鼠血清具有中和16和18型两种假病毒的中和抗体活性。结论:HBc-L2病毒样颗粒可以有效地增强L2抗原的免疫原性,并可刺激机体产生针对多型HPV的免疫保护力,是一个具有潜力的新型广谱HPV疫苗。
【作者单位】： 天津康希诺生物技术有限公司天津市呼吸道细菌重组及结合疫苗企业重点实验室;
【关键词】： 人乳头瘤病毒 L抗原 乙肝病毒核心抗原 病毒样颗粒 免疫原性 中和抗体
【分类号】：R392
【正文快照】： 人乳头瘤病毒(Human papillomavirus,HPV)是 一种无包膜双链DNA病毒,能引起子宫颈癌、生殖器疣等肿瘤疾病或癌症[1]。宫颈癌在妇女中发生率位列第二,在发展中国家发生率明显高于发达国家。统计表明,我国每年新增宫颈癌患者约15万人左右,且年轻患者比例上升明显[2]。近年来,运，

本文编号：785492