去血清饥饿法对卵巢颗粒细胞自噬因子LC3和Beclin-1表达的影响

发布时间：2017-09-08 03:50

  本文关键词：去血清饥饿法对卵巢颗粒细胞自噬因子LC3和Beclin-1表达的影响

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【摘要】：目的观察去血清饥饿法对卵巢颗粒细胞自噬因子LC3和Beclin-1表达的影响。方法用去血清的培养液诱导处于对数生长期的颗粒细胞,0、4、12、24 h后用单丹磺酰戊二胺(MDC)荧光染色法检测自噬体的形成,反转录-聚合酶链反应(RT-PCT)和Western blot方法分别检测颗粒细胞微管相关蛋白1轻链3(MAPLC3)和Beclin-1 mRNA和蛋白的表达。结果随着去血清时间的延长,MDC阳性细胞数及自噬泡数量增多;4 h后LC3-Ⅱ及Beclin-1mRNA表达开始增加,且随着时间增加有增加趋势[LC3-Ⅱ:(0.21±0.02)、(0.45±0.12)、(0.60±0.05)、(0.74±0.03),P0.05;Beclin-1:(0.20±0.06)、(0.37±0.11)、(0.52±0.07)、(0.69±0.07),P0.05];4 h后蛋白LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值增加,Beclin-1蛋白表达亦增加,且随时间增加有增加的趋势[LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ:(0.12±0.05)、(0.32±0.09)、(0.63±0.07)、(0.92±0.04),P0.01;Beclin-1:0,(61±0.01)、(0.83±0.11)、(1.09±0.05)、(1.35±0.10),P0.05]。结论去血清饥饿可诱导颗粒细胞自噬的发生,这可能与卵泡发育和闭锁的发生、发展有关。
【作者单位】： 浙江嘉兴学院;
【关键词】： 去血清饥饿法 颗粒细胞 自噬因子 LC Beclin-
【基金】：嘉兴市科技局课题(2013AY21046)资助 浙江省教育厅科研项目资助(Y201534052) 浙江省大学生创新项目资助(2015R417003)
【分类号】：R321
【正文快照】： 颗粒细胞是组成卵泡的最大细胞群,颗粒细胞的增殖与凋亡对卵泡的发育、成熟及闭锁等密切相关。卵泡的发育过程不仅仅与颗粒细胞增殖与凋亡相关,近年来,人们发现与颗粒细胞的自噬也关系密切[1]。自噬主要是降解由于各种原因损坏的细胞器和一些大分子物质,为其他细胞提供赖以生，

本文编号：811723